神经毒素基因RjAa17f在Sf9细胞中的表达及活性分析

发布时间：2017-09-09 04:46

  本文关键词：神经毒素基因RjAa17f在Sf9细胞中的表达及活性分析

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【摘要】：【目的】在昆虫草地贪夜蛾细胞(Sf9)中表达一种能专一阻断昆虫钠、钾离子通道的神经毒素基因RjAa17f。【方法】运用杆状病毒真核表达系统表达RjAa17f毒蛋白,并用蛋白质印迹对其进行检测;测定RjAa17f毒蛋白引起健康棉铃虫中肠膜电位的变化,并对其毒力进行测定。【结果】通过重组杆状病毒质粒的转染和Western blot检测验证,神经毒素基因RjAa17f的重组Bacmid已经成功转染到Sf9细胞中,且在Sf9中表达出与预测大小一致的RjAa17f目的蛋白;此毒蛋白作用于棉铃虫中肠3~12h后,中肠膜电位与CK相比差异显著,且随着作用时间的延长,棉铃虫中肠膜电位呈逐步升高的趋势,作用9h以后,升高的幅度逐渐降低,趋于平缓。RjAa17f毒蛋白对棉铃虫的LD50为108.12μg/g。【结论】在Sf9细胞内表达出了有活性的RjAa17f毒蛋白,且该毒蛋白对棉铃虫中肠膜电位有显著改变。
【作者单位】： 西北农林科技大学植保资源利用与病虫害治理教育部重点实验室;
【关键词】： 棉铃虫 神经毒素基因RjAaf Sf RjAaf毒蛋白 杆状病毒真核表达系统
【基金】：国家自然科学基金项目(31170609;31270691)
【分类号】：Q78;S476
【正文快照】： 棉铃虫核型多角体病毒早在1973年已经在美国环保局的批准下成为第一个注册登记的杆状病毒商品杀虫剂。虽然杆状病毒具有高度的专一性、对人畜及动物无害、对环境无污染等优点,但其也有一定的缺点,如杀虫速率相对缓慢、对高龄害虫杀虫力弱等[1]。因此,利用各种生物毒素对杆状病

【相似文献】

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1 王晓迟,戚艺华,欧阳藩;Sf9细胞的培养工艺[J];化工冶金;1998年03期

2 ;[J];;年期

，

本文编号：818387