转天麻抗真菌蛋白基因提高棉花对黄萎病抗性

发布时间：2017-09-07 05:00

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【摘要】：黄萎病是全球植棉业的主要病害,严重缺乏抗黄萎病资源导致棉花抗黄萎病育种至今未取得显著进展。采用农杆菌介导法,以下胚轴为受体,将天麻抗真菌蛋白基因转化陆地棉品系苏研060,通过愈伤组织诱导、胚性愈伤组织分化和植株再生,获得大量再生苗。分别以NPT II基因、gafp基因、35S启动子-gafp基因特异引物对再生苗进行PCR检测,将95个阳性再生苗嫁接到海7124幼苗砧木上,获得37个成活植株。RT-PCR检测发现,31个植株出现预期的540 bp扩增片段。盆栽花铃期花粉育性鉴定表明,9个转基因植株雄性败育,22个植株花粉育性正常,通过人工自交得到T1代种子。通过转基因作物隔离区种植、特异引物PCR检测、卡那霉素抗性筛选、自交纯合与选择,培育获得22个T3代转基因纯系。Southern blotting检测发现,转基因植株体内有2个gafp基因拷贝。GAFP蛋白免疫印迹表明,16个转基因纯系出现分子量为14 k D的GAFP蛋白,另6个纯系表现出转录后水平上的基因沉默。黄萎病抗性鉴定结果证实,获得3个抗落叶型黄萎病的棉花株系TG09、TG16和TG23。
【作者单位】： 南京农业大学/作物遗传改良与种质创新国家重点实验室;江苏省农业科学院经济作物研究所;中国科学院遗传与发育生物学研究所;
【关键词】： 棉花 天麻 抗真菌蛋白 基因 黄萎病 抗性
【基金】：国家转基因生物新品种培育重大专项(2014ZX08005) 国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA101108) 国家科技支撑计划项目(2013BAD01B03) 江苏省自然科学基金项目(BK20130699) 江苏省科技支撑计划项目(BE2013380) 江苏省农业科技自主创新资金项目[CX(13)2024]资助~~
【分类号】：S435.621.2
【正文快照】： 黄萎病是棉花生产上的主要病害,暴发年份严以Ca MV35S启动子驱动的gafp基因转化彩色陆地重地影响着棉花的产量和纤维品质。该病害自1935棉,通过病圃筛选和分子检测,获得高抗枯斑型黄年伴随美棉的引进传入我国后,在国内各产棉区逐萎病的转gafp基因株系。陈大军等[13]利用落叶型

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1 陈大军,简桂良,李仁敬,张振南,刘丰疆,姚正陪;转天麻抗真菌蛋白基因彩色棉新品系抗枯黄萎病研究[J];分子植物育种;2003年Z1期

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1 王树刚;张友秋;栗红梅;;天麻抗真菌蛋白基因(gafp)转化鑫秋1号的研究[A];中国棉花学会2014年年会论文汇编[C];2014年

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本文编号：807533