拮抗酵母对番茄果实灰霉病的抑制作用研究
发布时间：2023-01-15 13:22
番茄灰霉病是导致番茄果实减产、品质下降的重要病害之一。利用拮抗酵母菌替代或降低化学杀菌剂的使用对番茄采后病害防治具有广阔的应用前景。本实验通过离体对峙、显微观察及活体应用等方法,对实验室筛选出的一株高效拮抗酵母菌的生物学特性、抑制灰霉菌机理以及在番茄果实应用中对灰霉病的控制等进行了研究,主要结果如下:1、通过离体和活体实验,筛选出一株能够有效防治番茄采后灰霉菌的拮抗酵母菌KD-16J,通过生理生化实验和26S rDNA D1/D2区序列分析鉴定该株拮抗酵母可能为膜醭毕赤酵母;2、通过测定拮抗酵母菌KD-16J浓度和处理液对灰霉菌的菌丝生长量、菌落扩展、孢子萌发影响观察其抑制效果,发现酵母细胞浓度越大,抑制效果越好,109CFU/mL处理下的灰霉菌落抑制率为85.53%,孢子萌发率高达100%;滤液处理的抑制率比热杀死液高出14.67%,且远低于酵母悬浮液处理;酵母细胞对灰霉菌具有接触吸附作用的同时发现其分泌更多的胞外水解酶来破坏灰霉菌丝细胞壁,结合平板倒扣试验证明拮抗酵母KD-16J菌株抑制灰霉菌生长的机理包括营养与空间竞争、直接寄生作用以及分泌了热稳定、热不稳定及挥发性的抑菌类物质;...
【文章页数】：85 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
1 前言
1.1 灰霉菌的研究进展
1.1.1 灰霉菌的生物学特性
1.1.2 灰霉菌的主要危害
1.1.3 灰霉菌的侵染过程及致病因子
1.1.4 灰霉菌的主要防治研究现状
1.2 拮抗酵母菌的研究进展
1.2.1 拮抗酵母对果蔬采后病害的防治效果
1.2.2 拮抗酵母菌对果蔬采后病害的防治机理
1.2.3 拮抗酵母菌的商业化应用
1.2.4 拮抗酵母的商业化面临的问题及未来的发展前景
1.3 番茄的概述
1.3.1 番茄采后贮藏保鲜的研究现状
1.3.2 番茄采后贮藏保鲜的评价指标
1.4 研究目的、意义和主要内容
1.4.1 研究目的及意义
1.4.2 主要研究内容
2 材料与方法
2.1 实验材料与仪器设备
2.1.1 实验材料
2.1.2 仪器设备
2.1.3 主要试剂
2.2 拮抗酵母菌的培养及菌悬液的制备
2.2.1 酵母菌的活化
2.2.2 酵母菌悬液的制备
2.3 病原菌的培养及孢子悬浮液的制备
2.3.1 灰霉菌的活化与保藏
2.3.2 灰霉菌孢子悬浮液的制备
2.4 拮抗酵母菌的筛选及鉴定
2.4.1 拮抗酵母菌的细胞形态学观察
2.4.2 拮抗酵母菌的群体形态学观察
2.4.3 拮抗酵母菌的离体抑菌效果比较
2.4.4 拮抗酵母菌的活体抑菌效果比较
2.4.5 拮抗酵母菌的生理生化特征鉴定
2.4.6 拮抗酵母菌的DNA序列分析鉴定
2.5 拮抗酵母对灰霉菌的抑制效果及抑菌机理的研究
2.5.1 生长曲线的测定
2.5.2 平板拮抗实验
2.5.3 拮抗酵母对灰霉菌丝相对生长量的影响
2.5.4 不同浓度拮抗酵母对菌丝扩展的影响
2.5.5 不同浓度拮抗酵母对孢子萌发的影响
2.5.6 拮抗酵母的不同处理液对灰霉菌抑制效果的影响
2.5.7 拮抗酵母对灰霉菌抑制作用的显微镜观察
2.5.8 拮抗酵母胞外水解酶的分泌情况
2.5.9 拮抗酵母挥发性代谢物质对灰霉菌的抑制效果
2.6 拮抗酵母对番茄灰霉病的生防效果及诱导抗性研究
2.6.1 拮抗酵母对番茄采后病害自然侵染的防效
2.6.2 酵母悬浮液接种处理对番茄灰霉病接种侵染的防效
2.6.3 酵母悬浮液喷施处理对番茄灰霉病接种侵染的防效
2.6.4 拮抗酵母菌的不同接种时间对番茄灰霉病害的防治效果
