桃流胶病拮抗细菌的筛选及生防机制的探究
发布时间：2021-09-22 08:38
桃流胶病是我国桃树上最严重的病害之一,主要是由病原菌Botryosphaeria dothidea,B.rhodina和B.obtuse引起的,目前针对桃流胶病的防治策略以化学防治为主,农业防治为辅,但化学农药的使用不仅会使病原菌产生抗药性,而且造成环境污染,危害人体健康,生物防治因其绿色环保、安全可靠而受到广泛关注。本试验从桃树根组织中分离并筛选出了一株对桃流胶病病原菌具有拮抗作用的内生细菌,结合形态观察与分子手段对其进行鉴定,并对菌株进行GFP标记,研究其在植物体内的定殖情况,另外初步探讨了该菌株的生防机制,主要研究结果如下:1.从桃树根茎叶部位共分离到内生细菌129株,其中有20株对桃流胶病病原菌B.dothidea XNHG-241具有拮抗作用,选取拮抗作用较好的一株菌株HAR3进行鉴定,通过16S rRNA和gyrB基因序列构建系统发育树并结合形态观察将其鉴定为解淀粉芽孢杆菌。2.构建了含egfp片段的质粒pUBXCP,通过接合转移的方法将质粒转入解淀粉芽孢杆菌HAR3,得到菌株HAR3-GFP。标记菌株能够表达强烈的荧光,并能稳定遗传,且菌株HAR3-GFP与野生型菌株HA...
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
菌株HAR3的菌落形态及扫描电镜图
图 2 菌株 HAR3 的菌落形态及扫描电镜图a）菌株 HAR3 的菌落形态；b）菌株 HAR3 的扫描电镜图Fig. 2 Colonial morphology and scanning electron microscopic image of strain HAolonial morphology of strain HAR3; b) Scanning electron microscopic image of strain 菌株 HAR3 的革兰氏染色菌株 HAR3 革兰氏染色（图 3）为紫色，呈阳性，鉴定菌株 HAR3 为革（G+）。a b
桃流胶病拮抗细菌的筛选及生防机制的探究3.2.3 菌株 HAR3 的分子鉴定根据测序得到的 HAR3 16S rRNA 和 gyrB 基因序列，使用 MEGA6 构建系统发育树。结果表明 16S rRNA 系统发育树中菌株 HAR3 与 B. amyloliquefaciens subsp.plantarum 处于同一簇（图 4 ），同时 gyrB 系统发育树中菌株 HAR3 与 B.amyloliquefaciens subsp. plantarum 也处于同一簇（图 5），由此将菌株 HAR3 鉴定为解淀粉芽孢杆菌。
【参考文献】：
期刊论文
[1]6个桃品种流胶病感病性的初步评价[J]. 杨文,赵丽娜,郝磊,李国怀. 华中农业大学学报. 2015(03)
[2]毛竹内生细菌种群多样性分析[J]. 刘芳,袁宗胜,张国防,陈威. 福建农业学报. 2014(12)
[3]不同药剂处理对桃树流胶病的防治效果比较[J]. 刘勇,王富荣,王会良,顾霞,诸小敏,龚林忠,何华平. 湖北农业科学. 2013(19)
[4]水稻种子内生细菌多样性及其分泌植物生长素能力的测定[J]. 姜晓宇,高菊生,徐凤花,曹艳花,唐雪,张晓霞. 微生物学报. 2013(03)
[5]我国植物病害生物防治综述[J]. 刘琴,刘翼,何月秋,林泋君,姜开梅. 安徽农学通报(上半月刊). 2012(07)
[6]桃流胶病研究进展[J]. 陈彦,王璠,蔡东,李国怀,程家森. 湖北农业科学. 2011(04)
[7]生防菌枯草芽孢杆菌CQBS03的绿色荧光蛋白基因标记及其在柑橘叶片上的定殖[J]. 殷幼平,袁训娥,李强,王中康. 中国农业科学. 2010(17)
