吉林省公主岭与敦化大豆根腐病镰孢菌的系统鉴定
发布时间:2022-01-24 19:08
为明确吉林省公主岭和敦化的大豆根腐病镰孢菌种类,分离93份根腐病标样的病原真菌,利用ITS、TEF1-α、RPB2基因序列比对和多基因位点系统发育分析,结合形态学鉴定方法,鉴定出104株镰孢菌,共分4种,腐皮镰孢菌占64.42%,尖镰孢菌占33.65%,轮枝镰孢菌占0.96%,层出镰孢菌占0.96%。在公主岭罹病植株上分离鉴定出57株镰孢菌,腐皮镰孢菌占91.23%,尖镰孢菌占5.27%,轮枝镰孢菌占1.75%,层出镰孢菌占1.75%;在敦化罹病植株上分离鉴定出47株镰孢菌,腐皮镰孢菌占31.91%,尖镰孢菌占68.09%。结果表明:公主岭优势病原菌为腐皮镰孢菌,而敦化优势病原菌为尖镰孢菌。致病性试验结果表明,仅有3株腐皮镰孢菌对合丰55无致病性,其余101株镰孢菌对合丰55均有不同程度的致病性。
【文章来源】:大豆科学. 2020,39(03)北大核心CSCD
【文章页数】:9 页
【部分图文】:
吉林省公主岭和敦化地区大豆根腐病镰孢菌典型菌落和分生孢子
分别对ITS、TEF1-α和RPB2 3基因数据矩阵序列进行比对分析,最终获得了3个基因矩阵,序列总长度为2 553 bp。其中,ITS基因624 bp,保守位点75个,变异位点528个,简约信息位点346个;TEF1-α基因960 bp,保守位点177个,变异位点779个,简约信息位点685个;RPB2基因969 bp,保守位点124个,变异位点845个,简约信息位点768个。DAMBE(xia"test)对联合序列进行核酸饱和度检测的结果表明:联合序列未饱和,可以建树(Iss<Iss.c)。PAUP的异质性检验结果表明,3个保守基因序列间不冲突(P=0.01)可以合并分析,利用PhyloSuite v1.1.1.6完成ML树构建,总共55条序列参与系统发育树构建,其中27条序列为本研究分离纯化的镰孢菌序列,27条序列源自于NCBI具有代表性的镰孢菌序列,并以Bipolaris oryzae作为外群。ML树3个数据集ITS、TEF1-α、RPB2的最佳核苷酸替换模型为K2P+R2、TN+F+G4、TNe+R3。参与ML法构建系统发育树的55条序列主要被分为5个类群。在类群Ⅰ中6-38与层出镰孢菌以较高的自举值(93.1/99)聚为一类;在类群Ⅱ中DH-A1-2、DH-A1-4、DH-A1-9、DH-A1-10、DH-A1-14、DH-R-5、DH-R-9、DH-A3-9、DH-A10-7、DH-A10-9、DH-A10-13、DH-A10-14、DH-A10-15、DH-A6-30、GZL-B-31与尖镰孢菌以极高的自举值(100/100)聚为一类;在类群Ⅲ中GZL-B-17与轮枝镰孢菌以极大的自举值(100/100)聚为一类;在类群Ⅴ中GZL-Y-8-2、GZL-B-5、GZL-B-、GZL-B-10、GZL-B-12、DH-A3-10与腐皮镰孢菌以自举值(98.2/68)聚为一类(图2)。2.4 镰孢菌分离物的致病性分析
除了分离物GZL-A-7、GZL-A-9、GZL-A-21对合丰55无致病性之外,其余101株分离物对合丰55均具有不同的致病性。在67株腐皮镰孢菌中,无致病性占4.5%,中度感病占49.3%,感病占23.9%,高度感病占22.3%;在35株尖孢镰孢菌中,中度感病占2.9%,感病占14.2%,高度感病占82.9%;轮枝镰孢菌和层出镰孢菌均对寄主造成感病。培养的分离物能造成接种部位表面轻微变褐,茎内部无明显症状,严重的能造成接种植株根系几乎全部变褐、腐烂坏死,植株死亡(图3)。3 讨 论
【参考文献】:
期刊论文
[1]基于多基因序列分析对尖孢镰孢菌古巴专化型(香蕉枯萎病菌)生理小种的鉴定[J]. 曾莉莎,吕顺,刘文清,赵志慧,王芳,周建坤,李洪波,陈石,杜彩娴. 菌物学报. 2014(04)
[2]东北三省大豆根腐镰孢菌种类及其致病力分析[J]. 王晓艳,文景芝. 中国油料作物学报. 2011(04)
[3]一种经济快速提取丝状真菌基因组DNA的方法[J]. 陈锋菊,李百元,杨冰,张叶纯. 生命科学研究. 2010(02)
[4]大豆猝死综合症病原菌北美种的PCR鉴定[J]. 喻锦秀,吴品珊,高必达,严进,朱水芳. 植物病理学报. 2007(01)
[5]黄淮地区大豆根腐病菌分离鉴定及其致病性研究[J]. 李长松,罗瑞梧,杨崇良,赵玖华,尚佑芬,辛相启,邢邯,赵经荣. 植物保护学报. 1996(02)
