丝瓜18S rRNA基因克隆及其作为内参基因的应用

发布时间：2017-09-05 15:31

  本文关键词：丝瓜18S rRNA基因克隆及其作为内参基因的应用

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【摘要】：选择合适的内参基因是提高实时荧光定量PCR分析(q RT-PCR)准确性的重要条件。18S r RNA基因表达范围广、表达量恒定,常作为内参基因应用于实时荧光定量PCR中。为了获得丝瓜18S r RNA基因,并设计合适的荧光定量PCR内参引物,解决丝瓜实时荧光定量PCR检测中无内参基因的现状,通过PCR和序列测定,首次克隆到了丝瓜的18S r RNA基因序列,其长度为1 862 bp,Gen Bank登录号为KM656452。在此基础上设计1对荧光定量PCR引物,该引物特异性强,扩增效率高,在丝瓜各生长发育阶段及各种非生物胁迫条件下均能稳定表达,适合在丝瓜基因表达研究中作为内参基因。该研究结果可为开展丝瓜重要功能基因的表达模式和调控机制的研究奠定基础。
【作者单位】： 福建省农业科学院作物研究所;福建省农业科学院蔬菜研究中心;福建省蔬菜工程技术研究中心;福建省种植业技术推广总站;
【关键词】： 丝瓜 S rRNA 内参基因 实时荧光定量PCR
【基金】：福建省属公益类科研院所基本科研专项(2014R1026-11) 福建省农业科学院瓜类育种科技创新团队(STIT-I-0304)
【分类号】：S642.4
【正文快照】： 随着基因组学和生物信息学的发展,基因表达分析已广泛应用于生命科学众多研究领域,对发现和预测新基因及其功能、了解基因调控的复杂网络等有重要作用[1-2]。实时荧光定量PCR(q RT-PCR)是一种在普通PCR定性技术上发展而来的新型核酸定量技术,具有识别特异性强、速度快、反应灵

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 黄河;牛雅静;杨可;戴思兰;;甘菊内参基因ClTUA的克隆与表达分析[J];北京林业大学学报;2012年02期

2 罗少波;罗剑宁;郑晓明;;我国丝瓜育种研究进展与展望[J];广东农业科学;2006年01期

3 毕燕会;邹丹燕;周志刚;;海带配子体18S rRNA基因的克隆、序列分析及其作为内参基因的应用[J];华北农学报;2009年01期

4 田佶;沈红香;张杰;姚允聪;宋婷婷;耿慧;;苹果属观赏海棠McANS基因克隆与不同叶色品种间表达差异分析[J];园艺学报;2010年06期

5 沈江锋;李俊敏;孙丽英;陈剑平;;水稻黑条矮缩病毒和水稻条纹叶枯病毒侵染下水稻qRT-PCR内参基因的筛选[J];植物病理学报;2014年03期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 刘文超;王东浩;王U喼，

本文编号：798793