栽培丹参种质资源遗传多样性及快速活性测定研究
发布时间：2021-12-02 05:12
丹参（Salvia miltiorrhiza Bunge.）是唇形科（Labiatae）鼠尾草属（Salvia）的一种主要以根及根茎入药的草本植物,其种质资源丰富,种类繁多。本文以国内30个地区的共42个丹参居群为材料,考察了其种子形状、大小及部分农艺性状;对其内转录间隔区（ITS）序列进行PCR扩增与分析;对丹参有效成分丹参酮和丹酚酸合成途径中的6个关键酶基因:3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶基因（HMGR）、1-去氧木糖-5-磷酸合酶基因（DXS）、1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶基因（DXR）、苯丙氨酸解氨酶基因（PAL）、迷迭香酸合酶基因（RAS）和酪氨酸氨基转移酶基因（TAT）的c DNA序列或基因序列设计兼并同源引物,分段克隆42个居群的相应基因组基因,以供进行遗传多样性分析;以四川红原白花丹参为材料,初步探索了丹参种子活力快速测定方法。主要研究结果如下:1.不同居群丹参种子形态、大小及部分农艺性状观测42个丹参居群的种子考种测定表明:其长径范围为2.404.05mm,短径范围为1.013.00mm,长短径比范围为1....
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：115 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
真核生物rDNA的结构
西南大学硕士学位论文8的作用下IPP和其异构物DMAPP之间可相互转化[82]，这两种物质是所有萜类化合物的前体物质。图1-2萜类化合物生物合成的MVA途径和DXP途径.Fig.1-2Themevalonate（MVA）and1-deoxy-D-xylulose5-phosphate（DXP）pathwaysforbiosynthesisofterpenoids注：虚线箭头代表多步反应Note:Thedottedarrowsrepresentmulti-stepreactions1.4.4丹酚酸类化合物的生物合成途径及相关酶的研究丹参中主要的水溶性酚酸类成分，大多数是在迷迭香酸的结构上进一步衍生而来。到目前为止，迷迭香酸的合成途径研究的较清楚[90]。迷迭香酸的生源途径由两条平行支路即苯丙氨酸途径和酪氨酸途径组成。在苯丙氨酸途径上，苯丙氨酸在苯丙氨酸解氨酶（phenylalanineammonialyase，PAL）的催化下形成肉桂酸，这是苯丙烷类代谢的限速酶[91]，然后肉桂酸经肉桂酸-4-羟化酶（cinnamicacid4-hydroxylase,C4H）催化生成4-香豆酸，然后在4-香豆素辅酶A连接酶（4-hydroxycinnamatecoenzymeAligase，4CL）催化下形成4-香豆酰CoA。在酪氨酸支路上，酪氨酸经酪氨酸氨基转移酶（tyrosineaminotransferase,TAT）催化形成4-羟基苯丙酮酸，TAT是酪氨酸代谢的限速酶，然后在4-羟基苯丙酮酸还原酶（4-hydroxyphenylpyruvatereductase,HPPR）的催化形成4-羟基苯乳酸。两条支路上形成的4-香豆酰辅酶A与4-羟基苯乳酸为迷迭香酸的前体物质，在迷迭香酸合成（rosmarinicacidsynthetase,RAS）作用下缩合，形成了两种2-氧-(4-香豆酰)-3-(4-羟基苯)-乳酸的异构体，这是迷迭香酸合成的关键反应。最后经细胞色素P450单加氧酶的CYP98亚家族羟化酶的催化，形成了迷迭香[92]。
第1章文献综述9图1-3迷迭香酸及相关代谢物生源途径Fig.1-3Thebiogenicpathwayofrosmarinicacidandrelatedmetabolites注：虚线箭头代表多步反应Note:Thedottedarrowsrepresentmulti-stepreactions1.5丹参种子活力快速测定研究进展种子的生活力即种子能够萌发的潜在能力和胚所具有的生命力，种子活力是种子品质判定的重要指标，而发芽势和发芽率能够反映种子质量的优劣，在发芽率相同时，发芽势高的种子表明种子活力较强、播种后的发芽率较高。种子活力的快速测定法有氯化三苯基四氮唑法（TTC法）、红墨水法、溴麝香草酚蓝法（BTB法）等。TTC法测定种子生活力，准确率较高，但价格昂贵；红墨水法经济实惠，花费时间短，但相比TTC法准确率低[94]；BTB法通过测定呼吸作用产生二氧化碳改变介质的酸碱度来鉴定种子的生活力，直观，但实验中琼脂凝胶的厚度不易把握。