光质和油菜素内酯对棉花胚性愈伤组织影响初析
发布时间:2020-07-15 10:50
【摘要】:本文以中棉所24为研究材料,从光质和油菜素内酯两个角度对棉花胚性愈伤组织诱导的影响进行了研究,通过生理生化和分子生物学角度进行了实验,旨在提高棉花组织培养和遗传转化的效率,为棉花生物技术提供一定的理论基础。本文的主要结论是:1红光较白光比愈伤组织黄褐色体积适中,能明显促进胚性愈伤组织的分化,表现为分化时间缩短,10天-20天左右即可,分化率为白光的1.5x-3x,EC分化状态良好。愈伤组织鲜重:蓝光红光白光黑暗;酶活:蓝光下POD、SOD活性最高,其活性越高,愈伤组织增殖越大,其酶活性与愈伤组织增殖成正比关系,CAT活性最低,红光下三种酶活性居中。蓝光下可溶性糖和蛋白含量较低。多胺和激素含量:红光处理下腐胺含量较少,总胺含量、精胺和亚精胺含量较高。激素含量,红光处理下生长素较高,且差异显著IAA/ZT比值对胚性愈伤组织发生有正效应;ABA适中水平,可能有利于胚性细胞发生,而较高ABA含量可能不利于胚性细胞的发生。红光下体胚基因AGL15、LEC2、WUS表达量上调,红光处理下的愈伤组织开始具有了胚性细胞的特征,标记基因已明显上调表达。2不同浓度BRZ外施于培养基中,棉花胚性愈伤组织分化率出现显著差异,随着BRZ浓度0-60nm增加,EC分化率逐渐增加;当BRZ浓度为60nm时,EC分化率最高,可以达到89.6%。转录组学、生理生化结合转基因株系实验表明:BR对于棉花胚性愈伤组织分化是必须的,适当浓度的BR能够明显促进胚性愈伤组织的分化,可能原因是由于BRZ抑制作用,使得BRX上调,AUX升高,生长素浓度升高,导致BR合成基因上调,BR浓度适当升高;由于BRZ的作用,导致乙烯相关信号基因ETR1、CTR1、EBF1、ERN3和ERF1/2明显下调,相关不饱和脂肪酸基因ACC、FAD和KCS明显上调,乙烯水平的降低和脂肪酸含量的增加,都促进胚性愈伤组织分化率升高。
【学位授予单位】:中国农业科学院
【学位级别】:博士后
【学位授予年份】:2019
【分类号】:S562
【图文】:
分析代谢产物,证实了邋BR生物合成途径中鲨烯(squalene)最终转化成为BL的逡逑大量反应步骤。从鲨烯还原到Campestanol后,在留醇体和侧链上发生一系列羟逡逑化和氧化步骤的同时伴随着C-6位置的酮基化(这种酮基化发生在C-22、C-23、逡逑C-3和C-2位置的修饰前和后)。这两种分支途径分别被称为C-6氧化前途径和逡逑C-6氧化后途径。在烟草、水稻和百合等植物中发现了与此相似的途径,其修饰逡逑和不同步骤之间的关系还有待进一步证实,而且由于许多不同类似物(侧链结构逡逑不同)的出现可能导致情况更为复杂(同种植物中不同类似物的出现表明可能存逡逑在其他的合成途径)。逡逑
图2-1光处理模式图逡逑Figure邋2-1邋Pattern邋of邋light邋treatments逡逑)邋BL邋indicates邋blue邋light-emitting邋diode邋light;邋(B)邋RL:BL=3:1邋indicates邋that邋the邋proportiootosynthetic邋photon邋flux邋density邋of邋red邋and邋blue邋LED邋is邋3:1;逦(C)邋RL:BL=1:3邋indicates邋thaportion邋of邋photosynthetic邋photon邋flux邋density邋of邋red邋and邋blue邋LED邋is邋1:3;逦(D)邋RL邋indicate19逡逑
