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功能性内生菌的筛选及其对水稻幼苗生长的影响

发布时间:2020-05-22 23:08
【摘要】:在我国南方,水稻一直是人们维持生计的重要的粮食作物,想要解决人们的温饱问题就要尽可能的提高水稻的产量并实现丰收,但是,单纯的依靠过度使用化肥农药来盲目提高单产往往是盲目的,可能不会短时间的造成各种损害,但是随着时间的推移所造成的弊端也会越来越显现,土壤结构被破坏,农产品的品质和结实率下降,而且水稻在种植过程中也会滋生各种病害,严重影响水稻产量。而微生物肥料在一定程度上能够降低化肥农药所带来的风险,并且还能促进水稻生长,改善品质。本研究以中国农业科学院库藏的46株菌种为材料,依据菌种的生长特性,分别采用TSA、YMA和R_2A三种培养基对其进行活化,通过16S rRNA基因序列分析进行复核鉴定,同时开展溶磷、产IAA、产铁载体及ACC-脱氨酶、拮抗等的功能性试验,并对功能菌株进行溶血检测,筛选出具有促生、抗病功能、且安全的菌株;对筛选出的功能菌株进行盆栽试验,获得对水稻幼苗促生效果优良的菌株;进一步对优良菌株进行发酵试验,优化发酵条件;最后制成微生物菌剂,并进行大田育苗试验,从而为水稻特用的微生物肥料的生产提供理论依据和优良的菌株资源,对提高水稻产量和质量具有重要意义。研究结果如下:(1)通过功能性试验,筛选出对水稻的生长有益的菌株,其中21株具有产铁能力的菌株,2株既能溶解有机磷又能溶解无机磷的菌株,12株对番茄青枯病菌有拮抗作用,4株对丁香假单胞菌有拮抗作用,18株对稻瘟病原菌有拮抗作用,2株对烟草疫霉有拮抗作用,24株菌能较好的产生IAA,另有7株菌具有ACC脱氨酶活性。(2)通过血平板试验对筛选出的水稻促生功能菌株做安全性评价试验,其中15株菌有溶血现象,会对动物的安全产生影响;31株菌株无溶血现象,在水稻生产过程中是安全的。(3)将10株综合功能较好的菌株进行盆栽试验,编号为ACCC11025、HMC50、YC37和YC41的4株菌对水稻苗的根长、茎长、根重以及总鲜重上都优于空白对照,并存在显著差异。(4)对选出的4株菌进行发酵试验,确定发酵的最优条件表现为:YC41的最适盐浓度为1.0%,最适pH值为6,最适生长温度为30℃;ACCC11025的最适盐浓度为0.5%,最适pH值为8,最适生长温度为25℃;HMC50的最适盐浓度为0.2%,最适pH值为8,最适生长温度为35℃;YC37的最适盐浓度为0%,最适pH值为9,最适生长温度为30℃。(5)将制成的微生物菌剂应用于大田育秧试验,通过对根长、茎长、根重和单株重的测量分析表明,微生物菌剂对水稻幼苗的生长起到了一定的促进作用,尤其是施加了菌剂的水稻幼苗根重与不施加菌剂的幼苗根重相比具有显著差异,且须根较发达。本文中对菌种保藏中心的46株菌进行功能评价以及安全性评价后共筛选出10株菌进行盆栽试验。最终的结果表明ACCC11025、YC37、YC41和HMC50这四株菌的促生效果较好。对这四株菌进行发酵条件的优化,其中包括温度、pH值和盐浓度这三个方面,将这四株菌制成菌剂后施加到黑龙江省哈尔滨市农业科学院试验基地,发现在施加了本试验中制成的菌剂后同时配合施用一定的壮秧剂后水稻幼苗在根重以及须根的数量上明显比仅使用壮秧剂的水稻幼苗的生长状况要好。
【图文】:

标准曲线,标准曲线,无水乙醇


不同浓度的 IAA 配置如下:度定量: 250mg/L:0.025gIAA+100ml 无水乙醇200mg/L:8.0ml 250mg/L IAA+2.0ml 无水乙醇150mg/L:6.0ml 250mg/L IAA+4.0ml 无水乙醇100mg/L:4.0ml 250mg/L IAA+6.0ml 无水乙醇50mg/L: 2.0ml 250mg/L IAA+8.0ml 无水乙醇35mg/L: 1.4ml 250mg/L IAA+8.6ml 无水乙醇30mg/L: 1.2ml 250mg/L IAA+8.8ml 无水乙醇25mg/L: 1.0ml 250mg/L IAA+9.0ml 无水乙醇0.0mg/L: 10.0ml 无水乙醇准曲线如下:表 2-3 纯 3-IAA 数据统计Tab.2-3 3-IAAdata statistics) 0 25 30 35 50 100 150 200.048 0.338 0.351 0.587 0.64 1.135 1.574 2.0

标准曲线,丁酸,标准曲线,总蛋白质


80 0.59 0.57 0.56 0.57100 0.66 0.66 0.68 0.67如图2-2为上述平均值减去0.11所绘的α㧟酮丁酸标准曲线。图2-2 α㧟酮丁酸标准曲线Fig.2-2 Standard curve of α-keto-butyric acid(ul)(min)(ul)(mg)α-(umol)(U/mg)测酶活时所用的体积酶活反应时间测总蛋白质时所取的体积总蛋白质含量生成丁酮酸物质的量酶比活力××=
【学位授予单位】:河北农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2019
【分类号】:S511

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本文编号:2676756

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