2.6.5 拮抗酵母菌在番茄果实伤口处生长动态的测定
2.6.6 拮抗酵母处理对番茄果实POD活性的影响
2.6.7 拮抗酵母处理对番茄果实PPO活性的影响
2.6.8 拮抗酵母处理对番茄果实PAL活性的影响
2.6.9 拮抗酵母处理对番茄果实儿丁质酶活性的影响
2.6.10 拮抗酵母处理对番茄果实β-1,3葡聚糖酶活性的影响
2.7 拮抗酵母处理对番茄果实生理品质的影响
2.7.1 果实预处理
2.7.2 硬度
2.7.3 失重率
2.7.4 可溶性固形物含量
2.7.5 可滴定酸含量
2.7.6 抗坏血酸含量
2.7.7 呼吸强度
2.7.8 总酚含量
2.8 统计与分析
3 结果与讨论
3.1 拮抗酵母菌的筛选及鉴定
3.1.1 拮抗酵母菌的细胞形态学观察
3.1.2 拮抗酵母菌的群体形态学观察
3.1.3 拮抗酵母菌的离体抑菌效果比较
3.1.4 拮抗酵母菌的活体抑菌效果比较
3.1.5 拮抗酵母菌的生理生化特征鉴定
3.1.6 拮抗酵母菌的DNA序列分析鉴定
3.2 拮抗酵母对灰霉菌的抑制效果及抑菌机理的研究
3.2.1 生长曲线的测定
3.2.2 平板拮抗实验
3.2.3 拮抗酵母对灰霉菌丝相对生长量的影响
3.2.4 不同浓度拮抗酵母对菌丝扩展的影响
3.2.5 不同浓度拮抗酵母对孢子萌发的影响
3.2.6 拮抗酵母的不同处理液对灰霉菌抑制效果的影响
3.2.7 拮抗酵母对灰霉菌抑制作用的显微镜观察
3.2.8 拮抗酵母胞外水解酶的分泌情况
3.2.9 拮抗酵母挥发性代谢物质对灰霉菌的抑制效果
3.3 拮抗酵母对番茄灰霉病的生防效果及诱导抗性研究
3.3.1 拮抗酵母对番茄采后病害自然侵染的防效
3.3.2 酵母悬浮液接种处理对番茄灰霉病接种侵染的防效
3.3.3 酵母悬浮液喷施处理对番茄灰霉病接种侵染的防效
3.3.4 拮抗酵母菌的不同接种时间对番茄灰霉病害的防治效果
3.3.5 拮抗酵母菌在番茄果实伤口处生长动态的测定
3.3.6 拮抗酵母处理对番茄果实POD活性的影响
3.3.7 拮抗酵母处理对番茄果实PPO活性的影响
3.3.8 拮抗酵母处理对番茄果实PAL活性的影响
3.3.9 拮抗酵母处理对番茄果实儿丁质酶活性的影响
3.3.10 拮抗酵母处理对番茄果实β-1,3葡聚糖酶活性的影响
3.4 拮抗酵母处理对番茄果实生理品质的影响
3.4.1 硬度
3.4.2 失重率
3.4.3 可溶性固形物含量
3.4.4 可滴定酸含量
3.4.5 抗坏血酸含量
3.4.6 呼吸强度
3.4.7 总酚含量
4 结论
5 展望
6 参考文献
7 攻读硕士学位期间发表论文情况
8 致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]出芽短梗霉菌株YW1防治储藏期草莓灰霉病的研究[J]. 黄蓉,杨龙,张静,李国庆. 中国生物防治学报. 2013(04)
[2]果蔬贮藏辐照保鲜技术研究进展[J]. 赵喜亭,周颖媛,邵换娟. 北方园艺. 2013(20)
[3]番茄常见的两种生理性病害[J]. 赵立波,胡增娟. 农业开发与装备. 2013(09)
[4]设施番茄灰霉病绿色防控技术[J]. 齐军山,张悦丽,张博,李长松. 中国蔬菜. 2013(15)
[5]我国番茄产业如何应对市场新挑战[J]. 程力,韩葆颖. 农产品加工. 2013(06)
[6]生防酵母菌防治果品采后病害机理的研究进展[J]. 刘普,方静凡,程运江,龙超安,朱立武. 华中农业大学学报. 2013(02)
[7]番茄贮藏保鲜技术[J]. 康珏,左嚞伟. 四川农业科技. 2013(01)
