‘培矮64S’与其eui突变体‘长选3S’穗颈节间蛋白质组差异分析
发布时间：2021-11-16 12:40
为从蛋白质表达水平了解长穗颈温敏核不育水稻穗颈节间伸长机理,该研究以长穗颈（EUI）温敏核不育水稻‘长选3S’为材料,温敏核不育水稻‘培矮64S’为对照,采用固相pH梯度双向凝胶电泳和质谱分析方法,对2个水稻材料抽穗前2 d的穗颈节间蛋白质进行分离,并进行差异蛋白质组学的比较研究。结果表明:（1）获得了分辨率和重复性较好的双向凝胶电泳图谱。（2）对40个差异蛋白质点进行MALDI-TOF-TOF-MS肽质谱指纹图谱分析,成功鉴定其中27个差异蛋白质点;与‘培矮64S’相比,‘长选3S’中有17个上调表达和10个下调表达的蛋白质。（3）差异蛋白质按照其功能可分为6类,其中主要是与细胞代谢相关蛋白,其次是与细胞壁重建相关蛋白;并且这些差异蛋白质可能与‘长选3S’抽穗期穗颈节间剧烈伸长生长有关,尤其是细胞壁重建相关蛋白与细胞的伸长密切相关。（4）实时荧光定量PCR对随机挑选的蛋白点2、7、8、24、35和36所对应的基因在两个材料最上节间的表达结果显示,‘长选3S’的2（Os10g08550）、7（Os12g42876）、8（Os01g55830）基因的表达量较‘培矮64S’明显下调,而24...
【文章来源】：西北植物学报. 2020,40(06)北大核心CSCD
【文章页数】：12 页
【部分图文】：
鉴定的蛋白质点2-DE放大图
为深入解析eui突变体‘长选3S’的抽穗性状与差异表达蛋白质之间的内在联系,将鉴定的蛋白质在Mascot (http://www.matrixscience.com)网站对本地数据库进行检索,并根据相关文献报道对这些蛋白质按照功能进行分类(表3)。由表3可知,这些得到成功鉴定的蛋白质可分为6类:(1) 碳水化合物与能量代谢相关蛋白,占鉴定蛋白数的33.33% (下同); (2) 氨基酸代谢相关蛋白,占11.11%;(3) 细胞壁重建相关蛋白,占25.93%; (4) 细胞解毒相关蛋白,占18.52%; (5) 基因表达调控相关蛋白,占7.41%和(6) 细胞骨架相关蛋白,占3.70%。其中与代谢(如碳水化合物与能量代谢、氨基酸代谢及细胞解毒等)相关的蛋白质较多,占鉴定蛋白数的62.96%,其次是细胞壁重建相关蛋白。2.5 实时荧光定量PCR分析
根据差异蛋白质的表达质量,对40个差异蛋白质点进行了肽质量指纹图谱分析及数据库检索,最终有27个蛋白质点得到成功鉴定(表3),占总差异蛋白质点的67.5%。与‘培矮64S’相比,这些鉴定的蛋白质中,有10个在‘长选3S’穗颈节中表达下调的蛋白质(图3,A)和17个表达上调的蛋白质(图3,B)。其余13个蛋白质点未能得到鉴定,这可能是由于目标蛋白质含量较少,在MALDI-TOF-TOF-MS分析中不易得到较高质量的肽质谱指纹图,或者因为匹配率和覆盖率较低等原因,增加了解谱难度,最终影响蛋白质数据库检索鉴定的成功率。表2 20 ℃条件下‘长选3S’与‘培矮64S’性状比较Table 2 Comparison of morphological traits between ‘Changxuan 3S’ and ‘Peiai 64S’ at 20 ℃ 材料Material 秆高Culm length/cm 剑叶鞘长Leaf sheath/cm 最上节间长度Uppermost internode/cm 穗颈伸出度Panicle extension/cm 花粉可染Stainable pollen/% 自交结实率Selfed seeds/% 长选3S Changxuan 3S 89.46±0.43** 34.84±1.87** 47.53±2.57** 12.65±1.77** 85.32±0.57 33.74±1.57 培矮64S Peiai 64S 68.37±0.52 30.57±1.54 24.64±2.15 -5.93±1.18 87.88±0.57 34.71±2.64 注:**为t测验0.01显著水平Note: ** is t test 0.01 level significance
【参考文献】：
期刊论文
[1]水稻两用核不育系的研究现状与发展策略[J]. 雷东阳,林勇,陈立云. 湖南农业大学学报(自然科学版). 2019(03)
[2]温敏核不育系培矮64S及其eui突变体长选3S最上节间蛋白质组差异分析[J]. 肖辉海,郝小花,李荣,杨友伟,陈春霞. 热带亚热带植物学报. 2016(05)
[3]长穗颈温敏核不育水稻穗颈节间伸长与内源激素的关系[J]. 肖辉海. 植物生理学通讯. 2008(04)
[4]温度对长穗颈温敏核不育水稻（Oryza sativa L.）穗颈伸出长度的影响[J]. 肖辉海. 生态学报. 2007(09)
[5]温敏核不育水稻穗颈节间的SSH特异表达[J]. 肖辉海,贺安娜,刘俊飞. 西北植物学报. 2006(11)
[6]长穗颈温敏核不育水稻双低培eS遗传特性的研究[J]. 梁满中,钟卫华,徐孟亮,陈良碧. 作物学报. 2004(08)
[7]水稻eui基因研究进展[J]. 张书标,杨仁崔. 作物学报. 2004(07)
[8]棉花恢复系的恢复力与花药谷胱甘肽S转移酶活性的关系[J]. 朱云国,王学德,赵佩欧,倪西源. 作物学报. 2003(05)
