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耐盐小冰麦筛选及分子细胞遗传学鉴定

发布时间:2021-12-02 03:34
  PSR3628是从美国引进的耐盐八倍体小冰麦。本试验对PSR3628杂交后代株系进行耐盐性鉴定,筛选与耐盐相关的EST-SSR标记,对耐盐及盐敏感株系进行顺序GISH-FISH分析,为小麦耐盐QTLs精细定位、遗传育种奠定基础。获得的主要结果如下:(1)对杂交后代株系进行萌发期耐盐性鉴定,发现小冰麦耐盐性鉴定的盐胁迫适宜浓度为150 mmol/L。在A19群体(PSR3628×Begra F6,152个株系)中,利用加权隶属函数值(D值)对其耐盐性进行评价,可将152份株系分为5个级别:高度耐盐(Ⅰ级;20份,D值范围为0.8068~0.6447)、耐盐(Ⅱ级;42份,D值范围为0.6267~0.4965)、中等耐盐(Ⅲ级;55份,D值范围为0.4922~0.3636)、盐敏感(Ⅳ级;24份,D值范围为0.3509~0.2353)、高度盐敏感(Ⅴ级;11份,D值范围为0.2121~0.0986)。对A17群体(PSR3628×Pavon BC1F3,226个株系)与A18群体(PSR3628×Pavon F3<... 

【文章来源】:贵州大学贵州省 211工程院校

【文章页数】:73 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 我国盐碱地分布及其危害概述
    1.2 植物耐盐机理研究概况
        1.2.1 渗透平衡调节机制
        1.2.2 抗氧化防御系统调节机制
        1.2.3 胁迫信号转导系统
    1.3 植物耐盐相关基因研究概况
        1.3.1 渗透调节相关基因
        1.3.2 通道蛋白相关基因
        1.3.3 抗氧化相关基因
    1.4 小麦及其近缘耐盐基因挖掘研究进展
        1.4.1 小麦近缘物种耐盐基因研究概况
        1.4.2 小麦中耐盐基因研究概况
    1.5 小麦中外源耐盐遗传物质导入的方法
        1.5.1 小麦双二倍体的构建
        1.5.2 小麦异附加系的构建
        1.5.3 异代换系
        1.5.4 异源易位系
    1.6 小麦中外源遗传物质的检测
        1.6.1 形态标记检测
        1.6.2 细胞学标记检测
        1.6.3 生化标记检测
        1.6.4 分子标记检测
        1.6.5 原位杂交技术
    1.7 本研究目的及意义
第二章 材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 试验材料
        2.1.2 实验室仪器
        2.1.3 试验常用试剂及其配制方法
    2.2 试验方法
        2.2.1 最适盐胁迫浓度筛选及亲本芽期耐盐性鉴定
        2.2.2 A19群体盐胁迫处理
        2.2.3 A19群体指标测定及方法
        2.2.4 A19群体耐盐性评价
        2.2.5 A18及A17群体盐胁迫处理
        2.2.6 A17及A18群体指标测定及方法
        2.2.7 A17及A18群体耐盐性评价
        2.2.8 载玻片及盖玻片的处理
        2.2.9 根尖染色体的制备
        2.2.10 探针标记
        2.2.11 基因组DNA的提取
        2.2.12 DNA浓度及纯度检测
        2.2.13 FISH分析
        2.2.14 封阻DNA的制备
        2.2.15 杂交信号脱洗
        2.2.16 GISH杂交
        2.2.17 SSR的引物来源
        2.2.18 标记与性状的相关分析
        2.2.19 PCR反应体系及扩增程序
        2.2.20 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
第三章 结果与分析
    3.1 最适盐胁迫浓度筛选
    3.2 亲本芽期耐盐性鉴定
    3.3 A19群体芽期耐盐性鉴定
        3.3.1 盐胁迫对种子萌发的影响
        3.3.2 各个指标间的耐盐性差异
        3.3.3 A19群体的综合评价
    3.4 A17及A18群体芽期耐盐性鉴定
    3.5 小冰麦分子标记筛选及鉴定
        3.5.1 小冰麦EST-SSR分布特点
        3.5.2 EST-SSR的基元重复类型及特征
        3.5.3 EST-SSR不同核苷酸优势基元的特征
        3.5.4 EST-SSR的引物设计
        3.5.5 耐盐、盐敏感池间的多态性引物筛选
        3.5.6 耐盐、盐敏感池单株间引物多态性验证
        3.5.7 小冰麦性状与标记的相关分析
    3.6 小冰麦细胞学鉴定
        3.6.1 小冰麦亲本PSR3628的细胞遗传学鉴定
        3.6.2 小冰麦细胞学鉴定
第四章 讨论与结论
    4.1 讨论
        4.1.1 小麦芽期耐盐性鉴定及评价指标
        4.1.2 EST-SSR标记的分布特点
        4.1.3 耐盐分子标记的开发利用
        4.1.4 耐盐基因及其染色体定位
    4.2 结论
参考文献
致谢
附录 Ⅰ
附录 Ⅱ



本文编号:3527647

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