[8]草莓灰霉病拮抗酵母菌的筛选鉴定及对采后草莓品质的影响[J]. 秦晓杰,许皎姣,索娜,周海莲,何洋,肖红梅. 食品工业科技. 2012(21)
[9]设施蔬菜灰霉病的发生危害与防治研究进展[J]. 周成刚,颜琴,刘伟中,汪立新,吴险平. 上海农业科技. 2012(01)
[10]北京番茄产业发展现状及其对策[J]. 商咪,刘芳,何忠伟. 北京农学院学报. 2011(04)
博士论文
[1]柑橘采后病害生防菌YS-1的筛选和YS-1粗提物的抑菌机理及性质研究[D]. 涂起红.南昌大学 2013
[2]双歧杆菌微胶囊的研究[D]. 邹强.江南大学 2012
[3]橙汁中酵母菌的分离鉴定及其快速分子检测技术研究[D]. 郭冬琴.西南大学 2012
[4]拮抗酵母及结合热空气处理对樱桃番茄采后病害的防治及其机理研究[D]. 赵妍.南京农业大学 2010
[5]酵母菌的分离、筛选以及对柑橘保鲜的机理研究[D]. 龙超安.华中农业大学 2005
[6]酵母拮抗菌的抑病机理及生防效力改良的研究[D]. 万亚坤.中国科学院研究生院（植物研究所） 2004
[7]果实采后病害生物防治及其机理研究[D]. 范青.中国科学院植物研究所 2001
硕士论文
[1]壳寡糖对番茄果实保鲜机理的研究[D]. 周国春.天津科技大学 2016
[2]间型假丝酵母C410防治番茄灰霉病的研究[D]. 李若晨.华中农业大学 2014
[3]三株生防酵母菌对番茄灰霉病生物防治的比较研究[D]. 关鑫.东北农业大学 2014
[4]肉桂醛对番茄采后灰霉病的抑制作用及其生理品质的影响[D]. 张娜娜.上海师范大学 2014
[5]樱桃番茄采后贮藏保鲜与质量安全研究[D]. 奉代力.海南大学 2013
[6]白酒酒醅中酵母菌的分离鉴定及特性研究[D]. 王琛.四川农业大学 2013
[7]生物源保鲜剂对樱桃番茄保鲜效果的研究[D]. 李蒙.南京农业大学 2013
[8]不同处理对软枣猕猴桃采后生理生化变化的影响[D]. 蔡慧.吉林农业大学 2012
[9]葡萄有孢汉逊酵母（Hanseniaspora uvarum）对灰霉病抑制机理的探讨[D]. 周海莲.南京农业大学 2012
[10]膜醭毕赤酵母对柑橘采后青绿霉病害的生物防治及机理研究[D]. 罗杨.西南大学 2011
本文编号：3731102
【文章页数】：85 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
1 前言
1.1 灰霉菌的研究进展
1.1.1 灰霉菌的生物学特性
1.1.2 灰霉菌的主要危害
1.1.3 灰霉菌的侵染过程及致病因子
1.1.4 灰霉菌的主要防治研究现状
1.2 拮抗酵母菌的研究进展
1.2.1 拮抗酵母对果蔬采后病害的防治效果
1.2.2 拮抗酵母菌对果蔬采后病害的防治机理
1.2.3 拮抗酵母菌的商业化应用
1.2.4 拮抗酵母的商业化面临的问题及未来的发展前景
1.3 番茄的概述
1.3.1 番茄采后贮藏保鲜的研究现状
1.3.2 番茄采后贮藏保鲜的评价指标
1.4 研究目的、意义和主要内容
1.4.1 研究目的及意义
1.4.2 主要研究内容
2 材料与方法
2.1 实验材料与仪器设备
2.1.1 实验材料
2.1.2 仪器设备
2.1.3 主要试剂
2.2 拮抗酵母菌的培养及菌悬液的制备
2.2.1 酵母菌的活化
2.2.2 酵母菌悬液的制备
2.3 病原菌的培养及孢子悬浮液的制备
2.3.1 灰霉菌的活化与保藏
2.3.2 灰霉菌孢子悬浮液的制备
2.4 拮抗酵母菌的筛选及鉴定
2.4.1 拮抗酵母菌的细胞形态学观察
