PIPKs基因家族及PsYKT6功能分析

  本文关键词：大豆疫霉GPCR-PIPKs基因家族及PsYKT6功能分析，由笔耕文化传播整理发布。

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大豆疫霉GPCR-PIPKs基因家族及PsYKT6功能分析

     论文目录

摘要第1-11页

ABSTRACT第11-14页

引言第14-16页

上篇 文献综述第16-58页

 第一章 G蛋白偶联受体的研究进展第16-42页

  1 概述第16页

  2 G蛋白偶联受体的结构第16-17页

  3 G蛋白偶联受体的分类第17-20页

  4 G蛋白偶联受体的信号传递机制第20-21页

  5 G蛋白偶联受体在人类中的研究概述第21-22页

  6 G蛋白偶联受体在植物中的研究概述第22-24页

  7 G蛋白偶联受体在盘基网柄菌中的研究概述第24-25页

  8 G蛋白偶联受体在模式真菌中的研究概述第25-31页

   ·G蛋白偶联受体在酿酒酵母中的研究概述第25-27页

   ·G蛋白偶联受体在裂殖酵母中的研究概述第27-28页

   ·G蛋白偶联受体在粗糙脉胞菌中的研究概述第28-29页

   ·G蛋白偶联受体在构巢曲霉中的研究概述第29页

   ·G蛋白偶联受体在新型隐球酵母菌中的研究概述第29-31页

  9 G蛋白偶联受体在卵菌中的研究概述第31-32页

  参考文献第32-42页

 第二章 RNA干扰技术在真菌及卵菌基因功能研究方面的应用第42-58页

  1 概述第42-44页

   ·RNAi的发现第42-43页

   ·RNAi的机理第43-44页

  2 RNAI在真菌基因功能研究中的应用第44-49页

   ·RNAi在真菌基因功能研究中的策略第45-48页

   ·RNA干扰技术和基因敲除技术的优缺点比较及分析第48-49页

  3 RNAI在卵菌基因功能研究中的应用第49-52页

   ·卵菌中遗传转化体系的建立第49-50页

   ·卵菌中RNAi技术的应用及发展第50-52页

  参考文献第52-58页

下篇 研究内容第58-166页

 第一章 大豆疫霉中利用双链RNA介导的基因沉默第58-82页

  1 材料与方法第61-66页

   ·供试菌株第61页

   ·大豆疫霉菌株的培养和无性发育各阶段菌体的获得第61页

   ·大豆与大豆疫霉的互作早期侵染菌丝的获得第61页

   ·目的基因的扩增及overlap PCR片段的获得第61页

   ·dsRNA合成第61-63页

   ·大豆疫霉瞬时转化第63-64页

   ·SYBR green实时定量RT-PCR分析第64-65页

   ·孢子囊的诱导第65页

   ·致病性测定第65-66页

  2 结果与分析第66-76页

   ·大豆疫霉中PsCdc14和PsAvr3a的克隆及结构分析第66-67页

   ·PsCdc14 dsRNA介导基因沉默转化子不能发育形成孢子囊第67-69页

   ·PsAvr3a全长ORF序列合成的dsRNA介导靶基因沉默第69-71页

   ·PsAvr3a C端部分序列合成的dsRNA介导靶基因沉默第71-73页

   ·dsRNA介导的基因沉默具有序列特异性第73页

   ·PsAvr3a-PsCdc14 dsRNA同时介导PsAvr3a和PsCdc14基因的沉默第73-75页

   ·单个dsRNA和PsAvr3a-PsCdc14 dsRNA介导基因沉默效率的比较第75-76页

  3 讨论第76-77页

  参考文献第77-82页

 第二章 大豆疫霉G蛋白偶联受体的生物信息学预测及转录分析第82-108页

  1 材料与方法第84-87页

   ·数据库信息和同源检索第84页

   ·多重序列比对和系统发育分析第84-85页

   ·供试菌株第85页

   ·培养基制备第85页

   ·大豆疫霉RNA-Sequencing测序及实时定量RT-PCR分析样品的准备第85页

   ·RNA的提取第85-86页

   ·RNA-Sequencing分析GPCR候选编码基因的转录谱第86页

   ·实时定量RT-PCR分析GPCR-PIPK基因家族的转录谱第86-87页

  2 结果与分析第87-102页

   ·GPCR候选基因的挖掘第87-89页

   ·GPCR候选编码基因的分类及同源性比较第89-93页

