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大豆扩展蛋白GmEXLB1磷高效利用功能解析

发布时间:2020-12-19 02:59
  大豆是重要粮食与油料作物,低磷胁迫严重影响其生长发育。根系是植物感应低磷信号最敏感器官,其构型改变是抵御低磷逆境重要途径。扩展蛋白是一类参与植物细胞伸展、调节根系构型重要酶类,在抵御多种逆境胁迫中发挥重要作用。课题组前期从大豆低磷诱导差减文库中获得多个扩展蛋白基因。基于此,本研究利用转录组测序进一步确定扩展蛋白候选基因GmEXLB1,克隆、分析基因时空表达及启动子,明确基因对低磷逆境的响应,并构建载体转化拟南芥,研究GmEXLB1磷高效利用生物学功能,为磷高效分子育种与机制解析提供功能基因。主要结果如下:1.结合低磷诱导差减文库与转录组测序遴选出扩展蛋白GmEXLB1:利用磷高效大豆低磷诱导差减文库,结合低磷处理下的转录组数据,筛选出扩展蛋白候选基因GmEXLB1,该基因在大豆侧根低磷处理28 d~70 d高效表达,且以处理49 d表达量最高;克隆基因发现,开放阅读框744 bp,编码247个氨基酸残基,含4个外显子、3个内含子,具有植物扩展蛋白特有保守结构域,与其它扩展蛋白具有较高同源性。2.结合基因时空表达与启动子分析明确了GmEXLB1对低磷逆境的响应:利用实时定量分析磷高效种质... 

【文章来源】:河北农业大学河北省

【文章页数】:51 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

大豆扩展蛋白GmEXLB1磷高效利用功能解析


不同低磷处理时间大豆扩展蛋白基因转录组数据分析

转录组,蛋白基因,组织部,大豆


图 2 不同组织部位大豆扩展蛋白基因转录组分析Figure 2Analysis of transcriptome data of soybean expansin genes in different tissues蛋白 GmEXLB1 表达与生物信息学分析扩展蛋白 GmEXLB1 的克隆述筛选的大豆扩展蛋白基因 Glyma.17g147500 为参考序列,设”低磷处理下 cDNA 为模板,经 PCR 扩增获得大小约 750bp 目该目的条带,经连接 pMD19-T 载体、测序分析,获得目的基因 744 bp,将其命名为 GmEXLB1。

序列,大豆,蛋白,条带


以“中黄 15”低磷处理下 cDNA 为模板,经 PCR 扩增获得大小约 750bp 目的条带(图3),回收该目的条带,经连接 pMD19-T 载体、测序分析,获得目的基因开放阅读框序列,长度 744 bp,将其命名为 GmEXLB1。


本文编号:2925125

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