黄瓜谷氧还蛋白CsGRX1基因对黄瓜遗传转化体系的建立
本文关键词：黄瓜谷氧还蛋白CsGRX1基因对黄瓜遗传转化体系的建立，由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】：黄瓜(Cucumis sativus L.)作为我国的主要蔬菜作物之一,在世界蔬菜栽培面积中居于第4位。黄瓜种内资源非常有限,利用基因工程培育新品种成为提高黄瓜产量和品质的重要手段。本试验利用黄瓜谷氧还蛋白CsGRX1基因对14-1进行了遗传转化体系的建立及通过胚状体途径遗传转化的研究。研究结果如下:1.以子叶节为外植体通过器官再生途径建立了黄瓜的遗传转化体系。Basta的半致死浓度为0.5 mg/L、预培养时间2 d、农杆菌OD600为0.5、侵染时间15 min、共培养时间2 d时抗性芽数量较高;加入100μmol/L乙酰丁香酮转化效果较好。2.以14-1子叶节为外植体建立了通过胚状体途径的再生体系。最佳的愈伤诱导培养基为添加1.0mg/L 2,4-D的MS培养基,最佳的分化培养基为激素组合是0.05 mg/L2,4-D+1.0 mg/L KT+0.1 mg/L IAA的MS培养基。利用14-1的胚状体进行CsGRX1的遗传转化,并得到幼苗。
【关键词】：黄瓜 遗传转化 胚状体再生 CsGRX1
【学位授予单位】：西北农林科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S642.2
【目录】：
- 摘要6-7
- ABSTRACT7-10
- 第一章 文献综述10-18
- 1.1 黄瓜离体培养研究进展10-13
- 1.1.1 基因型10-11
- 1.1.2 外源激素11-12
- 1.1.3 外植体12
- 1.1.4 苗龄12-13
- 1.1.5 碳源13
- 1.1.6 硝酸银13
- 1.2 黄瓜遗传转化研究进展13-17
- 1.2.1 遗传转化的方法14-15
- 1.2.2 黄瓜遗传转化的影响因素15-17
- 1.3 谷氧还蛋白简介17
- 1.4 研究目的和意义17-18
- 第二章 农杆菌介导的黄瓜谷氧还蛋白基因CsGRX1对黄瓜遗传转化体系的建立18-26
- 2.1 试验材料和方法18-19
- 2.1.1 试验材料和培养基种类18
- 2.1.2 试验方法18-19
- 2.2 结果与分析19-23
- 2.2.1 除草剂草丁膦（Basta）敏感性测试19-21
- 2.2.2 预培养时间对黄瓜遗传转化的影响21
- 2.2.3 农杆菌浓度对黄瓜遗传转化的影响21
- 2.2.4 侵染时间对黄瓜遗传转化的影响21-22
- 2.2.5 乙酰预丁香酮处理浓度对黄瓜遗传转化的影响22
- 2.2.6 共培养时间对黄瓜遗传转化的影响22-23
- 2.2.7 14-1 遗传转化过程23
- 2.3 讨论23-24
- 2.3.1 预培养对转化的影响23-24
- 2.3.2 共培养对转化的影响24
- 2.3.3 乙酰丁香酮对转化的影响24
- 2.3.4 农杆菌浓度和侵染时间对遗传转化的影响24
- 2.4 结论24-26
- 2.4.1 除草剂草丁膦（Basta）敏感性测试24-25
- 2.4.2 预培养时间对黄瓜遗传转化的影响25
- 2.4.3 农杆菌浓度对黄瓜遗传转化的影响25
- 2.4.4 侵染时间对黄瓜遗传转化的影响25
- 2.4.5 乙酰丁香酮预处理浓度对黄瓜遗传转化的影响25
- 2.4.6 共培养时间对黄瓜遗传转化的影响25-26
- 第三章 黄瓜胚状体再生体系的建立及CsGRX1对胚状体的遗传转化26-34
- 3.1 材料与方法26-27
- 3.1.1 试验材料26
- 3.1.2 试验方法26-27
- 3.1.3 数据统计27
- 3.2 结果与分析27-32
- 3.2.1 不同基因型在愈伤诱导培养基上的诱导率27-28
- 3.2.2 14-1 在愈伤诱导培养基胚性愈伤的诱导28
- 3.2.3 14-1 在分化培养基的诱导28-30
- 3.2.4 14-1 体细胞胚的形态观察30-31
- 3.2.5 胚状体发育形成植株31
- 3.2.6 胚状体遗传转化得到幼苗31-32
- 3.3 讨论32-33
- 3.4 结论33-34
- 第四章 结论34-35
- 参考文献35-38
- 致谢38-39
- 作者简介39
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