玉米转基因成分筛查策略

发布时间：2021-03-08 12:27

　　本研究通过查阅相关数据库中转基因玉米品系中的常用遗传转化载体中含有的调控元件和标记基因,并结合目前国内外现有转基因检测标准方法,建立了基于P-CaMV 35S、T-NOS、Bar基因、Pat基因、Cp4-epsps基因、NPTⅡ基因、cry1A基因、P-Rice actin、phy结构特异性片段等9种元件/基因实时荧光PCR方法的玉米转基因筛查策略,并对32种转基因玉米进行筛查实验测试,结果表明本筛查策略可覆盖30种独立性状转化体。同时还构建了包含玉米内标基因及9种目标元件/基因序列的质粒分子,经过验证该质粒分子具有良好的可替代性,可作为阳性对照与本检测方法配套使用。 

【文章来源】：生物技术通报. 2020,36(05)北大核心

【文章页数】：9 页

【部分图文】：

玉米转基因成分筛查阳性质粒pYMSC-1905图谱

截止2019年11月,我国对植酸酶玉米BVLA430101发放了生产用安全证书,并且对20种国外玉米转化体发放了进口用作加工原料安全证书,其中包括本次实验未参与验证的Bt11 X GA21,这21种转化体中除DAS-40278-9外均可以被本方法覆盖。图3 阳性质粒分子实时荧光PCR验证信号

图2 阳性质粒分子3D-d PCR验证荧光信号在转基因作物的研发过程中,为使外源基因适合在宿主植物中进行表达,经常需要根据宿主密码子的偏好对目标元件的密码子进行修饰,从而造成相同名称的基因不一定具有完全相同的核苷酸序列。因此,在设计检测方法时必须考虑同名的基因元件其DNA序列是否有差异,检测靶标在不同转化事件中是否一致,能否用同样的引物进行检测。

【参考文献】：
期刊论文
[1]CaMV35S启动子及其在转基因作物中的应用和检测[J]. 汤婷,谢实龙,祝旋,徐俊锋,唐俊,汪小福.  浙江农业学报. 2019(01)
[2]2017年全球生物技术/转基因作物商业化发展态势[J]. International Service for the Acquisition of Agri-biotech Applications;.  中国生物工程杂志. 2018(06)
[3]转基因产品成分检测技术研究进展[J]. 王颢潜,陈锐,李夏莹,王梦雨,刘鹏程.  生物技术通报. 2018(03)
[4]利用实时荧光PCR快速筛查玉米中转基因成分[J]. 张海波,刘冰,杨娟妮,张田,张英.  西北农业学报. 2017(06)
[5]环介导等温扩增法检测6种转基因大豆[J]. 周杰,黄文胜,邓婷婷,吴亚君,胡秋辉,陈颖.  农业生物技术学报. 2017(02)
[6]玉米中转基因成分筛查策略[J]. 张海波,张英,刘冰,杨娟妮,陈西,张田.  西北农业学报. 2015(12)
[7]转基因植物中CaMV35S和tNOS元件的4种定性PCR检测方法的比较[J]. 徐俊锋,王鹏飞,李玥莹,汪小福,陈笑芸,彭城,缪青梅.  农业生物技术学报. 2015(03)
[8]转基因玉米种子快速筛查方法研究与应用[J]. 吴明生,云晓敏,宋歌,牛茜,彭瑞迪.  生物技术通报. 2013(01)



本文编号：3071046