花椒几丁质酶基因ZaCHIT1克隆及表达分析

发布时间：2021-03-27 01:36

　　花椒（Zanthoxylum bungeanum Maxim）作为我国常用的药为食两用作物,具有较高的生态价值和经济价值。花椒本身具有抗菌和杀虫的功效,植物几丁质酶基因在植物抗逆防御病害反应中发挥重要作用,但该基因在花椒中尚未有人克隆,本研究在实验室构建的朝仓花椒转录组库的基础上,以花椒嫩芽为材料,克隆ZaCHIT1-like基因全长编码序列,并检测了ZaCHIT1-like基因在花椒叶、茎、果实等器官中的表达水平。研究结果如下:提取朝仓花椒嫩芽的总mRNA,采用RACE技术克隆了朝仓花椒ZaCHIT1-like基因中的5’-RACE片段1080 bp和3’-RACE片段896 bp,将RACE扩增片段拼接并重新设计cDNA全长序列引物进行扩增,得到了1373 bp的ZaCHIT1-like基因的cDNA全长序列。ZaCHIT1-like基因CDS全长序列为969 bp。经过BLASTp比对,发现ZaCHIT1-like与克莱门柚（Citrus clementina）、土瓶草（Cephalotus follicularis）CHIT序列同源性分别为88%和81%;功能结构域分析预测,该... 

【文章来源】：贵州大学贵州省 211工程院校

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

通用引物GSPs及其扩增产物与cDNA模板的关系

230=1.90，说明所提取的 RNA 质量符合 RACE 扩增的要求。图2.2 花椒总RNA提取Figure2.2 Total RNA isolated from Zanthoxylum piperitum DC.

贵州大学硕士毕业论文3.1.2 ZaCHIT1-like 基因的 5’、3’RACE 克隆结果使用通用引物 UPM 分别与 ZaCHI-5 和 ZaCHI-3 与组合进行 5’-RACE 和PCR 扩增，随后将所得扩增产物使用 1.0 %琼脂糖凝胶进行电泳检测，并对其测序结果显示 5’-RACE 扩增条带大小为 1080 bp，3’-RACE 扩增条带测序结bp(见图 2.9 A)。5’-RACE 扩增产物与 3’-RACE 扩增产物产物有 603 bp 重复区region)，与设计相符。

【参考文献】：
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本文编号：3102626