丹参种子形状为椭圆形或卵圆形，茶褐色，种子小[95]，种子的果皮表面存在黏液物质，吸水后黏液物质包裹着种子；种胚剥离不易，因此较难利用种胚来进行种子活力的快速测定。用完整种子进行活力测定，可克服种粒小，胚不易剥离的不足，综合性较强，因此用完整的丹参种粒的呼吸强度来测定种子的活力是可行的。丹参种子的萌发环境条件及其在逆境下萌发的研究较多，杨艳娟等[96]对紫丹参的萌发特性进行研究，发现紫丹参种子在25℃的条件下发芽率较高，且萌发时需光照。王涛等[97]采用PEG-6000模拟干旱条件测定种子的发芽势和发芽率，结果表明，不同种源丹参种子的发芽率和发芽势均受到PEG不同程度的影响。张玉等[98]以甘露醇为引发剂，采用5个引发浓度和5个引发时间考察了干旱胁迫处理对丹参种子的发芽势、发芽率的影响，结果显示：甘露醇引发浓度越高、引发时间越长，对丹参种
【参考文献】：
期刊论文
[1]一株丹参种子内生真菌ZJZD3的分离鉴定及其生物活性[J]. 刘玉娇,宋乐天,郭书欣,卢珊,王德才,李艳玲. 食品工业科技. 2020(04)
[2]基于ITS序列对12种石斛属植物的鉴定研究[J]. 高静,蔡金龙,陈军文,谢世清,杨生超,张敬丽. 中药材. 2019(06)
[3]丹参相关保健食品的应用情况分析[J]. 王艳宏,樊建,李洪晶,栾宁,盛开,陈大忠. 中国实验方剂学杂志. 2020(06)
[4]ITS2序列鉴定甘草混淆伪品的研究[J]. 白东东,李新圃,杨峰,罗金印,张行,李宏胜. 中兽医医药杂志. 2019(03)
[5]枣属ITS及psbA-trnH序列PCR反应体系的优化与验证[J]. 李学营,索相敏,白瑞霞,彭建营,马宝玲. 河北农业科学. 2019(02)
[6]对丹参素药理作用的研究进展[J]. 李强,曹陈军,陈奕,唐博宇,何莲花,卢琼. 当代医药论丛. 2019(10)
[7]紫丹参种子生物学特性与萌发特性研究[J]. 杨艳娟,陈光明,资付益,侯彦,李宁芳,余朝良. 安徽农业科学. 2019(06)
[8]山东省丹参种子质量分级标准研究[J]. 常晖,曾艾林,贾志伟,任振丽,马存德. 种子. 2019(02)
[9]基于ITS的贵州省30个树种的DNA条形码研究[J]. 成宇,蔡莎莎,舒剑锋,袁昊,伍颖,凃翠,杨鹏,赵财. 山地农业生物学报. 2018(06)
[10]中药丹参治疗冠心病的药理成分及作用分析[J]. 郑云霞,孟萌. 双足与保健. 2018(17)
博士论文
[1]丹参酚酸类成分生源合成调控相关基因的克隆与功能研究[D]. 张顺仓.西北农林科技大学 2014
[2]丹参酚酸类成分生源途径的探索及相关基因的克隆与功能研究[D]. 邸鹏.第二军医大学 2012
硕士论文
[1]泰山丹参种质资源的评价与优良种质的筛选[D]. 战戈.山东农业大学 2018
[2]丹参种质资源收集与评价研究[D]. 李星.陕西师范大学 2008
本文编号：3527799
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：115 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
真核生物rDNA的结构
西南大学硕士学位论文8的作用下IPP和其异构物DMAPP之间可相互转化[82]，这两种物质是所有萜类化合物的前体物质。图1-2萜类化合物生物合成的MVA途径和DXP途径.Fig.1-2Themevalonate（MVA）and1-deoxy-D-xylulose5-phosphate（DXP）pathwaysforbiosynthesisofterpenoids注：虚线箭头代表多步反应Note:Thedottedarrowsrepresentmulti-stepreactions1.4.4丹酚酸类化合物的生物合成途径及相关酶的研究丹参中主要的水溶性酚酸类成分，大多数是在迷迭香酸的结构上进一步衍生而来。到目前为止，迷迭香酸的合成途径研究的较清楚[90]。迷迭香酸的生源途径由两条平行支路即苯丙氨酸途径和酪氨酸途径组成。在苯丙氨酸途径上，苯丙氨酸在苯丙氨酸解氨酶（phenylalanineammonialyase，PAL）的催化下形成肉桂酸，这是苯丙烷类代谢的限速酶[91]，然后肉桂酸经肉桂酸-4-羟化酶（cinnamicacid4-hydroxylase,C4H）催化生成4-香豆酸，然后在4-香豆素辅酶A连接酶（4-hydroxycinnamatecoenzymeAligase，4CL）催化下形成4-香豆酰CoA。在酪氨酸支路上，酪氨酸经酪氨酸氨基转移酶（tyrosineaminotransferase,TAT）催化形成4-羟基苯丙酮酸，TAT是酪氨酸代谢的限速酶，然后在4-羟基苯丙酮酸还原酶（4-hydroxyphenylpyruvatereductase,HPPR）的催化形成4-羟基苯乳酸。两条支路上形成的4-香豆酰辅酶A与4-羟基苯乳酸为迷迭香酸的前体物质，在迷迭香酸合成（rosmarinicacidsynthetase,RAS）作用下缩合，形成了两种2-氧-(4-香豆酰)-3-(4-羟基苯)-乳酸的异构体，这是迷迭香酸合成的关键反应。最后经细胞色素P450单加氧酶的CYP98亚家族羟化酶的催化，形成了迷迭香[92]。