[9]长穗颈双低温敏核不育水稻的选育(英文)[J]. 周广洽,陈良碧,梁满中,徐孟亮. 生命科学研究. 2000(04)
[10]培矮64S中不育临界温度低的新株系筛选[J]. 徐孟亮,陈良碧,周广洽. 生命科学研究. 1999(02)
博士论文
[1]植物发育突变体的蛋白质组学研究[D]. 萧小鹃.湖南大学 2008
[2]长穗颈eui基因促进温敏核不育水稻最上节间伸长机理的研究[D]. 梁满中.湖南师范大学 2008
本文编号：3498909
【文章来源】：西北植物学报. 2020,40(06)北大核心CSCD
【文章页数】：12 页
【部分图文】：
鉴定的蛋白质点2-DE放大图
为深入解析eui突变体‘长选3S’的抽穗性状与差异表达蛋白质之间的内在联系,将鉴定的蛋白质在Mascot (http://www.matrixscience.com)网站对本地数据库进行检索,并根据相关文献报道对这些蛋白质按照功能进行分类(表3)。由表3可知,这些得到成功鉴定的蛋白质可分为6类:(1) 碳水化合物与能量代谢相关蛋白,占鉴定蛋白数的33.33% (下同); (2) 氨基酸代谢相关蛋白,占11.11%;(3) 细胞壁重建相关蛋白,占25.93%; (4) 细胞解毒相关蛋白,占18.52%; (5) 基因表达调控相关蛋白,占7.41%和(6) 细胞骨架相关蛋白,占3.70%。其中与代谢(如碳水化合物与能量代谢、氨基酸代谢及细胞解毒等)相关的蛋白质较多,占鉴定蛋白数的62.96%,其次是细胞壁重建相关蛋白。2.5 实时荧光定量PCR分析
根据差异蛋白质的表达质量,对40个差异蛋白质点进行了肽质量指纹图谱分析及数据库检索,最终有27个蛋白质点得到成功鉴定(表3),占总差异蛋白质点的67.5%。与‘培矮64S’相比,这些鉴定的蛋白质中,有10个在‘长选3S’穗颈节中表达下调的蛋白质(图3,A)和17个表达上调的蛋白质(图3,B)。其余13个蛋白质点未能得到鉴定,这可能是由于目标蛋白质含量较少,在MALDI-TOF-TOF-MS分析中不易得到较高质量的肽质谱指纹图,或者因为匹配率和覆盖率较低等原因,增加了解谱难度,最终影响蛋白质数据库检索鉴定的成功率。表2 20 ℃条件下‘长选3S’与‘培矮64S’性状比较Table 2 Comparison of morphological traits between ‘Changxuan 3S’ and ‘Peiai 64S’ at 20 ℃ 材料Material 秆高Culm length/cm 剑叶鞘长Leaf sheath/cm 最上节间长度Uppermost internode/cm 穗颈伸出度Panicle extension/cm 花粉可染Stainable pollen/% 自交结实率Selfed seeds/% 长选3S Changxuan 3S 89.46±0.43** 34.84±1.87** 47.53±2.57** 12.65±1.77** 85.32±0.57 33.74±1.57 培矮64S Peiai 64S 68.37±0.52 30.57±1.54 24.64±2.15 -5.93±1.18 87.88±0.57 34.71±2.64 注:**为t测验0.01显著水平Note: ** is t test 0.01 level significance
【参考文献】：
期刊论文
[1]水稻两用核不育系的研究现状与发展策略[J]. 雷东阳,林勇,陈立云. 湖南农业大学学报(自然科学版). 2019(03)
[2]温敏核不育系培矮64S及其eui突变体长选3S最上节间蛋白质组差异分析[J]. 肖辉海,郝小花,李荣,杨友伟,陈春霞. 热带亚热带植物学报. 2016(05)
[3]长穗颈温敏核不育水稻穗颈节间伸长与内源激素的关系[J]. 肖辉海. 植物生理学通讯. 2008(04)
[4]温度对长穗颈温敏核不育水稻（Oryza sativa L.）穗颈伸出长度的影响[J]. 肖辉海. 生态学报. 2007(09)
[5]温敏核不育水稻穗颈节间的SSH特异表达[J]. 肖辉海,贺安娜,刘俊飞. 西北植物学报. 2006(11)
[6]长穗颈温敏核不育水稻双低培eS遗传特性的研究[J]. 梁满中,钟卫华,徐孟亮,陈良碧. 作物学报. 2004(08)
[7]水稻eui基因研究进展[J]. 张书标,杨仁崔. 作物学报. 2004(07)
[8]棉花恢复系的恢复力与花药谷胱甘肽S转移酶活性的关系[J]. 朱云国,王学德,赵佩欧,倪西源. 作物学报. 2003(05)
[9]长穗颈双低温敏核不育水稻的选育(英文)[J]. 周广洽,陈良碧,梁满中,徐孟亮. 生命科学研究. 2000(04)
[10]培矮64S中不育临界温度低的新株系筛选[J]. 徐孟亮,陈良碧,周广洽. 生命科学研究. 1999(02)
博士论文
[1]植物发育突变体的蛋白质组学研究[D]. 萧小鹃.湖南大学 2008
[2]长穗颈eui基因促进温敏核不育水稻最上节间伸长机理的研究[D]. 梁满中.湖南师范大学 2008
本文编号：3498909
本文链接：https://www.wllwen.com/nykjlw/nzwlw/3498909.html
最近更新
教材专著
