利用TALEN技术定点突变水稻DST基因

发布时间：2021-09-22 10:30

　　水稻的耐盐碱性质一直是各大育种科学家们研究的重点之一。本研究利用类转录激活因子效应物核酸酶（Transcription activator-like effector nuclease,TALEN）介导的基因组定点突变技术,以优良的粳稻品种空育131为改良对象,通过失活该材料DST基因,增强其耐盐碱性质。具体结果如下:1、成功构建了具有基因组定点突变功能的TALEN载体。2、通过农杆菌介导转化的方法,对水稻DST基因靶位点进行定点突变。通过对转基因位点PCR检测、Southern印记杂交分析;对DST基因靶位点的尿素-聚丙烯酰胺凝胶电泳、测序分析,共获得2株DST基因靶位点片段缺失的阳性T₀代转基因植株,阳性转化率为1.16%。3、阳性转基因植株加代纯合后,对T₂代植株进行盐碱胁迫,通过表型分析,以及生理生化指标的测定,发现阳性转基因植株的盐碱耐受性确实比野生型对照植株高,也就是产生了耐盐碱性质。4、大田种植,调查T₂代植株与对照植株的农艺性状差异,结果表明,除了耐盐碱性质显著增强外,T₂代植株的各... 

【文章来源】：黑龙江大学黑龙江省

【文章页数】：82 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

DST基因结构（引自Huang）

TALEN蛋白切割修复原理（引自张金脉）

空育131Figure2-1Kongyu131

【参考文献】：
期刊论文
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[2]斑马鱼socs2的TALEN敲除及其敲除胚胎的生长研究[J]. 王华林,朱作言,孙永华.  水生生物学报. 2015(04)
[3]应用TALEN技术敲除gata4基因建立斑马鱼先天性心脏病模型[J]. 刘静,何嘉玲,暴国,李楠,王天奇,张长勇,孙德明.  中国比较医学杂志. 2015(04)
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[7]“分子剪刀”TALEN技术简介[J]. 麻智春.  生物学教学. 2014(03)
[8]DNA剪刀——TALEN和CRISPR/Cas[J]. 倪培凌,刘畅,陈凌懿.  中国细胞生物学学报. 2014(01)
[9]基因定点突变技术简介[J]. 胡文斌.  生物学教学. 2013(12)
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本文编号：3403610