魁蚶过氧化氢酶基因克隆及表达分析

发布时间：2017-09-09 05:01

  本文关键词：魁蚶过氧化氢酶基因克隆及表达分析

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【摘要】：采用RT-PCR和c DNA末端快速扩增技术(rapid amplification of c DNA ends,RACE)克隆出魁蚶过氧化氢酶(Sb CAT)基因c DNA全长序列,该基因全长为2181 bp,包括1431 bp的开放阅读框(open reading frame,ORF),96 bp的5'端非翻译区(UTR)和654 bp的3'-UTR。其中ORF编码477个氨基酸,预测分子量为54 ku,理论等电点为8.03。Sb CAT氨基酸序列与其他所选动物的氨基酸序列具有较高的相似性,其相似度为68%~96%,Sb CAT氨基酸具有CAT基因家族的特征性序列,包括CAT活性位点,1个亚铁血红素结合位点及3个催化位点残基。此外,Sb CAT还具有保守的亚铁血红素结合口袋与还原型辅酶Ⅱ(NADPH)结合位点。采用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测了Sb CAT的组织表达特征。结果显示,Sb CAT m RNA在所检测的6种组织中均有表达,在外套膜中表达量较高,在肝胰腺和红细胞中表达量较低。经鳗弧菌和金黄色葡萄球菌刺激后,鳗弧菌刺激组的外套膜表达量一直较低,其他组织均表现出先上升再下降的趋势。研究表明,Sb CAT可能在魁蚶免疫防御中发挥重要作用。
【作者单位】： 中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部海洋渔业可持续发展重点实验室;上海海洋大学水产与生命学院;
【关键词】： 魁蚶 过氧化氢酶 RACE qRT-PCR
【基金】：科技基础条件平台项目(2060503-D1) 科技基础性工作专项(2013FY110700) 山东省自然科学基金(ZR2013CQ047) 黄海所基本科研业务费项目(2060302201516054)~~
【分类号】：Q78;S917.4
【正文快照】： 魁蚶(Scapharca broughtonii)属软体动物门(Mollusca),瓣鳃纲(Lamellibranchia),蚶目(Arcoida),蚶科(Arcidae),毛蚶属(Scapharca),俗称赤贝、大毛蛤,是一种高蛋白、低脂肪食品,具有较好的市场前景和开发利用价值[1]。与其他无脊椎动物一样,魁蚶也主要依靠非特异性免疫因子进行

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本文编号：818435