转飞蝗羧酸酯酶基因果蝇品系的构建及其在有机磷农药代谢解毒中的作用

发布时间：2024-12-02 21:31

　　 【目的】在活体水平验证飞蝗Locusta migratoria羧酸酯酶基因LmCesA1和LmCesA2是否参与有机磷杀虫剂的代谢解毒。【方法】采用Gal4/UAS系统,借助转基因技术,构建两个转基因黑腹果蝇Drosophila melanogaster品系,选取3品系Gal4(act-Gal4, tub-Gal4和c601-Gal4)果蝇作为母本分别与两种转基因果蝇(UAS-LmCesA1和UAS-LmCesA2)以及一种亲本对照果蝇(RB0006{y v; attP40, y+})进行杂交。对子一代转基因果蝇从DNA和RNA水平进行验证,筛选出成功构建的品系。采用生物测定方法检测转基因果蝇与Gal4果蝇杂交后代对马拉硫磷的抗性。【结果】转基因果蝇DNA水平鉴定结果显示,转基因果蝇tub>LmCesA1和tub>LmCesA2中分别扩增到目的基因LmCesA1和LmCesA2,而对照组果蝇tub>attP40中未扩增到目的基因。转基因果蝇RNA水平的检测结果显示,这两个基因在相应的杂交后代中均有表达,表明转基因果蝇构建成功。目的基因在转基因果蝇成虫不同组织中的表达结...

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【部分图文】：

图1 转基因黑腹果蝇DNA水平的鉴定结果

以DNA为模板进行PCR扩增,LmCesA1和LmCesA2的PCR产物的长度分别为1648bp和1525bp,由图1可知,转基因果蝇tub>LmCesA1和tub>LmCesA2中均能扩增到目的基因,而对照组果蝇tub>attP40中未扩增到目的基因。测序结果显示插入的....

图2 转基因黑腹果蝇RNA水平的鉴定结果

c601-Gal4在果蝇中肠上皮细胞中高表达,本研究采用RT-qPCR方法鉴定了目的基因LmCesA1和LmCesA2分别在转基因果蝇c601>LmCesA1和c601>LmCesA2成虫不同组织部位(脑、表皮和肠道)中的表达情况。由图3可知,两个目的基因LmCesA1和LmCe....

图3 LmCesA1(A)与LmCesA2(B)基因在转基因黑腹果蝇成虫不同组织中的表达谱

图2转基因黑腹果蝇RNA水平的鉴定结果2.3转基因果蝇对马拉硫磷的耐受性

本文编号：4013938