不同葡萄种质资源对霜霉病的抗性鉴定及SSR分子标记的筛选
发布时间：2021-10-28 15:57
研究不同葡萄种质资源对霜霉病（Plasmopara viticola）的抗性差异,旨在为葡萄霜霉病的抗病育种提供理论依据。本研究以120份葡萄种质资源为试材,采用室内离体叶圆片接种鉴定不同葡萄种质资源对霜霉病的抗性,以实时荧光定量PCR技术（q RT-PCR）分析关键抗性基因在6个野生葡萄株系中的表达差异。同时筛选SSR分子标记进行葡萄霜霉病的抗性鉴定,为葡萄分子辅助育种提供依据。主要结果如下:（1）通过室内离体叶圆片接种鉴定发现不同葡萄种质资源对霜霉病的抗性存在较大差异。120份供试样品中的病情指数为078.70。其中,普莱德、朱姆博、弗莱、萨米特和里尤木夫5份圆叶葡萄均表现为免疫,病情指数均为0;云南-元谋2、云南-2、木扎岭-3等3份野生资源为高抗株系,病情指数分别为1.81、4.40和1.62;摩尔多瓦、Palmata、蘡薁-林县、DVIT2437 cinerea Barrett等38份为抗病品种（株系）,病情指数为5.3225.00;涅布盖、哈桑葡萄、Rupestris等71份为感病品种（株系）,病情指数为25.934
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
霜霉病的生命周期Fig.1-1ThelifecycleofPlasmoparaviticola
萄叶片上长出新的孢子囊时，用无菌的软毛刷将孢子囊轻轻刷进无菌蒸馏水中，摇利用血球计数板计算孢子囊数量，调至浓度为 1×105个/mL 的孢子囊悬浮液备用接种及病情调查：用移液枪将稀释好的孢子囊悬浮液滴加在每个叶圆片中央，盘接种 30 μL（约 300 个孢子囊）葡萄霜霉菌悬浮液，对照培养皿内的叶圆片上 μL 的无菌蒸馏水。接种之后，把培养皿用封口膜密封，放于人工气候培养箱内湿度（90%），保温（22℃），光照黑暗各 12 h 交替培养。待接种霜霉病菌 24 ，用无菌滤纸吸去叶盘上的接种悬浮液，在相同条件下继续培养。接种霜霉病菌 1，拍照并计算各处理的病情指数。.2 葡萄霜霉病的抗性等级划分对接种霜霉病菌 168 h 后的叶盘进行数码相机拍照（图 2-1），用 Photoshop CS发病面积（Liu et al. 2015）。按照叶圆片上感病的面积占整个叶圆片的百分比可 6 级，其中 0 级：无病斑；1 级：感病面积占整个叶圆片的 0.1%~5%；3 级：感占整个叶圆片的 6%~25%；5 级：感病面积占整个叶圆片的 26%~50%；7 级：感占整个叶圆片的 51%~75%；9 级：感病面积占整个叶圆片的 76%~100%。病情Disease index）=Σ（各级病叶数×相应病害级别）/调查总叶数×9×100。
图 2-2 高抗霜霉病的葡萄株系Fig.2-2 Grape strains highly resistant to downy mildew表 2-2 不同葡萄种质资源对霜霉病的发病程度Table 2-2 Results of different grape germplasm resources to Plasmopara viticola号ode种类Species发病率(%)Incidence病情指数Diseaseindex抗性等级Resistancegrade抗性类别Resistancecategory 摩尔多瓦 Moldova 4.97 21.30 3 抗病 R 卡托巴 Catawba (1199) 9.07 22.22 3 抗病 R 甜冬葡萄 Cinerea 14.31 34.32 4 感病 S LN33 13.41 33.33 4 感病 S 麦可达木斯 Mcadam 13.15 33.33 4 感病 S Rupestris 9.41 30.86 4 感病 S 贝达 Beta 13.02 33.33 4 感病 S云南葡萄-2云南-元谋 2 木扎岭-3
【参考文献】：
期刊论文
[1]2017年世界葡萄及葡萄酒生产及流通概况[J]. 亓桂梅,李旋,赵艳侠,张久慧. 中外葡萄与葡萄酒. 2018(01)
[2]不同寄主来源的葡萄霜霉病菌的孢子囊大小和致病力分化的测定[J]. 刘志君,莫光珍,张书溢,易图永. 农学学报. 2017(07)
[3]不同葡萄品种对霜霉病的抗性[J]. 刘丽,刘长远,王辉,关天舒,于舒怡,李柏宏. 植物保护. 2017(02)
[4]华东葡萄泛素连接酶基因VpUIRP2和VpUIRP3的抗白粉病特性分析[J]. 王辰,姚文孔,谢小青,童威霍,王磊,王杰,王跃进. 果树学报. 2016(12)
[5]葡萄WRKY家族蛋白在非生物胁迫中的功能探讨[J]. 朱丹,马倩,郝杰,刘新. 生物技术通报. 2016(10)
[6]24-表油菜素内酯对葡萄叶片抵御霜霉菌侵染的影响[J]. 刘庆,栾雪涛,徐世彦,孟莹,高江曼,惠竹梅. 中国农业科学. 2016(15)
[7]葡萄叶片叶绿素质量分数与其霜霉病抗性的关系[J]. 王春明,郭建国,漆永红,吕和平,杜蕙,刘长远. 西北农业学报. 2016(03)
[8]不同葡萄品种对霜霉病的抗性鉴定及相关生理生化研究[J]. 李宝燕,王培松,倪寿山,刘学卿,王英姿. 果树学报. 2016(02)
