基于动物源基因分析的地沟油检测技术研究

发布时间：2017-05-23 12:12

  本文关键词：基于动物源基因分析的地沟油检测技术研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：地沟油的危害及普遍性已广为人知,其检测鉴别方法已有很多相关研究,但至今未形成各方认同的标准检测方法。大部分地沟油中不可避免的会混入动物源成分,本课题从分子生物学角度进行系统研究,首先探讨了食物链中主要动物基因信息在油脂精炼工艺中的衰减规律,其次利用PCR技术研究了4种动物源信息在油脂中的检出状况和检出限,并进行了盲样验证,得到了一种较为可行的动物信息鉴别检测技术,为地沟油的鉴别检测提供新的技术依据。主要结论如下:(1)针对食物链中主要的4种动物肉,以DNA浓度和纯度为指标,比较两种不同DNA提取前处理方法。结果表明:真空冷冻干燥处理提取出的DNA浓度和纯度高,方法较优。(2)对以鸡油和猪油为代表的动物油脂进行脱胶、脱色、脱臭处理,模拟油脂精炼工艺,研究其DNA信息衰减变化。结果表明:鸡油精炼处理后DNA含量下降了9.5%,猪油精炼处理后DNA含量下降了11%,因此确证了油脂精炼工艺会对动物基因信息造成部分损失。(3)不同动物油脂检出限研究:将不同的动物油脂(猪油、牛油、羊油和鸡油)按10%、5%、1%、0.5%、0.1%的比例与食用油混掺,提取油中DNA后用PCR技术检测食用油中掺入的动物油信息。结果表明:食用油中0.1%(m/m)单一动物源性信息均可被检出。(4)油脂中不同种类混掺的动物油检测鉴别试验:将两种、三种、四种动物油脂分别与食用油混掺,提取其DNA后进行PCR扩增。结果表明:在多种动物信息共存的情况下每种引物只对相应动物信息进行扩增,其他动物源信息对表达无干扰,其对应动物源信息检出限亦为0.1%(m/m),藉此,该技术可实现对混合油样的分析鉴别,可用于疑似地沟油分析评判。(5)盲样验证试验:自制了在食用油中混掺了不同比例和种类的动物油6个油样进行盲样分析。结果表明:所测样品中盲样检出率为100%,鉴别正确率为92%。本研究建立的基于PCR技术鉴别检测食用油中混掺动物油脂的方法是可行的,可用于地沟油初步筛查。
【关键词】：地沟油 动物基因信息 PCR技术 衰减规律 检出限
【学位授予单位】：西北农林科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：TS227
【目录】：

• 摘要5-6
• ABSTRACT6-10
• 第一章 文献综述10-20
• 1.1 地沟油概述10-11
• 1.1.1 概念10
• 1.1.2 危害10
• 1.1.3 国内外研究现状及发展趋势10-11
• 1.2 地沟油检测技术研究进展11-17
• 1.2.1 光谱检测技术11-14
• 1.2.2 色谱检测技术14-15
• 1.2.3 免疫及分子生物学技术15-16
• 1.2.4 电子鼻技术16
• 1.2.5 电化学分析技术16-17
• 1.2.6 其他检测技术17
• 1.2.7 感官鉴别法17
• 1.3 聚合酶链式（PCR）技术的应用17-18
• 1.4 本课题研究目的及意义18-19
• 1.5 主要研究内容19
• 1.6 技术路线19-20
• 第二章 DNA提取方法的研究20-23
• 2.1 试验材料与方法20-22
• 2.1.1 动物组织DNA的提取20-21
• 2.1.2 油中DNA的提取21-22
• 2.2 结果与讨论22
• 2.2.1 动物组织DNA的提取22
• 2.3 小结22-23
• 第三章 动物基因信息在油脂精炼过程中衰减规律研究23-27
• 3.1 试验材料与方法23-25
• 3.1.1 试验材料23
• 3.1.2 试验试剂23-24
• 3.1.3 主要仪器及设备24
• 3.1.4 模拟油脂精炼过程24
• 3.1.5 油中DNA的提取方法24-25
• 3.1.6 DNA含量的测定25
• 3.2 结果与讨论25-26
• 3.3 小结26-27
• 第四章 动物油脂在食用油中检出限和检出状况研究27-38
• 4.1 试验材料与方法27-29
• 4.1.1 试验材料27
• 4.1.2 试验试剂27-28
• 4.1.3 主要仪器设备28
• 4.1.4 试验方法28-29
• 4.2 结果与讨论29-37
• 4.2.1 食用油中单一动物源性成分特异性和灵敏性检测29-32
• 4.2.2 食用油中多种动物源性成分的检出状况和灵敏性检测32-37
• 4.3 小结37-38
• 第五章 盲样验证38-42
• 5.1 试验材料与方法38
• 5.1.1 试验材料38
• 5.1.2 试验试剂38
• 5.1.3 主要仪器设备38
• 5.1.4 试验方法38
• 5.2 结果与讨论38-40
• 5.3 小结40-42
• 第六章 结论与展望42-44
• 6.1 结论42
• 6.2 创新点42-43
• 6.3 展望43-44
• 参考文献44-49
• 致谢49-50
• 作者简介50

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