转TsVP基因棉花磷营养特征的研究
发布时间：2020-12-02 22:33
土壤中存在各种金属离子如Ca2+、A13+、Fe2+,它们可与磷酸根离子形成难溶性磷酸盐,不能直接被棉花吸收利用,土壤中有效磷的缺乏已成为影响棉花产量增加的重要因素。本工作所用TsVP基因为实验室从盐芥（Thellungiella salsugineo）中克隆,Ts VP基因编码的蛋白是液泡氢离子焦磷酸酶（Vacuolar H+-PPase）,其可以通过水解胞内代谢过程产生的PPi将H+泵入植物液泡里面,从而起到维持液泡和细胞间H+梯度的作用。以转Ts VP基因棉花T8-3、T18-3、T18-8为材料,利用沙培、水培、土培的方法,研究了转TsVP棉花与鲁棉研21号对照在低磷胁迫下的磷营养特征,评价转Ts VP棉花在耐低磷育种中的应用潜质。在沙培实验中,转7sVP基因棉花T8-3、T18-3、T18-8及对照鲁棉研21号分别播种在足磷（123.88 mg/kg）、低磷（12.38 mg/kg）和 A1-P（AIP04）、Ca-P（Ca3（P04）2）、Fe-P（FePO4 4H20）五种不同磷处理的沙子中。足磷处理为每天浇灌一次完全霍格兰营养液,低磷及其他磷源处理浇灌去除磷元素的霍格兰...
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２．１植物表达载体｜ｉＣＡＭＢｌＡＩ３００－７：ｖ〖７Ｗ．ｓ？的Ｔ－ＤＮＡ区图谱??
３．１．１转尸基因棉花的ＰＣＲ分析??野生型对照植株未检测出基因，转基因棉花检测出乃丨／／５基因扩增条??带（６５４ｂｐ）（图３－１Ａ）。野生型对照植株未检测出Ａ基因，转基因棉花检测出此??基因扩增条带（ＵＯＯｂｐ）（图３－１Ｂ）。结果表明０的基因乃仲和选择标记基因此转??入到棉花基因组。??＼?Ｍ?Ｐ?ＷＴ?１２?３?４?５??ｉｎｏｏｉｒ??ｇ?Ｍ?Ｐ?ＷＴ?１?２?３?４?５??：〇〇ｎｂ！＞??ｌＯＯＯｂｐ??％?＾?ｍ??２５０ｂｐ?Ｉ?１１１??图３－１转７：ｖＫＰ棉花的ＰＣＲ检测电泳图??Ａ目的基因７ＳＦＰ?ＰＣＲ的电泳图；Ｂ选择标记基因ａｆｃ?ＰＣＲ的电泳图；Ｍ：?ＤＬ２０００?ＤＮＡ?ｍａｒｋｅｒ：??Ｐ：质粒ＤＮＡ；?ＷＴ：野生型对照（Ｌ２１）；卜５：转７ＳＦＰ基因棉花。??３．２转基因棉花难溶性磷活化能力分析??３．２．１不同磷源供给下植株的生物量和根冠比??在ＳＰ条件卜，野生型冠部生物量为３．４２ｇ，转基因株系Ｔ１８－３、Ｔ８－３、Ｔ１８－８??冠部生物量分别为３．９２ｇ、４．３２ｇ、４．１４ｇ，与野生型相比分别增加了?１４．６１％、２６．３丨％、??２１．０５％；野生型根部生物量为０．９２ｇ，转基因株系Ｔ１８－３、Ｔ８－３、Ｔ１８－８根部生物??量分别为丨．３６ｇ、１．４６ｇ、１．４３ｇ，与野生型相比分别增加了?４７．８２％、５８．６９％、５５．４３％。??２３??