[8]不同桃树品种流胶病抗性调查及评价[J]. 华国荣,吴江,程建徽. 中国南方果树. 2006(06)
[9]不同药剂防治桃树流胶病桃叶氧化酶活性与防效之相关分析[J]. 郑雪芳,林抗美,黄素芳,肖荣凤,刘波. 中国农学通报. 2006(07)
[10]具有抑菌促生作用的植物内生细菌的筛选[J]. 邱思鑫,何红,阮宏椿,关雄,胡方平. 应用与环境生物学报. 2004(05)
博士论文
[1]桃流胶病拮抗微生物筛选及发酵产抗菌脂肽研究[D]. 黎循航.江南大学 2016
[2]小麦内生细菌的种群多样性调查及其在小麦条锈病生物防治中的利用研究[D]. 庞发虎.广西大学 2016
[3]利用小麦内生细菌对小麦秆黑粉病的生物防治研究[D]. 陶爱丽.广西大学 2014
[4]桃病原性流胶病发病过程中的生理生化变化研究[D]. 李智.华中农业大学 2014
[5]桃流胶病菌BOTRYOSPHAERIAS SPP.鉴定、分布、遗传多样性及PCR快速检测技术研究[D]. 王璠.华中农业大学 2012
[6]多功能菌剂的组合效应研究及其抑菌物质的特性和分离[D]. 陶晶.石河子大学 2009
[7]内生菌分离筛选及其对甜菜促生增糖效应研究[D]. 史应武.石河子大学 2009
[8]番茄内生细菌及其对番茄青枯病的防治作用研究[D]. 黎起秦.湖南农业大学 2005
[9]辣椒内生枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）防病促生作用的研究[D]. 何红.福建农林大学 2003
硕士论文
[1]玉米纹枯病生防细菌的分离鉴定及应用[D]. 陈璐璐.华中农业大学 2015
[2]玉米内生生防细菌的分离鉴定与遗传转化的研究[D]. 吕玲.华中农业大学 2014
[3]解淀粉芽孢杆菌J5防治桃流胶病的研究[D]. 文生巧.华中农业大学 2013
[4]桃流胶病发病的影响因子及防治技术探讨[D]. 郝磊.华中农业大学 2013
[5]小麦溶磷内生菌的筛选鉴定及其溶磷特性的初步研究[D]. 蒋国彪.四川师范大学 2012
[6]西藏生防芽孢杆菌鉴定及其脂肽化合物分析[D]. 薛鹏琦.南京农业大学 2010
[7]生防芽孢杆菌胞外蛋白酶的纯化及其拮抗作用[D]. 邢介帅.山东师范大学 2008
[8]桃流胶病的发生及其病原菌研究[D]. 罗江会.西南大学 2006
[9]水稻内生细菌研究[D]. 朱凤.扬州大学 2005
本文编号：3403467
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
菌株HAR3的菌落形态及扫描电镜图
图 2 菌株 HAR3 的菌落形态及扫描电镜图a）菌株 HAR3 的菌落形态；b）菌株 HAR3 的扫描电镜图Fig. 2 Colonial morphology and scanning electron microscopic image of strain HAolonial morphology of strain HAR3; b) Scanning electron microscopic image of strain 菌株 HAR3 的革兰氏染色菌株 HAR3 革兰氏染色（图 3）为紫色，呈阳性，鉴定菌株 HAR3 为革（G+）。a b
桃流胶病拮抗细菌的筛选及生防机制的探究3.2.3 菌株 HAR3 的分子鉴定根据测序得到的 HAR3 16S rRNA 和 gyrB 基因序列，使用 MEGA6 构建系统发育树。结果表明 16S rRNA 系统发育树中菌株 HAR3 与 B. amyloliquefaciens subsp.plantarum 处于同一簇（图 4 ），同时 gyrB 系统发育树中菌株 HAR3 与 B.amyloliquefaciens subsp. plantarum 也处于同一簇（图 5），由此将菌株 HAR3 鉴定为解淀粉芽孢杆菌。