2.4.2 拮抗酵母菌的群体形态学观察
2.4.3 拮抗酵母菌的离体抑菌效果比较
2.4.4 拮抗酵母菌的活体抑菌效果比较
2.4.5 拮抗酵母菌的生理生化特征鉴定
2.4.6 拮抗酵母菌的DNA序列分析鉴定
2.5 拮抗酵母对灰霉菌的抑制效果及抑菌机理的研究
2.5.1 生长曲线的测定
2.5.2 平板拮抗实验
2.5.3 拮抗酵母对灰霉菌丝相对生长量的影响
2.5.4 不同浓度拮抗酵母对菌丝扩展的影响
2.5.5 不同浓度拮抗酵母对孢子萌发的影响
2.5.6 拮抗酵母的不同处理液对灰霉菌抑制效果的影响
2.5.7 拮抗酵母对灰霉菌抑制作用的显微镜观察
2.5.8 拮抗酵母胞外水解酶的分泌情况
2.5.9 拮抗酵母挥发性代谢物质对灰霉菌的抑制效果
2.6 拮抗酵母对番茄灰霉病的生防效果及诱导抗性研究
2.6.1 拮抗酵母对番茄采后病害自然侵染的防效
2.6.2 酵母悬浮液接种处理对番茄灰霉病接种侵染的防效
2.6.3 酵母悬浮液喷施处理对番茄灰霉病接种侵染的防效
2.6.4 拮抗酵母菌的不同接种时间对番茄灰霉病害的防治效果
2.6.5 拮抗酵母菌在番茄果实伤口处生长动态的测定
2.6.6 拮抗酵母处理对番茄果实POD活性的影响
2.6.7 拮抗酵母处理对番茄果实PPO活性的影响
2.6.8 拮抗酵母处理对番茄果实PAL活性的影响
2.6.9 拮抗酵母处理对番茄果实儿丁质酶活性的影响
2.6.10 拮抗酵母处理对番茄果实β-1,3葡聚糖酶活性的影响
2.7 拮抗酵母处理对番茄果实生理品质的影响
2.7.1 果实预处理
2.7.2 硬度
2.7.3 失重率
2.7.4 可溶性固形物含量
2.7.5 可滴定酸含量
2.7.6 抗坏血酸含量
2.7.7 呼吸强度
2.7.8 总酚含量
2.8 统计与分析
3 结果与讨论
3.1 拮抗酵母菌的筛选及鉴定
3.1.1 拮抗酵母菌的细胞形态学观察
3.1.2 拮抗酵母菌的群体形态学观察
3.1.3 拮抗酵母菌的离体抑菌效果比较
3.1.4 拮抗酵母菌的活体抑菌效果比较
3.1.5 拮抗酵母菌的生理生化特征鉴定
3.1.6 拮抗酵母菌的DNA序列分析鉴定
3.2 拮抗酵母对灰霉菌的抑制效果及抑菌机理的研究
3.2.1 生长曲线的测定
3.2.2 平板拮抗实验
3.2.3 拮抗酵母对灰霉菌丝相对生长量的影响
3.2.4 不同浓度拮抗酵母对菌丝扩展的影响
3.2.5 不同浓度拮抗酵母对孢子萌发的影响
3.2.6 拮抗酵母的不同处理液对灰霉菌抑制效果的影响
3.2.7 拮抗酵母对灰霉菌抑制作用的显微镜观察
3.2.8 拮抗酵母胞外水解酶的分泌情况
3.2.9 拮抗酵母挥发性代谢物质对灰霉菌的抑制效果
3.3 拮抗酵母对番茄灰霉病的生防效果及诱导抗性研究
3.3.1 拮抗酵母对番茄采后病害自然侵染的防效
3.3.2 酵母悬浮液接种处理对番茄灰霉病接种侵染的防效
3.3.3 酵母悬浮液喷施处理对番茄灰霉病接种侵染的防效
3.3.4 拮抗酵母菌的不同接种时间对番茄灰霉病害的防治效果
3.3.5 拮抗酵母菌在番茄果实伤口处生长动态的测定
3.3.6 拮抗酵母处理对番茄果实POD活性的影响
3.3.7 拮抗酵母处理对番茄果实PPO活性的影响
3.3.8 拮抗酵母处理对番茄果实PAL活性的影响
3.3.9 拮抗酵母处理对番茄果实儿丁质酶活性的影响
3.3.10 拮抗酵母处理对番茄果实β-1,3葡聚糖酶活性的影响
3.4 拮抗酵母处理对番茄果实生理品质的影响
3.4.1 硬度
3.4.2 失重率
3.4.3 可溶性固形物含量
3.4.4 可滴定酸含量
3.4.5 抗坏血酸含量
3.4.6 呼吸强度
3.4.7 总酚含量
4 结论
5 展望
