马铃薯卷叶病毒RT-LAMP检测方法的建立

发布时间：2021-06-24 09:35

　　为建立一种快速准确检测马铃薯卷叶病毒（potato leafroll virus,PLRV）的方法,本研究以PLRV CP（coat protein,CP）基因ORF3保守序列为靶标,建立了PLRV反转录环介导等温扩增（RT-LAMP）检测体系,并对建立的RT-LAMP检测体系的特异性、灵敏度、实际应用效果进行评估。结果表明,建立的PLRV RT-LAMP检测方法,在62℃恒温下扩增50 min,扩增产物中加入双链嵌合荧光染色（SYBR GreenⅠ）,阳性样品颜色变为绿色,阴性样品颜色仍为褐色,可直接目测判断待检测样品是否感染PLRV。该方法只特异性检测PLRV,不与马铃薯X病毒（PVX）、马铃薯Y病毒（PVY）、马铃薯S病毒（PVS）、马铃薯A病毒（PVA）和马铃薯M病毒（PVM）等其他5种马铃薯主要病毒发生交叉反应。此外,建立的PLRV RT-LAMP检测方法的灵敏度较反转录PCR（RT-PCR）方法高100倍。田间样品检测验证,该方法与标准RT-PCR方法符合率达100%。本研究建立的以SYBR GreenΙ为颜色指示的PLRV可视化检测RT-LAMP方法,特异、灵敏、便捷,成... 

【文章来源】：核农学报. 2020,34(09)北大核心CSCD

【文章页数】：8 页

【部分图文】：

田间样品PLRV 的RT-PCR和RT-LAMP检测结果

PLRV RT-LAMP 检测体系

RT-LAMP特异性检测

【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
[1]马铃薯病毒和类病毒的分子诊断方法研究[D]. 杜志游.浙江大学 2006

硕士论文
[1]马铃薯Y病毒和马铃薯卷叶病毒的实时荧光同步检测技术的研究[D]. 侯宇.重庆大学 2009



本文编号：3246846