野生黑果枸杞再生体系建立与染色体加倍
发布时间：2021-11-11 12:32
黑果枸杞（Lycium ruthenicum Murr）为茄科枸杞属落叶小灌木。在中国主要分布于新疆、宁夏、西藏、甘肃、青海、和内蒙等地区,是一种富含各种营养成分,具有较高的营养价值及药用价值的野生植物。为解决采摘困难、果实产量低等黑果枸杞产业发展限制条件,为我国农业及环境问题提供有价值的资料,本研究分别以格尔木黑果枸杞一年生枝条和种子无菌苗为外植体,分别建立离体培养生再体系,比较两种外植体选择适宜度,旨在为黑果枸杞的离体培养技术方向开拓思路,为黑果枸杞种质资源的挖掘与保存提供参考依据。同时,利用该品系种子为供试材料,用秋水仙素进行染色体加倍试验,以期获得多倍体（四倍体）植株,并采用形态学、细胞学及流式细胞术等多种染色体鉴定法鉴定染色体倍性（四倍体）,为该品系黑果杞种质创制、资源合理利用建立理论与实践依据。研究结果如下:（1）黑果枸杞一年生茎段做为外植体消毒最佳方式为75%乙醇溶液浸泡1min～2min,再用8%的次氯酸钠溶液浸泡12min。（2）愈伤组织培养基为MS+6-BA0.5mg/L+IBA0.5mg/L,出愈率为94.89%;愈伤组织增殖培养基为:MS+IAA0.1mg/L+...
【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区
【文章页数】：75 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１技术路线图??Ｆｉｇ．ｌ?Ｍａｔｈｏｄ?ｒｏａｄｍａｐ??
?内蒙古农业大学硕士学位论文?１９??２ｍｌ预冷的ＷＰＢ解离液，用手术刀迅速切碎，再低温孵育３？５ｍｉｎ后用移液枪在３００??目过滤网上过滤进离心管。用ｌ〇〇〇ｒ／ｍｉｎ转速离心５ｍｉｎ，弃上清液后得到约５００ｙｌ??单细胞核悬浮液，再加入１５?ｕｌ?ＰＩ染色液，在冰中低温避光染色３０ｍｉｎ，为防止阻塞??细胞仪，再进行一次过滤，加入进样管中上机检测。并以二倍体黑果枸杞做对照组进??行对比分析。??！?ｆ—?ｍｍ?１??ＨＨＳＳＨ＆Ｉ??图２流式细胞仪??Ｆｉｇ．２?ＦＬＯＷ?Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ??
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【参考文献】：
期刊论文
[1]浅谈林木植物组织培养技术中存在的问题及对策[J]. 刘文静,徐俊杰. 安徽农学通报. 2020(05)
[2]不同培养基和基质对大别山冬青组培苗生根的影响[J]. 方宇鹏,汪诗德. 安庆师范大学学报(自然科学版). 2020(01)
[3]野生黑果枸杞染色体加倍及其多倍体核型分析[J]. 高粉红,何丽君,陈海军,刘嘉伟,单玉梅,汪文晶,于立霞. 分子植物育种. 2020(22)
[4]植物组织培养中褐变和玻璃化及污染的治理研究[J]. 热娜古丽·吐鲁洪,惠浩亮,刘甜甜,闫芬芬,王新建. 黑龙江农业科学. 2019(11)
[5]落地生根植物组织培养及试管苗的移栽研究[J]. 高威,李田春,谢玲,张禹瑶,息佳琦. 辽宁科技学院学报. 2019(05)
[6]不同质量浓度NAA、IBA对栓皮栎、蒙古栎黄化嫩枝扦插生根的影响[J]. 张杰,李健康,段安安,孙宇涵,刘洪山,武素然,李贵芬,李云. 北京林业大学学报. 2019(07)
[7]多倍体与二倍体枇杷叶片特征及抗旱性初步分析[J]. 温国,孙皓浦,党江波,蒋朋飞,王金英,杨垚,郭启高,梁国鲁. 果树学报. 2019(08)
