沉默胶质瘤相关癌基因同源物2基因对结肠癌细胞系SW620增殖和凋亡的影响

发布时间：2023-11-22 19:53

　　背景与目的:胶质瘤相关癌基因同源物2 (glioma-associated oncogene homolog 2,Gli2)是Hedgehog信号通路重要的转录因子,它不仅与正常细胞的生长密切相关,而且在多种肿瘤细胞中异常激活。探讨Gli2对结肠癌细胞系SW620增殖和凋亡的影响及其可能机制。方法:以Gli2干扰慢病毒载体感染SW620细胞,实验设干扰组、空病毒载体组和对照组,采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白[质]印迹法(Western blot)检测细胞中Gli2 mRNA表达和蛋白水平,采用细胞计数试剂盒-8 (cell counting kit-8,CCK-8)、集落形成实验和倍增时间检测细胞的增殖情况,流式细胞术(flow cytometry)检测各组细胞周期和凋亡情况,Western blot法检测细胞中ERK1/2、p-ERK1/2、Bcl-2、Bax和cyclin D1蛋白水平。结果:SW620细胞转染慢病毒载体72 h后,可见...

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 材料和细胞系
    1.2 试验方法
        1.2.1 细胞培养
        1.2.2 分组及慢病毒载体感染
        1.2.3 RTFQ-PCR检测细胞m RNA表达
        1.2.4 Western blot检测细胞Gli2、ERK1/2、p-ERK1/2、Bcl-2、Bax和cyclin D1蛋白水平
        1.2.5 细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8）测定细胞增殖活性
        1.2.6 计算细胞倍增时间
        1.2.7 集落形成实验检测各组细胞集落形成率
        1.2.8 流式细胞术（flow cytometry）检测细胞周期和凋亡率
    1.3 统计学处理
2 结果
    2.1 重组慢病毒载体感染效果鉴定
    2.2 沉默Gli2基因能显著抑制SW620细胞的增殖
    2.3 沉默Gli2基因能明显阻滞SW620细胞周期的进展
    2.4 沉默Gli2基因能明显增加SW620细胞的凋亡率
    2.5 Western blot检测各组细胞ERK1/2、p-ERK1/2、Bcl-2、Bax和cyclin D1蛋白的水平
3 讨论



本文编号：3866042