共表达HAC1基因对重组毕赤酵母分泌表达葡萄糖氧化酶的影响

发布时间：2017-10-05 09:17

  本文关键词：共表达HAC1基因对重组毕赤酵母分泌表达葡萄糖氧化酶的影响

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【摘要】：通过增强不可折叠蛋白质响应(UPR)信号途径以及研究不同培养温度下的影响,来提高重组葡萄糖氧化酶在毕赤酵母中的分泌表达。影响毕赤酵母外源蛋白表达的因素,主要为内质网中的折叠速率以及不可折叠蛋白积累造成的胞内胁迫压力。通过共表达HAC1基因对不可折叠蛋白信号通路进行调控,摇瓶中改造菌株PP-G-HAC1胞外酶活达到161 U/m L,相比于原始重组葡萄糖氧化酶菌株提高了34%。进一步研究不同温度下过量表达HAC1基因对菌株的生长和分泌外源蛋白的影响,菌株PP-G-HAC1在3 L发酵罐中28℃培养,酶活达到1 008 U/m L,胞外重组蛋白质达到14.43 g/L,相比原始菌株在相同条件下提高了3.12倍。
【作者单位】： 江南大学生物工程学院;江南大学工业生物技术教育部重点实验室;粮食发酵工艺与技术国家工程实验室江南大学;
【关键词】： 重组毕赤酵母 葡萄糖氧化酶 不可折叠蛋白响应 HAC基因
【基金】：国家自然科学基金重大项目(31470160) 国家863计划项目(2011AA100905) 国家973计划项目(2013CB733902) 博士后科学基金项目(114957;2013M540538) 江苏省自然科学基金项目(BK2012553)
【分类号】：Q78;Q55
【正文快照】： 葡萄糖氧化酶(EC 1.1.3.4,简称GOD)是生物领域中重要的工具酶。它是一种黄素蛋白,可以将β-D-葡萄糖通过分子氧传递电子转化为葡萄糖酸和过氧化氢。葡萄糖氧化酶被广泛应用于食品、饲料、医药等行业[1]。其中在医药和食品领域中的作用尤为重要。在医药领域中,可制成试剂盒及电

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本文编号：975983