[9]山东葡萄霜霉病菌致病力分化及亲缘关系研究[J]. 张眉,辛相启,吴斌,王升吉,郭霞,赵玖华. 山东农业科学. 2015(04)
[10]几种理化因素与葡萄霜霉病抗性的关系[J]. 乔宝营,黄海帆,刘崇怀,宋尚伟,李道德. 果树学报. 2014(05)
硕士论文
[1]基于生物学性状和SSR标记进行桃种质遗传多样性的研究[D]. 陈巍.南京农业大学 2007
[2]葡萄霜霉病菌卵孢子特性及其侵染预测模型的研究[D]. 郭明浩.西北农林科技大学 2005
本文编号：3463028
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
霜霉病的生命周期Fig.1-1ThelifecycleofPlasmoparaviticola
萄叶片上长出新的孢子囊时，用无菌的软毛刷将孢子囊轻轻刷进无菌蒸馏水中，摇利用血球计数板计算孢子囊数量，调至浓度为 1×105个/mL 的孢子囊悬浮液备用接种及病情调查：用移液枪将稀释好的孢子囊悬浮液滴加在每个叶圆片中央，盘接种 30 μL（约 300 个孢子囊）葡萄霜霉菌悬浮液，对照培养皿内的叶圆片上 μL 的无菌蒸馏水。接种之后，把培养皿用封口膜密封，放于人工气候培养箱内湿度（90%），保温（22℃），光照黑暗各 12 h 交替培养。待接种霜霉病菌 24 ，用无菌滤纸吸去叶盘上的接种悬浮液，在相同条件下继续培养。接种霜霉病菌 1，拍照并计算各处理的病情指数。.2 葡萄霜霉病的抗性等级划分对接种霜霉病菌 168 h 后的叶盘进行数码相机拍照（图 2-1），用 Photoshop CS发病面积（Liu et al. 2015）。按照叶圆片上感病的面积占整个叶圆片的百分比可 6 级，其中 0 级：无病斑；1 级：感病面积占整个叶圆片的 0.1%~5%；3 级：感占整个叶圆片的 6%~25%；5 级：感病面积占整个叶圆片的 26%~50%；7 级：感占整个叶圆片的 51%~75%；9 级：感病面积占整个叶圆片的 76%~100%。病情Disease index）=Σ（各级病叶数×相应病害级别）/调查总叶数×9×100。
图 2-2 高抗霜霉病的葡萄株系Fig.2-2 Grape strains highly resistant to downy mildew表 2-2 不同葡萄种质资源对霜霉病的发病程度Table 2-2 Results of different grape germplasm resources to Plasmopara viticola号ode种类Species发病率(%)Incidence病情指数Diseaseindex抗性等级Resistancegrade抗性类别Resistancecategory 摩尔多瓦 Moldova 4.97 21.30 3 抗病 R 卡托巴 Catawba (1199) 9.07 22.22 3 抗病 R 甜冬葡萄 Cinerea 14.31 34.32 4 感病 S LN33 13.41 33.33 4 感病 S 麦可达木斯 Mcadam 13.15 33.33 4 感病 S Rupestris 9.41 30.86 4 感病 S 贝达 Beta 13.02 33.33 4 感病 S云南葡萄-2云南-元谋 2 木扎岭-3
【参考文献】：
期刊论文
[1]2017年世界葡萄及葡萄酒生产及流通概况[J]. 亓桂梅,李旋,赵艳侠,张久慧. 中外葡萄与葡萄酒. 2018(01)
[2]不同寄主来源的葡萄霜霉病菌的孢子囊大小和致病力分化的测定[J]. 刘志君,莫光珍,张书溢,易图永. 农学学报. 2017(07)
[3]不同葡萄品种对霜霉病的抗性[J]. 刘丽,刘长远,王辉,关天舒,于舒怡,李柏宏. 植物保护. 2017(02)
[4]华东葡萄泛素连接酶基因VpUIRP2和VpUIRP3的抗白粉病特性分析[J]. 王辰,姚文孔,谢小青,童威霍,王磊,王杰,王跃进. 果树学报. 2016(12)
[5]葡萄WRKY家族蛋白在非生物胁迫中的功能探讨[J]. 朱丹,马倩,郝杰,刘新. 生物技术通报. 2016(10)
[6]24-表油菜素内酯对葡萄叶片抵御霜霉菌侵染的影响[J]. 刘庆,栾雪涛,徐世彦,孟莹,高江曼,惠竹梅. 中国农业科学. 2016(15)
[7]葡萄叶片叶绿素质量分数与其霜霉病抗性的关系[J]. 王春明,郭建国,漆永红,吕和平,杜蕙,刘长远. 西北农业学报. 2016(03)
[8]不同葡萄品种对霜霉病的抗性鉴定及相关生理生化研究[J]. 李宝燕,王培松,倪寿山,刘学卿,王英姿. 果树学报. 2016(02)
[9]山东葡萄霜霉病菌致病力分化及亲缘关系研究[J]. 张眉,辛相启,吴斌,王升吉,郭霞,赵玖华. 山东农业科学. 2015(04)
[10]几种理化因素与葡萄霜霉病抗性的关系[J]. 乔宝营,黄海帆,刘崇怀,宋尚伟,李道德. 果树学报. 2014(05)
硕士论文
[1]基于生物学性状和SSR标记进行桃种质遗传多样性的研究[D]. 陈巍.南京农业大学 2007
[2]葡萄霜霉病菌卵孢子特性及其侵染预测模型的研究[D]. 郭明浩.西北农林科技大学 2005
本文编号：3463028
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