PKG对粘虫成虫迁飞特性的影响

发布时间：2023-03-01 18:31

　　粘虫Mythimna separata(Walker)隶属于昆虫纲(Insecta),鳞翅目(Lepidoptera),夜蛾科(Noctuidae),是非常典型的远距离迁飞害虫。资料表明,粘虫幼虫密度影响成虫的迁飞行为,高密度下羽化的成虫具有迁飞倾向。资料报道PKG基因影响模式昆虫的觅食行为。因此,本文利用候选基因法,测定PKG基因对粘虫迁飞特性的影响,旨在为阐明粘虫迁飞行为的分子机制提供基础资料。本实验对粘虫幼虫设置了6个密度(1头/瓶、5头/瓶、10头/瓶、15头/瓶、20头/瓶、30头/瓶),通过实时定量PCR(RT-qPCR)技术,检测了PKG基因在这6个饲养密度下5龄幼虫头部的mRNA水平的表达情况。结果表明,PKG基因在不同的密度下头部的mRNA表达量存在差异,且1头/瓶粘虫PKG表达量显著高于10头/瓶(P<0.05)。PKG基因在两种生活型成虫头部(1头/瓶和10头/瓶)的mRNA表达水平也存在差异,10头/瓶的PKG表达量显著高于1头/瓶(P<0.05)。此外,利用紫外分光光度技术,检测了两种生活型成虫头部的PKG蛋白的活性。结果表明,10头/瓶的PKG蛋...

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中文摘要
ABSTRACT
1 前言
    1.1 粘虫的基本特征
    1.2 粘虫在农业上的危害
    1.3 防治方法
    1.4 国内外研究动态
        1.4.1 粘虫迁飞行为的研究动态
        1.4.2 PKG基因的研究动态
    1.5 研究目的与意义
    1.6 研究内容和技术路线
        1.6.1 研究内容
        1.6.2 技术路线
2 材料与方法
    2.1 实验材料
    2.2 实验仪器
    2.3 实验试剂
        2.3.1 实验试剂名称
        2.3.2 实验配制试剂
    2.4 实验方法
        2.4.1 不同幼虫密度下,检测粘虫5龄幼虫头部PKG的mRNA相对表达量
        2.4.2 两种生活型粘虫成虫PKG蛋白活性的测定
        2.4.3 荧光免疫组织化学定位粘虫成虫脑中PKG位置
        2.4.4 利用昆虫飞行数据采集系统,测定两种生活型粘虫成虫飞行能力
        2.4.5 测定两种生活型粘虫成虫的能源物质含量
3 实验结果
    3.1 不同幼虫密度下,粘虫5龄幼虫头部PKG的mRNA表达量分析
        3.1.1 不同处理组总RNA的浓度和纯度分析
        3.1.2 RT-qPCR标准曲线制作
        3.1.3 PKG的mRNA的相对表达量
    3.2 两种生活型粘虫成虫脑中,PKG基因的相对表达量
    3.3 两种生活型粘虫成虫脑中,PKG蛋白的活性
        3.3.1 两种生活型粘虫成虫蛋白浓度的测定
        3.3.2 两种生活型粘虫成虫PKG蛋白活性的分析
    3.4 定位PKG在粘虫成虫脑中的位置
    3.5 通过药理学手段改变幼虫PKG蛋白,检测成虫PKG蛋白的活性
    3.6 改变幼虫PKG蛋白活性,研究PKG基因对成虫飞行能力的影响
    3.7 改变幼虫PKG蛋白活性,研究PKG基因对成虫能源物质含量的影响
        3.7.1 研究PKG基因对成虫糖原含量的影响
        3.7.2 研究PKG基因对成虫甘油酯含量的影响
4 讨论
    4.1 两种生活型粘虫成虫PKG基因的表达量与蛋白活性讨论
    4.2 粘虫成虫脑中PKG基因的定位讨论
    4.3 粘虫PKG基因与飞行能力的关系讨论
    4.4 粘虫PKG基因与能源物质的关系讨论
    4.5 成虫是否保留幼虫相关特性的讨论
5 结论
6 展望
参考文献
附录A
在学期间的研究成果
致谢



本文编号：3752012