Ａ；ｅｉ部磷含Ｍ：?Ｂ根部磷含鼠；Ｃ植株磷含量；Ｌ２Ｉ为野生型对照；ＴＩ８－３、Ｔ８－３、Ｔ１８－８为??Ｋ万丨７＞坫闪棉花株系：实验测定数据为五次生物学重复的平均值±标准差，“＊”表示同？处??抑策件卜转則＊丨棉花Ｕ野生型相比检验差异显著（Ｐ?＜?０．０５）；?ＤＷ：?ｄｒｙｗｅｉｇｈｔ干重；ＳＰ：??ｓｕｆｆｉｃｉｅｎｔ?ｐｈｏｓｐｈａｔｅ（１０００ｆｉｍｏｌ／ＫＨ２Ｐ〇４）足憐：ＬＰ：?ｌｏｗ?ｐｈｏｓｐｈａｔｅ（５ｆｉｍｏｌ／ＫＨ２Ｐ〇４）低隣；Ｃａ－Ｐ：??难溶性钙磷；Ａｌ－Ｐ：难溶性铝磷；Ｆｅ－Ｐ：难溶性铁磷。??在ＳＰ条件下，野生型植株磷含量为Ｉ２６．４２ｍｇ，转基因株系Ｔ１８－３、Ｔ８－３、??ＴＩ８－８植株磷含量分别为丨５４．１２、１６９．５３和１７０．１７ｍｇ，与野生型相比分别增加了??２１．９１％、３４．１０％、３４．６０％。在ＬＰ条件下，野生型植株磷含量为Ｉ２．８４ｍｇ，转基??因株系Ｔ１８－３、Ｔ８－３、Ｔ１８－８植株磷含量分别为２２．１８、１８．１８和１８．０ｌｍｇ，转基因??植株磷含量与野生型相比分别增加了?７２．７４％、４１．６６％、４０．２６°／。。在〇３－卩条件卜＇??野生型植株磷含量为２４．８７ｍｇ，转基因株系Ｔ１８－３、Ｔ８－３、Ｔ１８－８植株磷含量为??５０．０９、５５．１５?和?６４．４２ｍｇ，与野生型相比增加了?１０１．４０％？１５９．０２％。在?ＡＩ－Ｐ?条??件Ｆ，野生型植株磷含量为２７．１３ｍｇ，转基因株系Ｔ１８－３、Ｔ８－３、Ｔ１８－８植株磷含??
【参考文献】：
期刊论文
[1]红麻液泡膜质子泵H+-PPase（Hcvp1）基因的克隆、序列分析和表达[J]. 李辉,李德芳,陈安国,唐慧娟,李建军,黄思齐. 华北农学报. 2017(01)
[2]刚毛柽柳液泡膜H+-PPase基因的克隆与胁迫下的表达分析[J]. 张春蕊,贾园园,王艳敏,王玉成,杨传平,王超. 西北植物学报. 2016(05)
[3]不同油松种源光合和荧光参数对水分胁迫的响应特征[J]. 王琰,陈建文,狄晓艳. 生态学报. 2011(23)
[4]陆地棉耐盐相关基因(GhVP)的克隆及分析[J]. 宋丽艳,叶武威,赵云雷,王俊娟,樊保香,王德龙. 棉花学报. 2010(03)
[5]液相色谱-串联质谱分析盐胁迫下植物激素的含量变化[J]. 卢巧梅,张兰,陈天文,卢明华,陈国南. 中国科学(B辑:化学). 2009(08)
[6]缺磷胁迫对温州蜜柑叶片光合作用的影响[J]. 陈屏昭,陈顺方,刘忠荣,周云,樊钦平. 云南农业大学学报. 2003(02)
博士论文
[1]转betA和TsVP基因提高棉花耐盐、抗旱性的研究[D]. 吕素莲.山东大学 2007
本文编号：2895664
【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２．１植物表达载体｜ｉＣＡＭＢｌＡＩ３００－７：ｖ〖７Ｗ．ｓ？的Ｔ－ＤＮＡ区图谱??
３．１．１转尸基因棉花的ＰＣＲ分析??野生型对照植株未检测出基因，转基因棉花检测出乃丨／／５基因扩增条??带（６５４ｂｐ）（图３－１Ａ）。野生型对照植株未检测出Ａ基因，转基因棉花检测出此??基因扩增条带（ＵＯＯｂｐ）（图３－１Ｂ）。结果表明０的基因乃仲和选择标记基因此转??入到棉花基因组。??＼?Ｍ?Ｐ?ＷＴ?１２?３?４?５??ｉｎｏｏｉｒ??ｇ?Ｍ?Ｐ?ＷＴ?１?２?３?４?５??：〇〇ｎｂ！＞??ｌＯＯＯｂｐ??％?＾?ｍ??２５０ｂｐ?Ｉ?１１１??图３－１转７：ｖＫＰ棉花的ＰＣＲ检测电泳图??Ａ目的基因７ＳＦＰ?ＰＣＲ的电泳图；Ｂ选择标记基因ａｆｃ?ＰＣＲ的电泳图；Ｍ：?ＤＬ２０００?ＤＮＡ?ｍａｒｋｅｒ：??Ｐ：质粒ＤＮＡ；?ＷＴ：野生型对照（Ｌ２１）；卜５：转７ＳＦＰ基因棉花。??３．２转基因棉花难溶性磷活化能力分析??３．２．１不同磷源供给下植株的生物量和根冠比??在ＳＰ条件卜，野生型冠部生物量为３．４２ｇ，转基因株系Ｔ１８－３、Ｔ８－３、Ｔ１８－８??冠部生物量分别为３．９２ｇ、４．３２ｇ、４．１４ｇ，与野生型相比分别增加了?１４．６１％、２６．３丨％、??２１．０５％；野生型根部生物量为０．９２ｇ，转基因株系Ｔ１８－３、Ｔ８－３、Ｔ１８－８根部生物??量分别为丨．３６ｇ、１．４６ｇ、１．４３ｇ，与野生型相比分别增加了?４７．８２％、５８．６９％、５５．４３％。??２３??