2.2.2可溶性糖和蛋白逡逑根据图2-3可知,不同光处理下,可溶性糖和蛋白黑暗处理下含量最高,红逡逑光处理下含量居中。逡逑a邋1&0逦a逦b邋303逦a逡逑1S-5邋b逦200逦I逦.逡逑a财4逦I逡逑lllillil逡逑wiwi?逦M逦Blue逦CMrt逦M逦6luc逡逑IgtA邋quality逦itglil逡逑图2-3不同光质条件下可溶性糖(A)和可溶性蛋白(B)含量逡逑Figure邋2-3邋Soluble邋sugar邋(A)邋and邋soluble邋protein邋(B)邋content邋in邋calli邋grown邋under邋different邋light逡逑treatments逡逑Data邋represent邋the邋means邋of邋three邋replicates士SDs邋(n=3)邋?邋Bars邋with邋different邋letter邋(s)邋are逡逑significantly邋different邋based邋on邋Tukey9邋s邋HSD邋test邋(P<0.05)逡逑2.2.3抗氧化酶逡逑CAT活性黑暗下活性最高,红光、白光居中,蓝光下活性最低;POD活性蓝逡逑光下活性最高
本文编号:2756392
【学位授予单位】:中国农业科学院
【学位级别】:博士后
【学位授予年份】:2019
【分类号】:S562
【图文】:
分析代谢产物,证实了邋BR生物合成途径中鲨烯(squalene)最终转化成为BL的逡逑大量反应步骤。从鲨烯还原到Campestanol后,在留醇体和侧链上发生一系列羟逡逑化和氧化步骤的同时伴随着C-6位置的酮基化(这种酮基化发生在C-22、C-23、逡逑C-3和C-2位置的修饰前和后)。这两种分支途径分别被称为C-6氧化前途径和逡逑C-6氧化后途径。在烟草、水稻和百合等植物中发现了与此相似的途径,其修饰逡逑和不同步骤之间的关系还有待进一步证实,而且由于许多不同类似物(侧链结构逡逑不同)的出现可能导致情况更为复杂(同种植物中不同类似物的出现表明可能存逡逑在其他的合成途径)。逡逑
图2-1光处理模式图逡逑Figure邋2-1邋Pattern邋of邋light邋treatments逡逑)邋BL邋indicates邋blue邋light-emitting邋diode邋light;邋(B)邋RL:BL=3:1邋indicates邋that邋the邋proportiootosynthetic邋photon邋flux邋density邋of邋red邋and邋blue邋LED邋is邋3:1;逦(C)邋RL:BL=1:3邋indicates邋thaportion邋of邋photosynthetic邋photon邋flux邋density邋of邋red邋and邋blue邋LED邋is邋1:3;逦(D)邋RL邋indicate19逡逑
2.2.2可溶性糖和蛋白逡逑根据图2-3可知,不同光处理下,可溶性糖和蛋白黑暗处理下含量最高,红逡逑光处理下含量居中。逡逑a邋1&0逦a逦b邋303逦a逡逑1S-5邋b逦200逦I逦.逡逑a财4逦I逡逑lllillil逡逑wiwi?逦M逦Blue逦CMrt逦M逦6luc逡逑IgtA邋quality逦itglil逡逑图2-3不同光质条件下可溶性糖(A)和可溶性蛋白(B)含量逡逑Figure邋2-3邋Soluble邋sugar邋(A)邋and邋soluble邋protein邋(B)邋content邋in邋calli邋grown邋under邋different邋light逡逑treatments逡逑Data邋represent邋the邋means邋of邋three邋replicates士SDs邋(n=3)邋?邋Bars邋with邋different邋letter邋(s)邋are逡逑significantly邋different邋based邋on邋Tukey9邋s邋HSD邋test邋(P<0.05)逡逑2.2.3抗氧化酶逡逑CAT活性黑暗下活性最高,红光、白光居中,蓝光下活性最低;POD活性蓝逡逑光下活性最高
【参考文献】
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2 秦公伟;曹小勇;张静;张威威;赵艳妮;;银杏叶片愈伤组织培养及光暗条件对黄酮含量的影响[J];陕西理工学院学报(自然科学版);2011年01期
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7 倪德祥;易莹;张丕方;王凯基;;光质对凹叶景天愈伤组织和不定芽形成的效应[J];上海农业学报;1988年01期
本文编号:2756392
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