第1章文献综述9图1-3迷迭香酸及相关代谢物生源途径Fig.1-3Thebiogenicpathwayofrosmarinicacidandrelatedmetabolites注：虚线箭头代表多步反应Note:Thedottedarrowsrepresentmulti-stepreactions1.5丹参种子活力快速测定研究进展种子的生活力即种子能够萌发的潜在能力和胚所具有的生命力，种子活力是种子品质判定的重要指标，而发芽势和发芽率能够反映种子质量的优劣，在发芽率相同时，发芽势高的种子表明种子活力较强、播种后的发芽率较高。种子活力的快速测定法有氯化三苯基四氮唑法（TTC法）、红墨水法、溴麝香草酚蓝法（BTB法）等。TTC法测定种子生活力，准确率较高，但价格昂贵；红墨水法经济实惠，花费时间短，但相比TTC法准确率低[94]；BTB法通过测定呼吸作用产生二氧化碳改变介质的酸碱度来鉴定种子的生活力，直观，但实验中琼脂凝胶的厚度不易把握。丹参种子形状为椭圆形或卵圆形，茶褐色，种子小[95]，种子的果皮表面存在黏液物质，吸水后黏液物质包裹着种子；种胚剥离不易，因此较难利用种胚来进行种子活力的快速测定。用完整种子进行活力测定，可克服种粒小，胚不易剥离的不足，综合性较强，因此用完整的丹参种粒的呼吸强度来测定种子的活力是可行的。丹参种子的萌发环境条件及其在逆境下萌发的研究较多，杨艳娟等[96]对紫丹参的萌发特性进行研究，发现紫丹参种子在25℃的条件下发芽率较高，且萌发时需光照。王涛等[97]采用PEG-6000模拟干旱条件测定种子的发芽势和发芽率，结果表明，不同种源丹参种子的发芽率和发芽势均受到PEG不同程度的影响。张玉等[98]以甘露醇为引发剂，采用5个引发浓度和5个引发时间考察了干旱胁迫处理对丹参种子的发芽势、发芽率的影响，结果显示：甘露醇引发浓度越高、引发时间越长，对丹参种
【参考文献】：
期刊论文
[1]一株丹参种子内生真菌ZJZD3的分离鉴定及其生物活性[J]. 刘玉娇,宋乐天,郭书欣,卢珊,王德才,李艳玲. 食品工业科技. 2020(04)
[2]基于ITS序列对12种石斛属植物的鉴定研究[J]. 高静,蔡金龙,陈军文,谢世清,杨生超,张敬丽. 中药材. 2019(06)
[3]丹参相关保健食品的应用情况分析[J]. 王艳宏,樊建,李洪晶,栾宁,盛开,陈大忠. 中国实验方剂学杂志. 2020(06)
[4]ITS2序列鉴定甘草混淆伪品的研究[J]. 白东东,李新圃,杨峰,罗金印,张行,李宏胜. 中兽医医药杂志. 2019(03)
[5]枣属ITS及psbA-trnH序列PCR反应体系的优化与验证[J]. 李学营,索相敏,白瑞霞,彭建营,马宝玲. 河北农业科学. 2019(02)
[6]对丹参素药理作用的研究进展[J]. 李强,曹陈军,陈奕,唐博宇,何莲花,卢琼. 当代医药论丛. 2019(10)
[7]紫丹参种子生物学特性与萌发特性研究[J]. 杨艳娟,陈光明,资付益,侯彦,李宁芳,余朝良. 安徽农业科学. 2019(06)
[8]山东省丹参种子质量分级标准研究[J]. 常晖,曾艾林,贾志伟,任振丽,马存德. 种子. 2019(02)
[9]基于ITS的贵州省30个树种的DNA条形码研究[J]. 成宇,蔡莎莎,舒剑锋,袁昊,伍颖,凃翠,杨鹏,赵财. 山地农业生物学报. 2018(06)
[10]中药丹参治疗冠心病的药理成分及作用分析[J]. 郑云霞,孟萌. 双足与保健. 2018(17)
博士论文
[1]丹参酚酸类成分生源合成调控相关基因的克隆与功能研究[D]. 张顺仓.西北农林科技大学 2014
[2]丹参酚酸类成分生源途径的探索及相关基因的克隆与功能研究[D]. 邸鹏.第二军医大学 2012
硕士论文
[1]泰山丹参种质资源的评价与优良种质的筛选[D]. 战戈.山东农业大学 2018
[2]丹参种质资源收集与评价研究[D]. 李星.陕西师范大学 2008
本文编号：3527799
本文链接：https://www.wllwen.com/nykjlw/nzwlw/3527799.html
最近更新
教材专著
