水稻叶片蛋白质组提

发布时间：2020-12-31 03:16

　　蛋白质组学是连接基因组学、遗传学和生理学的一门学科,目前已成为研究生物科学各个领域的必不可少的学科。在蛋白质组学研究中,蛋白质的提取、分离及低丰度蛋白的富集等步骤直接影响后续的蛋白质鉴定结果。低丰度蛋白质是植物体中重要的活性物质,参与新陈代谢、转录和翻译等多种生理及病理过程,低丰度蛋白的富集对植物蛋白质组学的研究具有重要意义。高丰度蛋白与低丰度蛋白之间的动态范围可达到12个数量级,导致了对低丰度蛋白质检测困难。组合肽配体库技术是一种新型的富集低丰度蛋白的方法,能够实现在降低高丰度蛋白质丰度的同时富集低丰度蛋白质,目前已被应用于各领域的蛋白质组学研究中。本论文对水稻叶片蛋白质组提取、分离与富集技术进行研究,为水稻蛋白质组研究提供了技术支撑,为深入研究水稻蛋白质组提供了理论基础。1、确立了酚法提取、二维液相色谱分离水稻叶片蛋白质组的方法。此提取方法为后续蛋白质的富集研究提供了技术支撑。比较了水稻叶片蛋白质提取方法(酚法、十二烷基硫酸钠法(SDS法)和三氯乙酸/丙酮法(TCA/丙酮法))、液相色谱分离系统(一维液相色谱与二维液相色谱)对蛋白质鉴定数量的影响。结果表明:二维液相色谱条件下,酚法... 

【文章来源】：中国农业科学院北京市

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

实验流程示意图

学院硕士学位论文 第二章 基于酚法提取和二维液相分离的水稻蛋白质组谱系统提供的峰容量和分辨率难以满足高效分离的要求(李笃信, 2011)，而二维液对肽段混合物进行 2 次分离，大大提高了系统分辨率和峰容量(李晓龙, 2010 ; 刘效的降低了样品的复杂程度，有利于低丰度蛋白的检测(Kilambi et al, 2016 ; 刘

14(a) (b) (c)图 2.3 不同提取方法提取的蛋白质在一维液相色谱和二维液相色谱条件下鉴定到的蛋白质数目比较注：(a)、(b)、(c) 分别代表酚法、SDS 法和 TCA/丙酮法；小圆代表一维液相色谱，大圆代表二维液相色谱Fig. 2.3 Comparison of the number of proteins separated by 1D LC and 2D LC following extraction with threedifferent methodsNote: (a)、(b)、(c) represent phenol method, SDS method and TCA/acetone method respectively; smaller circle represents 1-D LC(one-dimensional liquid chromatography), larger circle represents 2-D LC (two-dimensional liquid chromatography)


本文编号：2948849