组培条件下苹果实时定量PCR内参基因的筛选

发布时间：2017-09-30 08:17

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【摘要】：【目的】筛选在组织培养条件下苹果苗中稳定表达的内参基因。【方法】应用实时荧光定量PCR技术,分析了18S r RNA,GAPDH,TUB,UBQ,ACT,EF-1α六个常用植物内参基因在苹果组培苗不同基因型、不同组织、不同继代时间的m RNA表达差异情况。供试的4个苹果基因型为‘长枝富士’‘短枝富士’‘红珍珠海棠’、砧木‘A8-11’;继代培养的不同组织为茎、叶、整株,生根培养的不同组织为根、茎、叶、整株;不同继代期间为10、20、30、40、50、60、70、80 d。【结果】经Ge Norm软件对6个内参基因的表达稳定性进行评价,ACT和EF-1α在苹果组培苗的不同组织和不同继代时间的基因表达分析中较稳定,UBQ和EF-1α在苹果组培苗不同品种中表达均稳定。【结论】组培条件下,苹果基因表达相关研究的理想内参基因为ACT、UBQ和EF-1α。
【作者单位】： 河北农业大学园艺学院;河北农业大学国有资产管理处;
【关键词】： 苹果 组培苗 实时荧光定量PCR 内参基因
【基金】：国家苹果产业技术体系专项(CARS-28)
【分类号】：S661.1
【正文快照】： 实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quan-titative PCR)具有检测体系灵敏、特异性强、通量高、速度快、重复性好、定量准确等优点,同时由于检测步骤简便,可以对大量样品进行快速筛查试验[1]。目前,已广泛应用于基因表达分析相关的各领域研究中,但是,试验中RNA提取质量、

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本文编号：947101