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菘蓝果实发育调控基因表达模式分析及果实开裂关键基因IiSHP2功能研究

发布时间:2021-03-28 10:55
  本工作系统分析了六个果实发育调控基因在菘蓝中的表达模式,并对果实开裂关键基因IiSHP2进行了功能研究。通过克隆、多重序列比对和蛋白质建模分析表明,菘蓝Ii SHP1、IiSHP2、Ii AG和Ii FUL都是典型的MIKC型MADS-box转录因子。Ii ALC和Ii IND是典型的b HLH家族转录因子。进化树的构建进一步阐述了这六个菘蓝果实发育基因与其同源基因间的进化关系。通过q RT-PCR表达模式分析发现,Ii SHP1、IiSHP2和Ii IND仅在菘蓝果实的果皮中表达,而Ii AG、Ii FUL和Ii ALC在果皮区域内和果翅中都可以表达。基因组序列克隆及分析发现IiSHP2的基因组序列由7个外显子、6个内含子以及转录起始位点上游的2100bp调控序列构成。它与5’非翻译区共同构成2502bp启动子序列。启动子序列中仅含有3个CAr G元件。亚细胞定位结果表明,IiSHP2定位在细胞核中,进一步证实该蛋白是一个MADS-box转录因子。为了研究菘蓝IiSHP2基因的功能,本工作通过农杆菌介导的遗传转化技术制备了35S::IiSHP2过表达拟南芥株系和At2056pro::... 

【文章来源】:西北大学陕西省 211工程院校

【文章页数】:102 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

菘蓝果实发育调控基因表达模式分析及果实开裂关键基因IiSHP2功能研究


拟南芥长角果的结构[54]

示意图,载体,方法,示意图


第二章菘蓝果实发育调控基因的进化与表达模式13抗性克隆进行培养,菌落PCR检测后送生工生物工程股份有限公司测序。对测序结果进行电子拼接,最终得到基因的编码序列。表2.1基因克隆引物Table2.1primersusedforgenecloning图2.1pMD18-T载体结构和克隆方法示意图Fig.2.1StructureofpMD18-Tvectorandschematicdiagramofcloningmethod引物名称引物序列5’→3’IiAG-Clone-FATGGGGACCTTCCATTTTCTGIiAG-Clone-RTTACACCAACTGAAGAGCGGTIiALC-Clone-FATGGGTRATTCYGAYGWMGGTIiALC-Clone-RTCAAAGCAGAGTGGYTGTGGRAIiIND-Clone1-FCATGCAGCCMGTAGACATCGAIiIND-Clone1-RGAGGTTGTGGTAATAACAAAGGIiIND-Clone2-FATGGAGCCTCATCATCTCCTCATGAATIiIND-Clone2-RYYAGSTWTSSGAGTTGTGGTAATAATGIND-5"RACEGAGGGTCGTCGCTTACCCTTACGTTACIND-3"RACETCAGCTTGGAGATCCTATCCCTGACCCTTCIiSHP1-Clone-FATGGAKGAARGTGGGAGTAGYAGTAGCIiSHP1-Clone-RYYAAACAAGCTGAAGAGGAGGTTGGTC

方框图,菘蓝,角果,器官


西北大学硕士学位论文162.2D)。通过石蜡切片对菘蓝短角果的横切面进行观察,结果显示只有在维管束中可以看到木质化细胞,果脉区没有木质化层(图2.3)。图2.2菘蓝的花器官和果实Fig.2.2FloralorgansandfruitofwoadA,菘蓝的四轮花器官;B,菘蓝的短角果,C,菘蓝短角果的顶部结构;D,菘蓝短角果的下部结构,粉色方框内部为果皮和开裂区,外部为果翅。标尺=1mm。Sepal,萼片;Petal,花瓣;Stamen,雄蕊;Pistil,雌蕊;Silicle,短角果;Stigma,柱头;Fruitvein,果脉;Valve,果皮;Fruitwing,果翅。

【参考文献】:
期刊论文
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博士论文
[1]拟南芥和菘蓝SEP3基因不同剪接本以及菘蓝IiSEP1和IiSEP2基因功能研究[D]. 马燕勤.西北大学 2019
[2]大豆MADS-box基因家族成员的鉴定及GmAP1和GmSHPa基因的功能研究[D]. 迟英俊.南京农业大学 2011

硕士论文
[1]菘蓝IiFUL和IiSHP2基因的克隆及功能研究[D]. 李典珍.西北大学 2017



本文编号:3105436

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