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CASK基因敲除对小鼠糖代谢的影响及机制探讨

发布时间:2023-05-12 20:30
  目的:我们前期研究表明,钙/钙调蛋白依赖性丝氨酸蛋白激酶(calcium/calmod ulin-dependent serine protein kinase,CASK)在胰岛β细胞中高表达且参与了胰岛素分泌释放过程,但其具体作用机制及在2型糖尿病中的作用尚不清楚。为在动物水平上验证前期实验结果和深入研究CASK的作用,本研究通过构建条件性胰岛β细胞CASK基因敲除(βCASK KO)小鼠动物模型,对CASK在胰岛β细胞中的功能和对糖代谢的影响进行初步探索。方法:1.使用Cre-loxp基因打靶系统和他莫昔芬诱导构建条件性β细胞CASK基因敲除小鼠;2.对正常饮食βCASK KO小鼠进行代谢表型分析;3.建立高脂饮食诱导的2型糖尿病模型小鼠;4.对高脂饮食βCASK KO小鼠进行代谢表型分析。结果:1.使用Cre-loxp基因打靶系统和他莫昔芬诱导后,qPCR、Western blot、免疫荧光实验结果证实条件性胰岛β细胞CASK基因敲除小鼠构建成功;2.正常饮食喂养至第16周,βCASK KO小鼠与对照组小鼠相比,体重、血糖、糖耐量、胰岛素敏感性、血清胰岛素水平、GSIS功能以及胰...

【文章页数】:70 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
中文摘要
英文摘要
主要缩略词表
前言
文献综述
材料与方法
    1.实验材料
        1.1 主要仪器
        1.2 主要试剂
        1.3 其他
    2.研究方法
        2.1 小鼠胰岛分离提取和培养
        2.2 蛋白质免疫印迹(Western blot)实验
        2.3 胰岛 RNA 提取和定量 PCR 实验
        2.4 动物实验
    3.数据处理及统计学
结果
    1.条件性胰岛β细胞CASK基因敲除(βCASK KO)小鼠的构建
    2.正常饮食βCASK KO 小鼠的代谢表型分析
    3.高脂饮食 2 型糖尿病小鼠模型的建立及鉴定
    4.高脂饮食的βCASK KO 小鼠的代谢表型分析
分析与讨论
结论
参考文献
致谢
作者简介



本文编号:3814584

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