埃塞俄比亚芥种子油芥酸含量调控研究

发布时间：2020-06-28 03:36

【摘要】：埃塞俄比亚芥(Brassicaca rinata)属于十字花科芸蔓属,具有抗干旱、抗黑化病、抗锈病等多种抗逆性状。其种子丰富的芥酸有多种工业用途。植物中芥酸生物合成主要受到脂肪酸延长酶基因(FAE1)、油酸脱饱和酶(FAD2)基因和溶血性磷脂酸酰基转移酶(LPAAT)基因调控。本实验在质粒载体 pWatergate-napin-FAD2i-LLdLPAAT-KCS 基础之上,加入海甘蓝LPAAT-RNAi,构建了四基因质粒载体,调控埃塞俄比亚芥种子发育过程中芥酸的合成。利用标记基因NPTII序列设计引物对遗传转化TO代植株进行鉴定。40个TO代阳性株系上收到的T1代种子一部分直接播种进行NPTII引物和LdLPAAT引物PCR鉴定,一部分利用半粒法结合气相色谱法对T1代进行芥酸含量测定。对36个TO代株系中种子芥酸含量较高的4O个T1代株系进行转基因鉴定。本研究得到以下结果:(1)野生型埃塞俄比亚芥种子脂肪酸组分分析:挑取10颗野生型埃芥种子油进行脂肪酸组分和芥酸含量分析,共检测9种脂肪酸组分,得到其芥酸含量平均值为40.466%,油酸含量平均值为13.689%,亚油酸含量平均为16.871%,亚麻酸含量平均为13.934%;40个埃塞俄比亚芥T1代株系种子芥酸含量检测:(2)种子中芥酸含量超过48%的株系有4个,分别为143-1-6、59-5-1、59-2-2、59-2-3,其对应种子芥酸含量分别为48.582%、48.019%、48.413%、50.111%;芥酸含量最高的株系59-2-3亚麻酸含量为12.704%,亚麻酸含量为7.064%。相比野生型埃塞俄比亚芥种子,其芥酸含量提高了 23.83%,种子中油酸含量降低了 9.47%,亚油酸的含量下降了 24.69%,亚麻酸含量下降了 49.30%;(3)芥酸含量在45%-48%的株系有17个。其中株系6-3-4种子芥酸含量为46.498%,油酸含量为10.386%,亚油酸含量为17.892%,亚麻酸含量为12.905%,相比野生型种子,油酸含量降低24.13%,亚油酸含量提高6.05%,亚麻酸降低7.38%,芥酸含量提高14.90%;(4)芥酸含量在43%-45%的株系有19个。其中株系2-9-12种子芥酸含量为43.491%,油酸含量为8.485%,亚油酸含量为22.938%,亚麻酸含量为11.592%,相比野生型种子油酸含量降低了 38.01%,亚油酸含量提高了 35.96%,亚麻酸含量降低16.80%,芥酸含量提高7.47%;(5)对上述40个株系进行转基因鉴定,PCR结果表明芥酸含量高于48%的4个株系均能够扩增出NPTII和LdLPAAT目的片段。芥酸含量在45%-48%的17个株系均能鉴定出NPTII目的条带,除株系22-1-1、22-3-2、48-1-1、59-3-6、52-1-1外,其他均能扩增出LdLPAAT目的条带。芥酸含量在43%-45%的19个株系中,除株系17-3-7、142-3-1外均能鉴定出NPTII目的条带,余下17个株系中除株系176-1-4、51-1-1、6-4-2、47-1-1外,其他均能扩增出LdLPAAT目的条带;(6)上述40个株系中能够鉴定出NP,TH目的片段的38个转基因株系中,除株系59-2-3外,其余36个株系种子亚油酸含量均稍高于野生型,亚麻酸含量除株系5-2-5外,均低于野生型,这一结果表明FAD2i在这些转基因T1代株系中并未达到预期的干扰作用。
【学位授予单位】：湖北大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S565.4
【图文】：

埃塞俄比亚芥,种子脂肪酸,染色体组成,三角

第１章绪论第１章绪论逡逑埃塞俄比亚芥简介逡逑比亚芥（５ｒａｓｓ／ｃ＜７？７ｒ／？ｆｌｆａ），又名非洲油菜、芸芥，属于十字花禹氏三角三个复合种之一，被认为是由甘蓝／ｇｒａ）杂交后，染色体在自然条件下加倍进化而来队埃塞俄比亚和苏丹等国家发现和种植，栽培历史悠久，在农业方面前在许多国家和地区已有种植和研究。逡逑Ｂｒａｓｓｉｃａ邋ｎｉｇｒａ逡逑

旱金莲,植物,草地,高芥酸

般只连接在ｓｎ－１和ｓｎ－３位置上。逡逑１．２．逦２．邋３旱金莲逡逑旱金莲，旱金莲科旱金莲属植物，是一种观赏和药用作物，起源于玻利维亚逡逑北部和哥伦比亚，目前已经在美国的加利福尼亚、纽约、康乃迪克等地区种植［２８］。逡逑其种子中脂肪酸组成［２９］是：１０％的油酸（Ｃ１８：ｌ），邋２５％的花生烯酸（Ｃ２０：Ｏ和逡逑６５％的芥酸（Ｃ２２：ｌ），是自然界中发现的唯一的芥酸含量为６５％的高芥酸的植物。逡逑与十字花科甘蓝型油菜相比，旱金莲最大的不足就是种子的含油量太低，仅逡逑７％－８％，因此并不适合作为工业用高芥酸油料作物。逡逑１．２．逦２．邋４邋缎花逡逑锻花，十字花科缎花属植物，是一种观赏性植物，原产于阿尔干以及西南。逡逑通常情况下为两年生植物。ＥＦｅｈｌｉｎｇ等＿等对锻花种子中三酰甘油的组分进行逡逑了分析，种子内脂肪酸９０％为不饱和脂肪酸，芥酸含量为４８％，二十四碳酸烯逡逑酸含量为２４％左右，种子含油量为３０－４０％，逡逑

【参考文献】