【参考文献】：
期刊论文
[1]6个桃品种流胶病感病性的初步评价[J]. 杨文,赵丽娜,郝磊,李国怀. 华中农业大学学报. 2015(03)
[2]毛竹内生细菌种群多样性分析[J]. 刘芳,袁宗胜,张国防,陈威. 福建农业学报. 2014(12)
[3]不同药剂处理对桃树流胶病的防治效果比较[J]. 刘勇,王富荣,王会良,顾霞,诸小敏,龚林忠,何华平. 湖北农业科学. 2013(19)
[4]水稻种子内生细菌多样性及其分泌植物生长素能力的测定[J]. 姜晓宇,高菊生,徐凤花,曹艳花,唐雪,张晓霞. 微生物学报. 2013(03)
[5]我国植物病害生物防治综述[J]. 刘琴,刘翼,何月秋,林泋君,姜开梅. 安徽农学通报(上半月刊). 2012(07)
[6]桃流胶病研究进展[J]. 陈彦,王璠,蔡东,李国怀,程家森. 湖北农业科学. 2011(04)
[7]生防菌枯草芽孢杆菌CQBS03的绿色荧光蛋白基因标记及其在柑橘叶片上的定殖[J]. 殷幼平,袁训娥,李强,王中康. 中国农业科学. 2010(17)
[8]不同桃树品种流胶病抗性调查及评价[J]. 华国荣,吴江,程建徽. 中国南方果树. 2006(06)
[9]不同药剂防治桃树流胶病桃叶氧化酶活性与防效之相关分析[J]. 郑雪芳,林抗美,黄素芳,肖荣凤,刘波. 中国农学通报. 2006(07)
[10]具有抑菌促生作用的植物内生细菌的筛选[J]. 邱思鑫,何红,阮宏椿,关雄,胡方平. 应用与环境生物学报. 2004(05)
博士论文
[1]桃流胶病拮抗微生物筛选及发酵产抗菌脂肽研究[D]. 黎循航.江南大学 2016
[2]小麦内生细菌的种群多样性调查及其在小麦条锈病生物防治中的利用研究[D]. 庞发虎.广西大学 2016
[3]利用小麦内生细菌对小麦秆黑粉病的生物防治研究[D]. 陶爱丽.广西大学 2014
[4]桃病原性流胶病发病过程中的生理生化变化研究[D]. 李智.华中农业大学 2014
[5]桃流胶病菌BOTRYOSPHAERIAS SPP.鉴定、分布、遗传多样性及PCR快速检测技术研究[D]. 王璠.华中农业大学 2012
[6]多功能菌剂的组合效应研究及其抑菌物质的特性和分离[D]. 陶晶.石河子大学 2009
[7]内生菌分离筛选及其对甜菜促生增糖效应研究[D]. 史应武.石河子大学 2009
[8]番茄内生细菌及其对番茄青枯病的防治作用研究[D]. 黎起秦.湖南农业大学 2005
[9]辣椒内生枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）防病促生作用的研究[D]. 何红.福建农林大学 2003
硕士论文
[1]玉米纹枯病生防细菌的分离鉴定及应用[D]. 陈璐璐.华中农业大学 2015
[2]玉米内生生防细菌的分离鉴定与遗传转化的研究[D]. 吕玲.华中农业大学 2014
[3]解淀粉芽孢杆菌J5防治桃流胶病的研究[D]. 文生巧.华中农业大学 2013
[4]桃流胶病发病的影响因子及防治技术探讨[D]. 郝磊.华中农业大学 2013
[5]小麦溶磷内生菌的筛选鉴定及其溶磷特性的初步研究[D]. 蒋国彪.四川师范大学 2012
[6]西藏生防芽孢杆菌鉴定及其脂肽化合物分析[D]. 薛鹏琦.南京农业大学 2010
[7]生防芽孢杆菌胞外蛋白酶的纯化及其拮抗作用[D]. 邢介帅.山东师范大学 2008
[8]桃流胶病的发生及其病原菌研究[D]. 罗江会.西南大学 2006
[9]水稻内生细菌研究[D]. 朱凤.扬州大学 2005
本文编号：3403467
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