[8]木本植物组织培养[J]. 吉训志,秦晓威,胡丽松,王晓阳,李付鹏,郝朝运. 热带农业科学. 2019(04)
[9]诱变剂对芦笋单倍体染色体加倍的比较[J]. 包艳存,李保华,牟萌,牛晓雪,李霞. 安徽农业科学. 2019(05)
[10]黑果枸杞组织培养研究[J]. 汪清锐,吕林芳. 山西林业科技. 2019(01)
硕士论文
[1]生长素和细胞分裂素对荸荠离体植株再生的影响[D]. 徐映萍.浙江大学 2019
[2]西部沙樱快繁体系的建立[D]. 马晓璐.内蒙古农业大学 2018
[3]萱草属植物种质资源倍性鉴定与核型分析[D]. 张俊.山西农业大学 2018
[4]八倍体黑果枸杞离体诱导研究[D]. 王蕾.延边大学 2018
[5]不同地理种源黑果枸杞的组织培养研究[D]. 王方琳.甘肃农业大学 2017
[6]黑果枸杞种子萌发特性及组织培养研究[D]. 张沛.西北农林科技大学 2017
[7]长叶红砂愈伤组织的诱导分化及茎尖扦插生根[D]. 栾志强.内蒙古大学 2016
[8]不同种类及种源枸杞染色体核型分析[D]. 何丽娟.甘肃农业大学 2016
[9]红叶腺柳组织培养及建立再生体系研究[D]. 胡珊.北京林业大学 2016
[10]长穗桑（Morus wittiorum Handel-Mazzetti）组织培养和四倍体新种质诱导的技术研究[D]. 何建.西南大学 2006
本文编号：3488862
【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区
【文章页数】：75 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１技术路线图??Ｆｉｇ．ｌ?Ｍａｔｈｏｄ?ｒｏａｄｍａｐ??
?内蒙古农业大学硕士学位论文?１９??２ｍｌ预冷的ＷＰＢ解离液，用手术刀迅速切碎，再低温孵育３？５ｍｉｎ后用移液枪在３００??目过滤网上过滤进离心管。用ｌ〇〇〇ｒ／ｍｉｎ转速离心５ｍｉｎ，弃上清液后得到约５００ｙｌ??单细胞核悬浮液，再加入１５?ｕｌ?ＰＩ染色液，在冰中低温避光染色３０ｍｉｎ，为防止阻塞??细胞仪，再进行一次过滤，加入进样管中上机检测。并以二倍体黑果枸杞做对照组进??行对比分析。??！?ｆ—?ｍｍ?１??ＨＨＳＳＨ＆Ｉ??图２流式细胞仪??Ｆｉｇ．２?ＦＬＯＷ?Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ??
?内蒙古农业大学硕士学位论文?２１??叙１??图３?６ｍｉｎ消毒污染产生的白色菌丝??Ｆｉｇ．３?Ｄｉｓｉｎｆｅｃｔ?ｔｈｅ?ｗｈｉｔｅ?ｈｙｐｈａｅ?ｐｒｏｄｕｃｅｄ?ｂｙ?ｃｏｎｔａｍｉｎａｔｉｏｎ?ｆｏｒ?６ｍｉｎ??３．１．２黑果枸杞茎段愈伤组织培养??愈伤组织培养培养基筛选结果：本试验部分参考其他品系黑果枸杞组培适用的基??本培养基后，决定选用ＭＳ和ＷＰＭ培养基作两者之间的比较，在培养基中都添加了??６－ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ?和?ＩＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ?的激素组合。??表１４不同培养基对黑果枸杞茎段愈伤组织培养??Ｔａｂｌｅ．?１４?Ｃａｌｌｕｓ?ｃｕｌｔｕｒｅ?ｏｆ?ｓｔｅｍ?ｓｅｇｍｅｎｔ?ｏｆ?Ｌｙｃｉｕｍ?ｒｕｔｈｅｎｉｕｍ?ｉｎ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｍｅｄｉａ??养总数存活数出愈率（％）平均，愈率?愈伤长势??基?（％）???５０?５０?９０．００?表面湿润、长势较好、??ＭＳ?５０?４９?８７．７５?８６．０６?愈伤较大、绿色约占??５０?４６?８０．４３?３／４?体积??５〇?４５?７１－１１?表面湿润、长势一般、??５０?４２?５５＇８１?愈伤较孝褐色较多???５０?４２?６６．?６７???由表１４的数据可做如下总结：这两种培养基的愈伤形成率差距较大，在ＭＳ培??养基上接种的茎段有明显被诱导出愈伤组织的效果，而且产生的愈伤组织颜色鲜艳、??生长状态优良、质量高，且愈伤组织的平均形成率为８６．０６％；?ＷＰＭ培养基中的茎段??也可以形成愈伤组织，但愈伤组织的质量不高，长势较弱、愈伤组织较孝有褐化现??象。而且ＷＰＭ培养基的缺点可以通过存活率的微小差
【参考文献】：
期刊论文
[1]浅谈林木植物组织培养技术中存在的问题及对策[J]. 刘文静,徐俊杰. 安徽农学通报. 2020(05)
[2]不同培养基和基质对大别山冬青组培苗生根的影响[J]. 方宇鹏,汪诗德. 安庆师范大学学报(自然科学版). 2020(01)
[3]野生黑果枸杞染色体加倍及其多倍体核型分析[J]. 高粉红,何丽君,陈海军,刘嘉伟,单玉梅,汪文晶,于立霞. 分子植物育种. 2020(22)
[4]植物组织培养中褐变和玻璃化及污染的治理研究[J]. 热娜古丽·吐鲁洪,惠浩亮,刘甜甜,闫芬芬,王新建. 黑龙江农业科学. 2019(11)
[5]落地生根植物组织培养及试管苗的移栽研究[J]. 高威,李田春,谢玲,张禹瑶,息佳琦. 辽宁科技学院学报. 2019(05)
[6]不同质量浓度NAA、IBA对栓皮栎、蒙古栎黄化嫩枝扦插生根的影响[J]. 张杰,李健康,段安安,孙宇涵,刘洪山,武素然,李贵芬,李云. 北京林业大学学报. 2019(07)
[7]多倍体与二倍体枇杷叶片特征及抗旱性初步分析[J]. 温国,孙皓浦,党江波,蒋朋飞,王金英,杨垚,郭启高,梁国鲁. 果树学报. 2019(08)
[8]木本植物组织培养[J]. 吉训志,秦晓威,胡丽松,王晓阳,李付鹏,郝朝运. 热带农业科学. 2019(04)
[9]诱变剂对芦笋单倍体染色体加倍的比较[J]. 包艳存,李保华,牟萌,牛晓雪,李霞. 安徽农业科学. 2019(05)
[10]黑果枸杞组织培养研究[J]. 汪清锐,吕林芳. 山西林业科技. 2019(01)
硕士论文
[1]生长素和细胞分裂素对荸荠离体植株再生的影响[D]. 徐映萍.浙江大学 2019
[2]西部沙樱快繁体系的建立[D]. 马晓璐.内蒙古农业大学 2018
[3]萱草属植物种质资源倍性鉴定与核型分析[D]. 张俊.山西农业大学 2018
[4]八倍体黑果枸杞离体诱导研究[D]. 王蕾.延边大学 2018
[5]不同地理种源黑果枸杞的组织培养研究[D]. 王方琳.甘肃农业大学 2017
[6]黑果枸杞种子萌发特性及组织培养研究[D]. 张沛.西北农林科技大学 2017
[7]长叶红砂愈伤组织的诱导分化及茎尖扦插生根[D]. 栾志强.内蒙古大学 2016
[8]不同种类及种源枸杞染色体核型分析[D]. 何丽娟.甘肃农业大学 2016
[9]红叶腺柳组织培养及建立再生体系研究[D]. 胡珊.北京林业大学 2016
[10]长穗桑（Morus wittiorum Handel-Mazzetti）组织培养和四倍体新种质诱导的技术研究[D]. 何建.西南大学 2006
本文编号：3488862
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