6 参考文献
7 攻读硕士学位期间发表论文情况
8 致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]出芽短梗霉菌株YW1防治储藏期草莓灰霉病的研究[J]. 黄蓉,杨龙,张静,李国庆. 中国生物防治学报. 2013(04)
[2]果蔬贮藏辐照保鲜技术研究进展[J]. 赵喜亭,周颖媛,邵换娟. 北方园艺. 2013(20)
[3]番茄常见的两种生理性病害[J]. 赵立波,胡增娟. 农业开发与装备. 2013(09)
[4]设施番茄灰霉病绿色防控技术[J]. 齐军山,张悦丽,张博,李长松. 中国蔬菜. 2013(15)
[5]我国番茄产业如何应对市场新挑战[J]. 程力,韩葆颖. 农产品加工. 2013(06)
[6]生防酵母菌防治果品采后病害机理的研究进展[J]. 刘普,方静凡,程运江,龙超安,朱立武. 华中农业大学学报. 2013(02)
[7]番茄贮藏保鲜技术[J]. 康珏,左嚞伟. 四川农业科技. 2013(01)
[8]草莓灰霉病拮抗酵母菌的筛选鉴定及对采后草莓品质的影响[J]. 秦晓杰,许皎姣,索娜,周海莲,何洋,肖红梅. 食品工业科技. 2012(21)
[9]设施蔬菜灰霉病的发生危害与防治研究进展[J]. 周成刚,颜琴,刘伟中,汪立新,吴险平. 上海农业科技. 2012(01)
[10]北京番茄产业发展现状及其对策[J]. 商咪,刘芳,何忠伟. 北京农学院学报. 2011(04)
博士论文
[1]柑橘采后病害生防菌YS-1的筛选和YS-1粗提物的抑菌机理及性质研究[D]. 涂起红.南昌大学 2013
[2]双歧杆菌微胶囊的研究[D]. 邹强.江南大学 2012
[3]橙汁中酵母菌的分离鉴定及其快速分子检测技术研究[D]. 郭冬琴.西南大学 2012
[4]拮抗酵母及结合热空气处理对樱桃番茄采后病害的防治及其机理研究[D]. 赵妍.南京农业大学 2010
[5]酵母菌的分离、筛选以及对柑橘保鲜的机理研究[D]. 龙超安.华中农业大学 2005
[6]酵母拮抗菌的抑病机理及生防效力改良的研究[D]. 万亚坤.中国科学院研究生院（植物研究所） 2004
[7]果实采后病害生物防治及其机理研究[D]. 范青.中国科学院植物研究所 2001
硕士论文
[1]壳寡糖对番茄果实保鲜机理的研究[D]. 周国春.天津科技大学 2016
[2]间型假丝酵母C410防治番茄灰霉病的研究[D]. 李若晨.华中农业大学 2014
[3]三株生防酵母菌对番茄灰霉病生物防治的比较研究[D]. 关鑫.东北农业大学 2014
[4]肉桂醛对番茄采后灰霉病的抑制作用及其生理品质的影响[D]. 张娜娜.上海师范大学 2014
[5]樱桃番茄采后贮藏保鲜与质量安全研究[D]. 奉代力.海南大学 2013
[6]白酒酒醅中酵母菌的分离鉴定及特性研究[D]. 王琛.四川农业大学 2013
[7]生物源保鲜剂对樱桃番茄保鲜效果的研究[D]. 李蒙.南京农业大学 2013
[8]不同处理对软枣猕猴桃采后生理生化变化的影响[D]. 蔡慧.吉林农业大学 2012
[9]葡萄有孢汉逊酵母（Hanseniaspora uvarum）对灰霉病抑制机理的探讨[D]. 周海莲.南京农业大学 2012
[10]膜醭毕赤酵母对柑橘采后青绿霉病害的生物防治及机理研究[D]. 罗杨.西南大学 2011
本文编号：3731102
本文链接：https://www.wllwen.com/nykjlw/dzwbhlw/3731102.html
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