拟南芥PXY及同源基因的表达分析

发布时间：2017-06-07 15:15

  本文关键词：拟南芥PXY及同源基因的表达分析，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：植物的维管组织是从原形成层和形成层分化而来,分生组织的干细胞向外分化为韧皮部,向内分化为木质部。CLE41多肽通过受体激酶PXY的作用,促进维管干细胞增殖。TDIF-PXY途径在维管发育过程中起重要作用,本实验主要针对PXY及其同源基因的表达分析,探究多种基因的关联作用对维管发育的影响。拟南芥PXY和PXL3、PXL4编码与CLV1相似的LRR-RLK,他们可能存在着功能上的重叠或冗余。研究PXL3、PXL4的过表达株系发现PXL基因对维管组织中分生组织细胞的分化有一定影响,抑制形成层细胞分化为木质部细胞。PXL4在影响分生组织分化的途径中可能依赖于PXY。虽然PXY和PXL3、PXL4同属于一个亚家族,但PXL3、PXL4的过表达都不会对pxy突变体的表型有促进或弥补的功能。拟南芥中有许多的基因在维管组织表达,并与分生组织的细胞命运相关。除了上述的PXY和PXL基因,还有ATHB-8、WOX4、WOX14,都与分生组织的分化相关。ATHB-8调节(原)形成层促进分化,影响木质部细胞的产生；ATHB-8能响应TDIF的调节,施加TDIF能促进ATHB-8的表达。本文研究发现,ATHB-8的表达需要PXY和PXL3、PXL4的协作,而且PXY和PXL3、PXL4间还存在着共同作用。WOX4、WOX14作为TDIF-PXY途径的下游元件调节形成层细胞的分化,在pxy突变体中WOX4、WOXl4表达量只有少量下降。本文研究发现WOX4的表达对PXL3、PXL4有依赖性,但WOX14没有。
【关键词】：拟南芥 TDR受体 维管发育 过量表达 GUS PXL 下胚轴
【学位授予单位】：华中农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：Q943.2
【目录】：

• 摘要6-7
• Abstract7-8
• 缩略词8-9
• 第一章 前言9-19
• 1 研究背景9-10
• 2 文献综述10-18
• 2.1 植物维管10-11
• 2.2 CLE家族对植物维管的调控11
• 2.3 TDIF及其受体TDR的生理功能11-13
• 2.4 LRR-RLK家族参与维管发育调控13-14
• 2.5 PXL3、PXL4、BAM3参与维管发育途径14-15
• 2.6 WOX4、WOX14对维管发育的影响15-16
• 2.7 ATHB-8、ATHB-15对维管发育的影响16-18
• 3 研究目的与意义18-19
• 第二章 PXY与PXL基因的相关性研究19-35
• 1 材料和方法19-25
• 1.1 材料与试剂19
• 1.1.1 植物材料19
• 1.1.2 试剂和仪器19
• 1.2 实验方法19-25
• 1.2.1 抗性筛选19-20
• 1.2.2 DNA扩增鉴定阳性苗20-21
• 1.2.3 提取RNA21-22
• 1.2.4 半定量RT-PCR22-24
• 1.2.5 转化苗筛选纯合体24
• 1.2.6 半薄切片方法24-25
• 2 结果与分析25-33
• 2.1 半定量RT-PCR分析25-26
• 2.1.1 T1代检验转化苗25-26
• 2.1.2 T3半定量RT-PCR检验26
• 2.2 转化植株表型观26-28
• 2.3 转化株的维管表型28-33
• 2.3.1 下胚轴的维管表型28-30
• 2.3.2 花葶维管的维管表型30-33
• 3 讨论33-35
• 第三章 拟南芥PXY及同源基因的启动子表达特性35-44
• 1 材料与方法35-37
• 1.1 材料和试剂仪器35-36
• 1.2 实验方法36-37
• 1.2.1 GUS染色方法36
• 1.2.2 转GUS基因株系筛选36-37
• 1.2.3 转GUS株系下胚轴活体切片37
• 2 结果与分析37-42
• 2.1 转GUS株系目的基因个体水平的表达位置37-40
• 2.2 转GUS株系目的基因组织水平的表达位置40-42
• 3 讨论42-44
• 总结和展望44-45
• 参考文献45-51
• 致谢51

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 陈名红;陈毅坚;叶艳青;苏源;李成云;;用半定量RT-PCR法分析基因表达水平的影响因素[J];贵州农业科学;2009年08期

2 马媛媛,甘睿,王宁宁;植物富含亮氨酸重复序列型类受体蛋白激酶的生物学功能[J];植物生理与分子生物学学报;2005年04期

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1 杨海峰;利用拟南芥突变体鉴定木材形成的相关基因[D];中国林业科学研究院;2007年

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本文编号：429466