   ·GPCR候选编码基因在基因组中的结构特征第93-96页

   ·大豆疫霉GPCR候选编码基因在生长发育及致病过程中的转录谱分析第96-98页

   ·大豆疫霉中PIPK基因家族的分析第98-100页

   ·大豆疫霉中GPCR-PIPK编码基因的结构预测及实时定量分析其生活史各个阶段转录第100-102页

  3 讨论第102-104页

  参考文献第104-108页

 第三章 新型G蛋白偶联受体PSPIPK4参与调控大豆疫霉游动孢子休止及萌发第108-130页

  1 材料与方法第110-115页

   ·供试菌株第110页

   ·大豆疫霉菌株的培养和无性发育各阶段菌体的获得第110-111页

   ·大豆与大豆疫霉的互作早期侵染菌丝的获得第111页

   ·Southern杂交第111-112页

   ·转化载体的构建第112页

   ·大豆疫霉遗传转化第112-114页

   ·PsPIPK4沉默突变体的表型分析第114页

   ·SYBR green实时定量RT-PCR分析第114-115页

   ·致病性测定第115页

   ·趋化性分析第115页

  2 结果与分析第115-124页

   ·大豆疫霉PsPIPK4基因的克隆及结构分析第115-117页

   ·PsPIPK4在生活史阶段及侵染阶段的转录分析第117-118页

   ·PsPIPK4基因沉默突变体的获得第118-119页

   ·PsPIPK4沉默突变体的表型分析第119-124页

  3 讨论第124-125页

  参考文献第125-130页

 第四章 新型G蛋白偶联受体PSPIPK10参与调控大豆疫霉的有性生殖第130-144页

  1 材料与方法第132-133页

   ·大豆疫霉菌株的培养和无性发育各阶段菌体的获得第132页

   ·大豆与大豆疫霉的互作早期侵染菌丝的获得第132页

   ·质粒构建和大豆疫霉转化第132页

   ·PsPIPK10沉默突变体的表型分析第132页

   ·SYBR green实时定量RT-PCR分析第132页

   ·致病性测定第132-133页

  2 结果与分析第133-140页

   ·大豆疫霉PsPIPK10基因的克隆及氨基酸序列结构分析第133-134页

   ·PsPIPK10在生活史阶段及侵染阶段的转录分析第134-135页

   ·PsPIPK10基因沉默突变体的获得第135-136页

   ·PsPIPK10基因沉默突变体中卵孢子的形成受到影响第136-138页

   ·卵磷脂对野生型菌株和PsPIPK10基因沉默突变体产卵孢子的影响第138-139页

   ·致病性测定第139-140页

  3 讨论第140-141页

  参考文献第141-144页

 第五章 大豆疫霉SNARE蛋白家族生物信息学预测及PSYKT6的功能分析第144-166页

  1 材料与方法第147-148页

   ·数据库信息和同源检索第147页

   ·重序列比对和系统发育分析第147页

   ·大豆疫霉菌株的培养和无性发育各阶段菌体的获得第147页

   ·大豆与大豆疫霉的互作早期侵染菌丝的获得第147页

   ·RNA-Sequencing分析SNARE候选编码基因的转录谱第147页

   ·质粒构建和大豆疫霉转化第147-148页

   ·PsYKT6沉默突变体的表型分析第148页

   ·SYBR green实时定量RT-PCR分析第148页

   ·致病性测定第148页

  2 结果与分析第148-159页

   ·大豆疫霉SNARE蛋白家族的挖掘第148-150页

   ·大豆疫霉SNARE候选编码基因的结构预测及转录分析第150-152页

   ·大豆疫霉PsYKT6编码一个进化上及其保守的R-SNARE蛋白第152-153页

   ·PsYKT6沉默突变体的获得第153-154页

   ·PsYKT6沉默突变体表型分析第154-156页

   ·PsYKT6沉默突变体致病性测定第156-159页

  3 讨论第159-160页

  参考文献第160-166页

全文总结第166-168页

攻读博士学位期间发表的研究论文第168-170页

致谢第170页

论文编号BS479695，这篇论文共170页
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