盐胁迫下弯曲芽孢杆菌KLBMP 4941对中华补血草的促生效应及其根际互作机理初步研究

发布时间：2021-01-12 20:08

　　土壤盐渍化严重影响了植物的正常生长,危害了我国的生态环境及农业的发展,严重影响农作物的产量。前期课题组发现一株盐生植物中华补血草内生弯曲芽孢杆菌KLBMP 4941,通过组培方式能促进宿主植物生长。因此本论文围绕盐胁迫下内生细菌KLBMP 4941如何促进宿主植物中华补血草生长以及根际定殖相互作用的机理进行研究,开展盆栽实验,对补血草生理特征的影响及KLBMP494全基因组的解析,以及盐胁迫下根系分泌物介导的中华补血草与KLBMP4941相互作用的研究,取得了以下的结果:1、我们采用了前期验证的对植物促生效果较好的内生菌KLBMP 4941为研究对象,用200 mM NaCl对接菌KLBMP 4941和未接菌的中华补血草处理,研究KLBMP 4941对中华补血草促生作用与相关机制。结果表明在盐胁迫下,接菌的中华补血草在根长、茎长及鲜重上比未接菌的要明显提高;对离子含量测定,接菌后的叶片中Na⁺浓度比对照组降低,提高了K⁺/Na⁺比;且KLBMP 4941能够促进植物叶片内脯氨酸的含量;接菌后的植物体内抗氧化酶活性如SOD... 

【文章来源】：江苏师范大学江苏省

【文章页数】：101 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
第一章 引言
    1.1 土壤盐渍化及盐生植物
        1.1.1 土壤盐渍化的影响
        1.1.2 土壤盐渍化改良
        1.1.3 中华补血草
    1.2 植物根际促生菌的研究
        1.2.1 PGPR的作用
        1.2.2 PGPR类群
        1.2.3 耐盐植物的PGPR
    1.3 PGPR提高植物耐盐性的主要机理
        1.3.1 影响植物的渗透调节
        1.3.2 影响植物的光合作用
        1.3.3 抗氧化系统的改变
+/Na⁺比值">        1.3.4 改变离子含量及K⁺/Na⁺比值
    1.4 植物促生菌的根际定殖及其与植物的根际相互作用
        1.4.1 根际定殖及影响因素
        1.4.2 根际定殖的检测手段
    1.5 根系分泌物
        1.5.1 根系分泌物的概念与种类
        1.5.2 根系分泌物对微生物的影响
        1.5.3 根系分泌物介导的植物-微生物互作的的分子机理
        1.5.4 微生物对植物根系分泌物的影响
    1.6 研究内容、意义及创新点
        1.6.1 研究内容
        1.6.2 研究意义
        1.6.3 创新点
        1.6.4 技术路线路线图路线图
第二章 盐胁迫下弯曲芽孢杆菌KLBMP4941对中华补血草的促生作用的研究
    2.1 材料与方法
        2.1.1 试验材料
        2.1.2 试验设计
        2.1.3 生理指标的测量
        2.1.4 丙二醛（MDA）含量的测定
        2.1.5 叶绿素含量的提取
        2.1.6 抗氧化酶含量的测定
        2.1.7 脯氨酸含量测定
        2.1.8 离子含量测定
    2.2 结果与分析
        2.2.1 生理指标测定结果
        2.2.2 丙二醛（MDA）测定结果
        2.2.3 叶绿素含量测定结果
        2.2.4 抗氧化酶活性测定结果
        2.2.5 脯氨酸含量测定
        2.2.6 离子含量测定结果
    2.3 本章小结
第三章 弯曲芽孢杆菌KLBMP4941的全基因组解析
    3.1 材料与方法
        3.1.1 菌株来源
        3.1.2 主要设备
        3.1.3 基因组DNA提取
        3.1.4 16SrRNA基因PCR扩增
        3.1.5 构建菌株的系统发育树
        3.1.6 测序及拼接组装
        3.1.7 基因组组分分析及基因注释
    3.2 结果与讨论
        3.2.1 KLBMP4941系统发育树构建结果
        3.2.2 基因组拼接组装及分析
        3.2.3 基因功能注释
    3.3 本章小结
第四章 菌株KLBMP4941在宿主根际的定殖研究
    4.1 材料与方法
        4.1.1 主要试剂与仪器
        4.1.2 试验材料
        4.1.3 PHT43-GFP载体制备
        4.1.4 PHT43-GFP转化到大肠杆菌DH5α
        4.1.5 菌落PCR
        4.1.6 筛选阳性克隆送样测序及酶切验证
        4.1.7 菌株KLBMP4941原生质体转化法
        4.1.8 菌落观察及GFP基因检测
        4.1.9 菌株4941-GFP的质粒稳定性检测
        4.1.10 野生菌株KLBMP4941与4941-GFP生长曲线的比较
        4.1.11 菌株4941-GFP在补血草根际定殖的观察
    4.2 结果与分析
        4.2.1 PHT43-GFP构建的结果
        4.2.2 4941-GFP构建的结果
        4.2.3 4941-GFP中的质粒稳定性测定
        4.2.4 野生型KLBMP4941和4941-GFP的生长曲线比较
        4.2.5 4941-GFP在中华补血草根部的定殖研究
    4.3 本章小结
第五章 盐胁迫下中华补血草根系分泌物与菌株KLBMP4941互作机理
    5.1 材料与方法
        5.1.1 主要试剂与仪器
        5.1.2 试验材料
        5.1.3 盐胁迫下中华补血草根系分泌物的收集
        5.1.4 根系分泌物的鉴定及分析
        5.1.5 根系分泌物粗提物及主要成分单体对KLBMP4941生长量的影响
        5.1.6 根系分泌物及主要成分单体对KLBMP4941趋化作用的影响
        5.1.7 根系分泌物主要成分单品对KLBMP4941游动的影响
        5.1.8 根系分泌物及主要成分对KLBMP4941根际定殖的影响
        5.1.9 样品处理和菌株RNA提取
        5.1.10 转录组测序
        5.1.11 表达差异基因分析及功能注释
    5.2 结果与分析
        5.2.1 根系分泌物粗提物对KLBMP4941生长量的影响
        5.2.2 根系分泌物粗提物对KLBMP4941趋化作用的影响结果分析
        5.2.3 盐胁迫下中华补血草根系分泌物成分的分析
        5.2.4 根系分泌物主要单体成分对KLBMP4941生长量的影响
        5.2.5 根系分泌物主要单体成分对KLBMP4941趋化作用的影响结果分析
        5.2.6 根系分泌物主要成分单品对KLBMP4941游动作用的结果分析
        5.2.7 根系分泌物及主要成分单品对KLBMP4941根际定殖的影响
        5.2.8 测序数据及其质量控制的实验结果
        5.2.9 差异表达分析
        5.2.10 两组显著性差异表达基因的整体分类
        5.2.11 两组显著性差异表达基因具体分析
        5.2.12 GO功能分类
        5.2.13 KEGG代谢途径分类
        5.2.14 QRT-PCR结果
    5.3 本章小结
第六章 总结与展望
参考文献
致谢
作者简历
学位论文数据集


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：2973466