玉米早期籽粒中强表达启动子的筛选

发布时间：2021-10-13 07:51

　　在植物基因表达调控的过程中,启动子作为调控基因表达的顺式元件起着重要作用。为了筛选在玉米早期籽粒中强表达的启动子,选取6个启动子pCaMV35SD、pUbiquitin、pZmActin1、pZmSTK2、pZm66589和pZmbHLH148,分别构建EGFP表达载体并转染玉米原生质体,快速验证载体功能构建的正确性;同时采用花粉磁转染法将6个表达载体导入玉米自交系郑58中,并对不同启动子驱动的EGFP载体在授粉后48h玉米籽粒中的荧光强度和荧光检出率进行观察和统计分析。结果表明,6个启动子驱动EGFP表达载体构建正确;pCaMV35SD启动子驱动EGFP表达载体的荧光最强,6个启动子驱动EGFP表达载体由强到弱依次为pCaMV35SD>pZmSTK2>pZm66589>pZmbHLH148>pUbiquitin>pZmActin1,其荧光检出率分别为27.17%、27.17%、29.83%、23.84%、13.40%和30.57%。 

【文章来源】：作物杂志. 2020,(04)北大核心

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

6个启动子-EGFP表达载体构建流程图

分别取6个启动子-EGFP载体转染玉米自交系郑58，并在自交系郑58授粉后48h取早期籽粒进行荧光观察。由图4可见，p Ca MV35SD在郑58早期籽粒中荧光表达量最强；6个启动子驱动EGFP表达由强到弱依次为pCaMV35SD>pZmSTK2>p Zm66589>p Zmb HLH148>p Ubiquitin>p Zm Actin1。2.4 转染6个EGFP载体的郑58籽粒在授粉后48h的荧光检出率统计

启动子是产生m RNA和预期转基因产物的必要条件，在玉米转基因产品研究中必不可少。不同启动子在不同物种、不同组织中表达水平不一样。玉米磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶PEPC基因的启动子在叶肉细胞中高度活跃[24]；在玉米和烟草中，Zm Hy PRP基因启动子在转基因植株中表现出胚特异性表达，但在玉米中的活性要低于烟草[25]；玉米Zpu1基因启动子在转基因烟草中也显示出胚特异性表达[26]。双SUMO蛋白的基因启动子Zm DSUL被证明在卵细胞和受精卵中均可检测到其转录本[27]。启动子具有物种和组织特异性，筛选在特定组织中表达较强的启动子，对于后续基因功能研究至关重要。图4 不同启动子驱动EGFP在郑58早期籽粒中的瞬时表达情况

【参考文献】：
期刊论文
[1]植物组织特异性启动子研究进展[J]. 焦勇,柳小庆,江海洋,陈茹梅.  中国农业科技导报. 2019(01)
[2]植物逆境相关启动子及功能[J]. 朱丽萍,于壮,邹翠霞,李秋莉.  遗传. 2010(03)
[3]我国玉米育种科技创新问题的几点思考[J]. 戴景瑞,鄂立柱.  玉米科学. 2010(01)
[4]玉米Ubiquitin启动子的克隆及功能鉴定[J]. 王昌涛,梁粤,王欢,张宝石,赵琦,张世煌.  沈阳农业大学学报. 2006(01)
[5]高等植物启动子功能和结构研究进展[J]. 夏江东,夏平.  楚雄师范学院学报. 2005(03)



本文编号：3434252