利用RNAi方法构建MS26基因雄性不育植物表达载体及农杆菌介导玉米遗传转化研究

发布时间：2021-08-31 05:53

　　应用RNAi技术创制了花粉彻底败育的玉米雄性不育株系,为玉米杂交制种提供雄性不育的基础材料。构建玉米MS26 RNAi植物表达载体,其中,以玉米综31未成熟的幼胚组织为受体,利用农杆菌介导法将目的基因定向转入到玉米中,以甘露糖为选择剂进行筛选获得能够稳定遗传的转基因植株。通过Taqman探针法进行分子检测,获得18株单拷贝T0代转基因植株,碘-碘化钾染色分析结果显示,12株完全不育。在田间试验中,5个转化事件的所有T1代转基因植株在散粉期都表现雄性不育,且除此之外与野生型玉米对照植株之间没有其他形态不同。实时定量PCR结果显示,MS26 RNAi转基因玉米植株中MS26基因的表达量显著下调,由此可推断,MS26 RNAiT-DNA已经整合到玉米基因组中,并能引起完全的雄性不育。 

【文章来源】：玉米科学. 2020,28(04)北大核心CSCD

【文章页数】：8 页

【部分图文】：

MS26基因结构及RNAi片段选择示意

转MS26 RNAi基因玉米的特异引物的PCR鉴定

转基因和非转基因的雄穗对比图

【参考文献】：
期刊论文
[1]抑制ZmCol3基因表达调控玉米开花期[J]. 贾伟,尹悦佳,柳青,刘洋,李楠,果天宇,郝东云,刘相国.  玉米科学. 2017(06)
[2]玉米雄性不育基因Zmms1的同源克隆及生物信息学分析[J]. 吕庆雪,高嵩,孙蕾,张志军,张建新,王敏,宋广树,刘文国.  玉米科学. 2018(02)
[3]玉米开花期性状的QTL及杂种优势位点定位[J]. 杨慧丽,林亚楠,张怀胜,卫晓轶,丁冬,薛亚东.  作物学报. 2017(05)
[4]空间环境诱发玉米细胞质雄性不育突变体的遗传分析[J]. 张采波,袁国钊,汪静,潘光堂,荣廷昭,曹墨菊.  遗传. 2011(02)
[5]紫花苜蓿光敏色素B基因片段克隆及RNA干扰表达载体的构建[J]. 朱见明,严学兵,史莹华,王成章.  作物学报. 2011(02)
[6]鸭梨α-法尼烯合成酶基因双链RNAi表达载体的构建[J]. 陈新,刘庆忠,李杨昕,吕慧贞,梁雅芹,张士刚,邵建萍,张元湖.  生物技术通讯. 2007(05)
[7]应用RNA干扰技术降低玉米支链淀粉含量[J]. 柴晓杰,王丕武,关淑艳,徐亚维.  植物生理与分子生物学学报. 2005(06)
[8]利用 RFLP、SSR、AFLP和 RAPD标记分析玉米自交系遗传多样性的比较研究[J]. 袁力行,傅骏骅,Warburton M,李新海,张世煌,Khairallah M,刘新芝,彭泽斌,李连城.  遗传学报. 2000(08)



本文编号：3374328