泥蚶谷胱甘肽过氧化物酶基因的全长克隆与表达分析

发布时间：2017-09-24 16:51

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【摘要】：为了探讨谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GPx)基因在泥蚶应激反应中的作用,研究采用RACE技术克隆了泥蚶GPx基因(TgGPx)c DNA全长,其c DNA全长1195 bp,包含45 bp 5′-UTR,639 bp开放阅读框(ORF)和511 bp 3′-UTR。ORF编码212个氨基酸残基,预测蛋白分子量为24.3 k D,理论等电点为8.33,其中,第53个氨基酸U是由密码子202UGA204编码的硒代半胱氨酸(Se-Cys)。在3′-UTR上存在一段序列,形成一种独特的茎环结构,即SECIS元件。SECIS元件在密码子UGA翻译为Se-Cys的过程中起决定性作用。通过序列比对与系统进化分析,发现软体动物中也存在不同种类的GPx基因,TgGPx与GPx1和GPx2的亲缘关系较近。利用qRT-PCR技术对TgGPx在泥蚶的不同组织以及重金属刺激后的表达量进行分析,结果表明,TgGPx在泥蚶的5个组织中都有表达,但存在组织特异性,在外套膜中的表达量最高,在血细胞中的表达量最低。用重金属铅、铜、镉刺激后,TgGPx在肝胰脏中的表达量显著升高,表明TgGPx在维护机体正常功能方面及泥蚶抵御外界刺激的应激反应中发挥作用。
【作者单位】： 浙江省海洋水产养殖研究所;温州医科大学检验医学院生命科学学院;浙江省近岸水域生物资源开发和保护重点实验室;上海海洋大学水产与生命学院;
【关键词】： 泥蚶 谷胱甘肽过氧化物酶 全长克隆 基因表达
【基金】：国家高技术研究发展计划(2012AA10A410-1) 浙江省重大科技专项(2012C12907-4) 温州市种子种苗科技创新专项(N20120017)资助~~
【分类号】：S917.4
【正文快照】： 活性氧(ROS)又称氧自由基,在大多数情况下是由细胞正常代谢和呼吸作用产生的,在机体中有广泛的生物学作用。在贝类细胞免疫过程中,机体可以通过产生大量的活性氧(ROS)来消灭病原体,除此之外,ROS作为生长因子和第二信使等在机体的生长调控中也发挥重要作用。但当ROS过量时,机体

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本文编号：912353