小鼠MyoD基因诱导绵羊脐带间充质干细胞为成肌细胞的研究

发布时间：2017-09-02 17:18

  本文关键词：小鼠MyoD基因诱导绵羊脐带间充质干细胞为成肌细胞的研究

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【摘要】：为了探讨小鼠MyoD基因诱导绵羊脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UCMSCs)为成肌细胞的可能性,本研究用小鼠MyoD-pcDNA3.1真核表达载体质粒转染绵羊UCMSCs,在观察细胞形态变化的同时,检测成肌细胞标记蛋白表达、表达成肌细胞特异蛋白的细胞比率和成肌细胞特异基因mRNA相对表达量。结果显示,与对照组(未转染)相比,在转染MyoD-pcDNA3.1质粒后第21天,大部分细胞呈现似成肌细胞的细长管状;与对照组未表达相关蛋白相比,转染MyoD-pcDNA3.1后第8天,在荧光倒置显微镜下观察到细胞表达MyoD和Desmin蛋白荧光,转染后第16天,不仅观察到细胞表达MyoD和Desmin,而且观察到MyoG蛋白的表达;对于转染细胞后22d的细胞进行流式细胞仪检测显示,表达MyoD、MyoG和Desmin的细胞比率分别达93.5%、97.4%和99.5%;此外,实时荧光定量PCR检测显示,转染MyoD-pcDNA3.1后第28天,其细胞中的MyoD、MyoG和Desmin mRNA相对表达量分别提高2.046、2.389和5.489倍。上述结果表明,利用小鼠MyoD构建真核表达载体具有诱导UCMSCs分化为成肌细胞的功效。
【作者单位】： 东北林业大学生命科学学院;
【关键词】： 小鼠 MyoD基因 绵羊脐带间充质干细胞 诱导 成肌细胞
【基金】：黑龙江省自然科学基金面上项目(2016012) 国家自然科学基金(31000990)
【分类号】：Q23
【正文快照】： 脐带间充质干细胞(Umbilical cord mesenchy-mal stem cells,UCMSCs)具有与其他成体干细胞类似的自我更新和多向分化能力。诱导UCMSCs为其他体细胞的相关研究在探明细胞重编程机制中具有重要意义。目前,已建立包括人在内的多种动物UCMSCs分离培养及纯化流程[1-2],该细胞分离培

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本文编号：779859