转新型抗虫基因Vip3A棉花新种质的创制

发布时间：2023-04-29 00:36

　　该研究构建植物表达载体pBin438-Vip3A,通过农杆菌介导法转化棉花品种‘冀合713’,将新型抗虫基因Vip3A导入到棉花植株,创制对棉铃虫抗性的转基因棉花新种质。结果表明:(1)PCR检测Vip3A基因已经导入到棉花基因组中且能够稳定遗传。(2)室内抗虫性鉴定表明,与对照相比转基因植株对棉铃虫的抗性显著提高,并获得2株高抗和3株抗棉铃虫的转Vip3A基因株系。(3)Southern blotting结果显示,转基因株系BV01为单拷贝。(4)Elisa检测表明,外源Vip3A基因在BV01的根、茎、叶、花、种子中都有表达,在叶片中的Vip3A蛋白表达为苗期>蕾期>花期>铃期>吐絮期。该研究创制了新型抗虫转基因棉花材料,为培育棉花新型抗虫品种提供了种质资源。

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 供试材料
    1.2 方 法
        1.2.1 重组质粒pBin438-Vip3A的构建
        1.2.2 农杆菌介导的棉花下胚轴的遗传转化
        1.2.3 棉花总DNA的提取及PCR检测
        1.2.4 转基因棉花植株的Southern blotting 检测
        1.2.5 转基因植株蛋白表达检测分析
        1.2.6 转基因棉花植株的抗虫性鉴定
2 结果与分析
    2.1 农杆菌介导的棉花转化植株的获得
    2.2 转基因棉花株系的抗性筛选和PCR检测
    2.3 转Vip3A基因棉花植株的抗虫性检测
    2.4 转基因株系VB1 Southern blotting和Elisa分析
3 讨 论



本文编号：3804805