GmXTH23基因的克隆及抗旱性鉴定

发布时间：2023-04-09 21:05

　　【目的】木葡聚糖内转糖苷酶(XTH)与细胞壁的生理活动及抗逆性密切相关。课题组前期对干旱胁迫下大豆转录组的结果进行分析,发现大豆Glyma.13G095000(GmXTH23)基因是一个编码木葡聚糖内转糖苷酶(XTH)的基因,基于GmXTH23基因表达量受干旱胁迫影响显著的事实,通过生物信息学、表达模式分析及抗性鉴定试验等研究,为进一步探究GmXTH23基因的功能提供依据,为大豆抗逆的遗传改良提供理论参考。【方法】以垦丰16大豆为试验材料克隆GmXTH23基因;利用qRT-PCR方法探究基因的表达模式;利用基因枪法进行亚细胞定位;将GmXTH23基因转入拟南芥中,并进行干旱胁迫下的表型试验;用茚三酮比色法测定游离脯氨酸含量,氮蓝四唑法测定超氧化物歧化酶含量,硫代巴比妥酸比色法测定丙二醛含量。【结果】GmXTH23在大豆各组织中皆有表达,在茎中的表达量最高;亚细胞定位的结果表明该基因蛋白定位于细胞膜上;干旱胁迫下的表型试验结果表明,过表达GmXTH23基因的拟南芥植株发芽率、根长皆高于野生型拟南芥,复水后恢复正常的植株比例也相对较高;过表达株系与野生型株系相比其PRO含量与SOD含量较高...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 试验材料
        1.1.1 植物材料
        1.1.2 主要试剂
    1.2 方法
        1.2.1 大豆基因Gm XTH23的克隆
        1.2.2 Gm XTH23基因的组织表达及胁迫下的表达模式分析
        1.2.3 Gm XTH23蛋白亚细胞定位
        1.2.4 Gm XTH23的遗传转化
        1.2.5 表型试验
        1.2.6 相关指标测定
2 结果分析
    2.1 基因Gm XTH23的克隆及表达载体构建
    2.2 基因Gm XTH23不同组织和逆境胁迫下表达模式分析
    2.3 Gm XTH23蛋白的亚细胞定位
    2.4 转基因Gm XTH23拟南芥抗旱性鉴定
    2.5 相关生理指标的测定
3 讨论



本文编号：3787731