[6]大豆根腐病主要病原菌对大豆幼苗致病性的初步研究[J]. 韩庆新,辛惠普. 大豆科学. 1990(02)
硕士论文
[1]黄淮地区大豆品种对根部主要病原真菌的抗性研究[D]. 姚艳.南京农业大学 2016
[2]大豆镰刀菌根腐病病原种类及大豆抗病种质资源筛选[D]. 杨帅.南京农业大学 2012
本文编号:3607138
【文章来源】:大豆科学. 2020,39(03)北大核心CSCD
【文章页数】:9 页
【部分图文】:
吉林省公主岭和敦化地区大豆根腐病镰孢菌典型菌落和分生孢子
分别对ITS、TEF1-α和RPB2 3基因数据矩阵序列进行比对分析,最终获得了3个基因矩阵,序列总长度为2 553 bp。其中,ITS基因624 bp,保守位点75个,变异位点528个,简约信息位点346个;TEF1-α基因960 bp,保守位点177个,变异位点779个,简约信息位点685个;RPB2基因969 bp,保守位点124个,变异位点845个,简约信息位点768个。DAMBE(xia"test)对联合序列进行核酸饱和度检测的结果表明:联合序列未饱和,可以建树(Iss<Iss.c)。PAUP的异质性检验结果表明,3个保守基因序列间不冲突(P=0.01)可以合并分析,利用PhyloSuite v1.1.1.6完成ML树构建,总共55条序列参与系统发育树构建,其中27条序列为本研究分离纯化的镰孢菌序列,27条序列源自于NCBI具有代表性的镰孢菌序列,并以Bipolaris oryzae作为外群。ML树3个数据集ITS、TEF1-α、RPB2的最佳核苷酸替换模型为K2P+R2、TN+F+G4、TNe+R3。参与ML法构建系统发育树的55条序列主要被分为5个类群。在类群Ⅰ中6-38与层出镰孢菌以较高的自举值(93.1/99)聚为一类;在类群Ⅱ中DH-A1-2、DH-A1-4、DH-A1-9、DH-A1-10、DH-A1-14、DH-R-5、DH-R-9、DH-A3-9、DH-A10-7、DH-A10-9、DH-A10-13、DH-A10-14、DH-A10-15、DH-A6-30、GZL-B-31与尖镰孢菌以极高的自举值(100/100)聚为一类;在类群Ⅲ中GZL-B-17与轮枝镰孢菌以极大的自举值(100/100)聚为一类;在类群Ⅴ中GZL-Y-8-2、GZL-B-5、GZL-B-、GZL-B-10、GZL-B-12、DH-A3-10与腐皮镰孢菌以自举值(98.2/68)聚为一类(图2)。2.4 镰孢菌分离物的致病性分析
除了分离物GZL-A-7、GZL-A-9、GZL-A-21对合丰55无致病性之外,其余101株分离物对合丰55均具有不同的致病性。在67株腐皮镰孢菌中,无致病性占4.5%,中度感病占49.3%,感病占23.9%,高度感病占22.3%;在35株尖孢镰孢菌中,中度感病占2.9%,感病占14.2%,高度感病占82.9%;轮枝镰孢菌和层出镰孢菌均对寄主造成感病。培养的分离物能造成接种部位表面轻微变褐,茎内部无明显症状,严重的能造成接种植株根系几乎全部变褐、腐烂坏死,植株死亡(图3)。3 讨 论
【参考文献】:
期刊论文
[1]基于多基因序列分析对尖孢镰孢菌古巴专化型(香蕉枯萎病菌)生理小种的鉴定[J]. 曾莉莎,吕顺,刘文清,赵志慧,王芳,周建坤,李洪波,陈石,杜彩娴. 菌物学报. 2014(04)
[2]东北三省大豆根腐镰孢菌种类及其致病力分析[J]. 王晓艳,文景芝. 中国油料作物学报. 2011(04)
[3]一种经济快速提取丝状真菌基因组DNA的方法[J]. 陈锋菊,李百元,杨冰,张叶纯. 生命科学研究. 2010(02)
[4]大豆猝死综合症病原菌北美种的PCR鉴定[J]. 喻锦秀,吴品珊,高必达,严进,朱水芳. 植物病理学报. 2007(01)
[5]黄淮地区大豆根腐病菌分离鉴定及其致病性研究[J]. 李长松,罗瑞梧,杨崇良,赵玖华,尚佑芬,辛相启,邢邯,赵经荣. 植物保护学报. 1996(02)
[6]大豆根腐病主要病原菌对大豆幼苗致病性的初步研究[J]. 韩庆新,辛惠普. 大豆科学. 1990(02)
硕士论文
[1]黄淮地区大豆品种对根部主要病原真菌的抗性研究[D]. 姚艳.南京农业大学 2016
[2]大豆镰刀菌根腐病病原种类及大豆抗病种质资源筛选[D]. 杨帅.南京农业大学 2012
本文编号:3607138
本文链接:https://www.wllwen.com/nykjlw/dzwbhlw/3607138.html
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