茶树亚硝酸还原酶基因CsNiR的克隆及表达分析

发布时间：2017-08-23 08:32

  本文关键词：茶树亚硝酸还原酶基因CsNiR的克隆及表达分析

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【摘要】：以‘龙井43’茶树叶片的c DNA为模板,利用RT PCR技术克隆了茶树亚硝酸还原酶基因(CsNiR),得到完整的ORF全长为1 764 bp,编码587个氨基酸;所推导的氨基酸序列与垂枝桦(Betula pendula)、拟南芥(Arabidopsis thaliana)、菠菜(Spinacia oleracea)和水稻(Oryza sativa)的同源性均大于76%。生物信息学分析表明,CsNiR分子量为68.648 k D,等电点为6.12,为亲水性的非分泌蛋白;二级结构的预测显示,Cs Ni R具有完整的Ni R蛋白结构,含血红素蛋白β 化合物区域和4Fe-4S区域。实时荧光定量结果表明,该基因在成熟叶片中表达量高于一芽二叶和根。采用营养液水培3个茶树品种,在氮饥饿两周后分别供应正常氮素和低氮素(1和0.1 mmol·L~(-1) NH4NO3),q RT-PCR测定发现,正常氮素处理的2 h和6 h,诱导根CsNiR表达量显著增加,叶片中的表达量变化延迟到24 h之后,且变化幅度存在基因型之间的差异;低氮处理对CsNiR表达量的影响相对较小。因此,研究Cs Ni R基因的表达特性及其在茶树氮素利用中所发挥的作用,需结合茶树基因型、组织部位、供氮水平等进行综合评价。
【作者单位】： 中国农业科学院茶叶研究所国家茶树改良中心;
【关键词】： 茶树 亚硝酸还原酶 克隆 基因表达 氮素
【基金】：国家自然科学基金项目(31570695) 国家现代农业产业技术体系建设专项资金项目(CARS-23) 浙江省农业新品种选育重点专项(2012C2905-4)
【分类号】：S571.1
【正文快照】：

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4 本报记者 刘e，

本文编号：724036