转基因玉米MIR604基体标准物质研制

发布时间：2021-09-24 04:32

　　转基因生物安全监管是生物技术产业健康发展的保障,而转基因检测标准物质是进行转基因监管检测的物质基础,缺少标准物质就难以保证检测数据的准确性、可靠性和可比性。转基因玉米MIR604是我国批准进口用作加工原料的转基因品种,对其安全监管亟须制备标准物质。本项目通过对转基因玉米MIR604种子进行原材料鉴定、研磨、过筛、含水量测定等步骤,制备出转基因玉米MIR604纯品基体标准物质。均匀性检验和稳定性检验结果表明,本批标准物质在瓶内和瓶间均具有良好的均匀性,可在常温下运输1个月,长期稳定性达到6个月,量值稳定。本批标准物质的特性量值为转基因DNA与总DNA的拷贝数比值,由9家实验室采用MIR604/Adh1二重数字PCR联合定值,量值为0.50。充分评估了标准物质定值结果的各个不确定度分量,合成扩展不确定度为0.06 （copy/copy）。本批标准物质规格为1 g瓶–1,使用时最小取样量为100 mg,可用于转基因玉米MIR604的安全监管和定量标识、以及实验室质量控制等领域。 

【文章来源】：作物学报. 2020,46(04)北大核心CSCD

【文章页数】：11 页

【部分图文】：

鉴定转基因种子基因型的原理示意图

杂合种子的扩增曲线图

将转基因玉米MIR604种子粉末在混匀机中混匀。混匀过程中每隔3 h取样一次,共取样4次。每次选不同的部位取样,取9份,每份100 mg。提取样品的基因组DNA,采用表1中MIR604转化体和玉米内标基因Adh1特异性引物探针进行荧光定量PCR扩增。以基因型鉴定的纯品MIR604基因组DNA作为标准品,绘制标准曲线。依据标准曲线计算样品的转基因含量(转基因和内标基因拷贝数比值)。采用方差分析法检验数据,检验结果表明,从不同位置抽取的样品其量值均在0.45～0.55的区间内波动,没有明显差异(图3),均匀性良好,且不随混匀时间的长短发生变化,表现出良好的稳定性。2.2.4 分装和保存

【参考文献】：
期刊论文
[1]转基因作物发展及应用概述[J]. 沈平,武玉花,梁晋刚,卢新,章秋艳,王颢潜,刘鹏程.  中国生物工程杂志. 2017(01)
[2]转基因产品检测标准物质的定值和不确定度研究进展[J]. 张丽,吴刚,武玉花,沈平,宋贵文,周云龙.  农业生物技术学报. 2014(03)



本文编号：3407102