茶树花黄酮提取分离的参数优化与品种间的差异性研究
发布时间：2020-10-14 11:31
针对茶树花黄酮在不同茶树品种花中的含量及其提取分离工艺进行了研究,利用响应面实验设计,确定出茶树花总黄酮的最佳提取条件;从四种不同树脂中筛选出纯化效果最佳的大孔吸附树脂和建立最适分离方法;采用UPLC/MS对不同品种茶树花中的黄酮苷组分进行检测与定量分析,主要研究结果如下:1.应用响应面法优化得到茶树花总黄酮的醇提工艺结果为:提取时间(A)为112min,乙醇体积分数(B)为78%,液料比(C)为54mL/g,提取温度(D)为75℃;拟合的回归方程为:总黄酮的得率=7.06+0.15A+0.26B+0.25C+0.24D+ 0.35AB+0.17AD+0.46BC+0.20BD-0.36A2-0.56B2-0.52C2-0.58D2(R2=96.93%),表明方程拟合程度好,预测值为7.22mg/g。对最佳工艺条件进行验证,黄酮的得率为7.09 mg/g,建立的优化提取条件可信。2.在静态吸附实验基础上,在AB-8、D-101、DM-301、DA-201四种大孔树脂中筛选出AB-8纯化茶树花黄酮的效果最佳,吸附量为I29.96mg/g,解析率为96.45%,回收率为69.20%;动态吸附实验确定了 AB-8树脂的最适分离条件:当AB-8的柱体积为(15mm*12Omm)时,上样液的浓度为1.8Omg/mL,吸附时间为1h,洗脱剂(乙醇)的浓度为75%,洗脱流速为1.5mL/min。3.利用UPLC-MS检测出了五个茶树花品种中12种黄酮苷,通过比较不同品种茶树花中黄酮苷的组分含量,发现黄叶早茶树花中Kae-glc-rha-gal和Kae-glc-rha-glc的含量显著高于其他品种;Myr-glc在福建水仙茶树花中的含量比其他品种中高出近4倍,而其Myr-gal的含量却只有其他品种的五分之一;政和大白茶的黄酮苷总量是五个品种中最低的;尽管各黄酮苷组分在不同品种中的含量呈现明显的差异性,但所有品种的茶树花均表现为山奈酚苷槲皮素苷杨梅素苷,且主要以三糖基黄酮苷的形式存在。
【学位单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：S571.1
【部分图文】：
Ｆｉｇ．２．１?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｒａｔｉｏ?ｏｆ?ｌｉｑｕｉｄ?ｔｏ?ｓｏｌｉｄ?ｏｎ?ｙｉｅｌｄｓ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ｆｌａｖｏｎｅｓ??２．２．２乙醇体积分数对黄酮提取效果的影响??图２．２为采用不同浓度乙醇提取茶树花总黄酮结果，当乙醇体积分数低于７０％??时，总黄酮的提取量会随着乙醇体积分数的增大而增加，当乙醇的体积分数在??７０％￣８０％时，总黄酮的提取率迗到最高，黄酮属于弱极性化合物，依据相似相??溶原理，易溶于中等或者中等偏弱极性的溶剂中。??１９??
液料比（ｍｌ／ｇ）??０??图２．１液料比对总黄酮提取量的影响??Ｆｉｇ．２．１?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｒａｔｉｏ?ｏｆ?ｌｉｑｕｉｄ?ｔｏ?ｓｏｌｉｄ?ｏｎ?ｙｉｅｌｄｓ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ｆｌａｖｏｎｅｓ??２．２．２乙醇体积分数对黄酮提取效果的影响??图２．２为采用不同浓度乙醇提取茶树花总黄酮结果，当乙醇体积分数低于７０％??时，总黄酮的提取量会随着乙醇体积分数的增大而增加，当乙醇的体积分数在??７０％￣８０％时，总黄酮的提取率迗到最高，黄酮属于弱极性化合物，依据相似相??溶原理，易溶于中等或者中等偏弱极性的溶剂中。??１９??
