家蚕蛹表达人生长激素蛋白及其生物活性的分析.pdf

  本文关键词：家蚕蛹表达人生长激素蛋白及其生物活性的研究，由笔耕文化传播整理发布。

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浙江大学生命科学学院博士学位论文家蚕蛹表达人生长激素蛋白及其生物活性的研究姓名:蓝航莲申请学位级别:博士专业:生物化学与分子生物学指导教师:张耀洲20090901浙江大学博:l:论文中文摘要人生长激素(hGH)是由人垂体前叶细胞分泌的一种多肽类激素,对机体的组织、器官以及各种代谢活动都起着重要的生理功能。本试验首先构建了重组质粒pET28a--hGH,经终浓度为1 mM IPTG在大肠杆菌中诱导带rhGH融合蛋白的表达,融合蛋白带有His6标签;纯化得到无生物活性的融合蛋白作为抗原免疫雄性新西兰大白兔,收集抗血清后采用硫酸铵沉淀方法纯化多克隆抗体;抗血清的效价为l:25600;Westem blot结果显示多克隆抗体存在较高的特异性,以rhGH为抗原制得的抗体也可以和hGH蛋白发生特异性结合反应。高效抗一hGH多克隆抗体的制备为下游的工作奠定了基础。昆虫杆状病毒是与原核、酵母以及哺乳动物细胞系统并存的表达外源蛋白的一类重要表达系统,因其可以高效表达有活性的外源蛋白而被广泛应用。家蚕杆状病毒表达系统是昆虫杆状病毒的重要组成部分,本试验利用该系统在受体家蚕细胞和蚕蛹中合成hGH。利用共转染技术携带有hGH基冈的重组转移质粒pBacPAK--hGH与线性化的BmBacPAK6基因组DNA在家蚕细胞中发生同... 内容来自转载请标明出处.

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