Ａ；ｅｉ部磷含Ｍ：?Ｂ根部磷含鼠；Ｃ植株磷含量；Ｌ２Ｉ为野生型对照；ＴＩ８－３、Ｔ８－３、Ｔ１８－８为??Ｋ万丨７＞坫闪棉花株系：实验测定数据为五次生物学重复的平均值±标准差，“＊”表示同？处??抑策件卜转則＊丨棉花Ｕ野生型相比检验差异显著（Ｐ?＜?０．０５）；?ＤＷ：?ｄｒｙｗｅｉｇｈｔ干重；ＳＰ：??ｓｕｆｆｉｃｉｅｎｔ?ｐｈｏｓｐｈａｔｅ（１０００ｆｉｍｏｌ／ＫＨ２Ｐ〇４）足憐：ＬＰ：?ｌｏｗ?ｐｈｏｓｐｈａｔｅ（５ｆｉｍｏｌ／ＫＨ２Ｐ〇４）低隣；Ｃａ－Ｐ：??难溶性钙磷；Ａｌ－Ｐ：难溶性铝磷；Ｆｅ－Ｐ：难溶性铁磷。??在ＳＰ条件下，野生型植株磷含量为Ｉ２６．４２ｍｇ，转基因株系Ｔ１８－３、Ｔ８－３、??ＴＩ８－８植株磷含量分别为丨５４．１２、１６９．５３和１７０．１７ｍｇ，与野生型相比分别增加了??２１．９１％、３４．１０％、３４．６０％。在ＬＰ条件下，野生型植株磷含量为Ｉ２．８４ｍｇ，转基??因株系Ｔ１８－３、Ｔ８－３、Ｔ１８－８植株磷含量分别为２２．１８、１８．１８和１８．０ｌｍｇ，转基因??植株磷含量与野生型相比分别增加了?７２．７４％、４１．６６％、４０．２６°／。。在〇３－卩条件卜＇??野生型植株磷含量为２４．８７ｍｇ，转基因株系Ｔ１８－３、Ｔ８－３、Ｔ１８－８植株磷含量为??５０．０９、５５．１５?和?６４．４２ｍｇ，与野生型相比增加了?１０１．４０％？１５９．０２％。在?ＡＩ－Ｐ?条??件Ｆ，野生型植株磷含量为２７．１３ｍｇ，转基因株系Ｔ１８－３、Ｔ８－３、Ｔ１８－８植株磷含??
【参考文献】：
期刊论文
[1]红麻液泡膜质子泵H+-PPase（Hcvp1）基因的克隆、序列分析和表达[J]. 李辉,李德芳,陈安国,唐慧娟,李建军,黄思齐. 华北农学报. 2017(01)
[2]刚毛柽柳液泡膜H+-PPase基因的克隆与胁迫下的表达分析[J]. 张春蕊,贾园园,王艳敏,王玉成,杨传平,王超. 西北植物学报. 2016(05)
[3]不同油松种源光合和荧光参数对水分胁迫的响应特征[J]. 王琰,陈建文,狄晓艳. 生态学报. 2011(23)
[4]陆地棉耐盐相关基因(GhVP)的克隆及分析[J]. 宋丽艳,叶武威,赵云雷,王俊娟,樊保香,王德龙. 棉花学报. 2010(03)
[5]液相色谱-串联质谱分析盐胁迫下植物激素的含量变化[J]. 卢巧梅,张兰,陈天文,卢明华,陈国南. 中国科学(B辑:化学). 2009(08)
[6]缺磷胁迫对温州蜜柑叶片光合作用的影响[J]. 陈屏昭,陈顺方,刘忠荣,周云,樊钦平. 云南农业大学学报. 2003(02)
博士论文
[1]转betA和TsVP基因提高棉花耐盐、抗旱性的研究[D]. 吕素莲.山东大学 2007
本文编号：2895664
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