图２．３提取温度对总黄酮提取量的影响??Ｆｉｇ．２．３?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ?ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ?ｏｎ?ｙｉｅｌｄｓ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ｆｌａｖｏｎｅｓ??图２．３显示，随着提取温度的变化，茶树花提取液中总黄酮呈现出先上升再??下降的趋势，当提取温度从４０°Ｃ到７０°Ｃ，黄酮化合物在乙醇溶液中的浸出量随??着温度的升高而增加，在７０°Ｃ时，总黄酮的提取量最高，为６．８０ｍｇ／ｇ，当温度??超过７０°Ｃ，总黄酮的浸出量随着温度的升高而下降；主要原因是当温度低于７０°Ｃ，??温度升高导致溶液的活度增加，进而增加了溶液的扩散系数［７（１］，促逬更多黄酮??类化合物的溶出，但是当温度高于７（ＴＣ时，随着温度的继续升高，会有部分黄??酮化合物发生降解，与此同时，温度过高导致细胞内的可溶性蛋白变性溶出、多??糖结构改变糊化，使溶液黏度增大，影响细胞破裂，阻碍了黄酮类物质的溶出［５６］，??从而直接影响总黄酮的浸出量
【参考文献】
本文编号：2840603
【学位单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：S571.1
【部分图文】：
Ｆｉｇ．２．１?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｒａｔｉｏ?ｏｆ?ｌｉｑｕｉｄ?ｔｏ?ｓｏｌｉｄ?ｏｎ?ｙｉｅｌｄｓ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ｆｌａｖｏｎｅｓ??２．２．２乙醇体积分数对黄酮提取效果的影响??图２．２为采用不同浓度乙醇提取茶树花总黄酮结果，当乙醇体积分数低于７０％??时，总黄酮的提取量会随着乙醇体积分数的增大而增加，当乙醇的体积分数在??７０％￣８０％时，总黄酮的提取率迗到最高，黄酮属于弱极性化合物，依据相似相??溶原理，易溶于中等或者中等偏弱极性的溶剂中。??１９??
液料比（ｍｌ／ｇ）??０??图２．１液料比对总黄酮提取量的影响??Ｆｉｇ．２．１?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｒａｔｉｏ?ｏｆ?ｌｉｑｕｉｄ?ｔｏ?ｓｏｌｉｄ?ｏｎ?ｙｉｅｌｄｓ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ｆｌａｖｏｎｅｓ??２．２．２乙醇体积分数对黄酮提取效果的影响??图２．２为采用不同浓度乙醇提取茶树花总黄酮结果，当乙醇体积分数低于７０％??时，总黄酮的提取量会随着乙醇体积分数的增大而增加，当乙醇的体积分数在??７０％￣８０％时，总黄酮的提取率迗到最高，黄酮属于弱极性化合物，依据相似相??溶原理，易溶于中等或者中等偏弱极性的溶剂中。??１９??
图２．３提取温度对总黄酮提取量的影响??Ｆｉｇ．２．３?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ?ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ?ｏｎ?ｙｉｅｌｄｓ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ｆｌａｖｏｎｅｓ??图２．３显示，随着提取温度的变化，茶树花提取液中总黄酮呈现出先上升再??下降的趋势，当提取温度从４０°Ｃ到７０°Ｃ，黄酮化合物在乙醇溶液中的浸出量随??着温度的升高而增加，在７０°Ｃ时，总黄酮的提取量最高，为６．８０ｍｇ／ｇ，当温度??超过７０°Ｃ，总黄酮的浸出量随着温度的升高而下降；主要原因是当温度低于７０°Ｃ，??温度升高导致溶液的活度增加，进而增加了溶液的扩散系数［７（１］，促逬更多黄酮??类化合物的溶出，但是当温度高于７（ＴＣ时，随着温度的继续升高，会有部分黄??酮化合物发生降解，与此同时，温度过高导致细胞内的可溶性蛋白变性溶出、多??糖结构改变糊化，使溶液黏度增大，影响细胞破裂，阻碍了黄酮类物质的溶出［５６］，??从而直接影响总黄酮的浸出量
【参考文献】
相关硕士学位论文 前3条
1 王华清;茶叶籽中黄酮类化合物的分离鉴定及其抗氧化活性研究[D];南京师范大学;2012年
2 赵莹;猕猴桃叶总黄酮的提取与纯化研究[D];长安大学;2010年
3 邓红霞;笋壳和竹叶中黄酮类物质的提取研究[D];浙江大学;2002年
本文编号：2840603
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