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烟草类胡萝卜素性状杂种优势及其生物合成关键酶基因的差异表达分析

发布时间:2022-02-09 11:59
  类胡萝卜素对烟叶香气供献率大,是影响烟叶香气质和香气量的重要组分。为了探讨烟草F1代类胡萝卜素性状杂种优势形成的分子机理,本文筛选类胡萝卜素性状杂种优势不同的组合,对其生长发育过程中杂种优势的表现及其与类胡萝卜素合成关键酶基因的差异表达进行分析,旨为烟草类胡萝卜素性状的改良和进一步认识杂种优势形成的分子机理奠定基础。采用完全随机遗传交配设计,利用16个亲本组配了57个组合,筛选出类胡萝卜素强弱优势组合。分别测定强弱优势组合在移栽42d、56d、70d和77d时的类胡萝卜素含量及其杂种优势表现,同时采用实时荧光定量(Real Time PCR)技术探讨了强弱杂种优势组合在不同生育期,类胡萝卜素合成关键酶基因的差异表达变化与杂种优势形成的相关性。主要研究结果如下:1、成熟采烤期:亲本类胡萝卜素含量最高的为NC82,0.2935 mg/g;最低为湄潭大蛮烟,0.2009 mg/g;均值为0.2302 mg/g。杂交组合类胡萝卜素含量最高为红大×TN90,0.3034mg/g;含量最低为K326×红大,0.1660 mg/g;均值为0.2320mg/g。表现出类胡萝卜素性状存在超高亲优势和超低... 

【文章来源】:贵州大学贵州省211工程院校

【文章页数】:57 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

烟草类胡萝卜素性状杂种优势及其生物合成关键酶基因的差异表达分析


移栽42d、56d、70d、77d类胡萝卜素性状杂种优势表现单位(%)

琼脂糖电泳,图谱,有机物污染


图 4 RNA 琼脂糖电泳检测图谱Fig.4 RNA agarose gel electrophoresis patterns如图 4 可得出:所提取的烟草 RNA 质量较高,表现为 28S 和 18S 条带清晰,5S 模糊,没有拖尾现象,说明 RNA 没有降解;提取的 RNA 28S 条带与 18S 条带比例接近或大于 2:1,说明其完整性佳;上方无杂带,点样孔附近也无发亮现象存在,说明没有 DNA 和蛋白质等杂质污染,可用于后续试验。3.4.1.2 紫外分光光度计检测 RNA 纯度和浓度波长 260、280 nm 下的吸光度分别代表了核酸和蛋白等有机物的值。当 A260/A280<1.8时,说明提取物中有糖、肽、苯酚等有机物污染,当 A260/A280>2.2 时,说明 RNA 已经水解成单核苷酸。经紫外分光光度计检测,各样品 RNA 纯度较高,其 A260/A280在 1.824~1.902之间,说明糖、肽、苯酚等有机物污染少,几乎无降解现象,其浓度和纯度达到后续试验要求,可以进行下一步实验。

单链,检测结果,有机物污染,纯度


可用于后续试验。3.4.1.2 紫外分光光度计检测 RNA 纯度和浓度波长 260、280 nm 下的吸光度分别代表了核酸和蛋白等有机物的值。当 A260/A280<1.8时,说明提取物中有糖、肽、苯酚等有机物污染,当 A260/A280>2.2 时,说明 RNA 已经水解成单核苷酸。经紫外分光光度计检测,各样品 RNA 纯度较高,其 A260/A280在 1.824~1.902之间,说明糖、肽、苯酚等有机物污染少,几乎无降解现象,其浓度和纯度达到后续试验要求,可以进行下一步实验。3.4.1.3 cDNA 单链的检测将提取的总 RNA 反转录为 cDNA 单链,后以 cDNA 单链为模版,Actin 为引物等配置检测体系,进行烟草管家基因 Actin 检测。

【参考文献】:
期刊论文
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[3]饼肥对烤烟叶片发育过程中质体色素降解及相关酶类活性的影响[J]. 韦凤杰,范艺宽,刘国顺,王芳,李亚娟,郭巧燕.  作物学报. 2006(05)
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[5]烤烟成熟过程中类胡萝卜素变化与其降解香气物质关系[J]. 韦凤杰,刘国顺,杨永锋,王芳,李亚娟,郭巧燕.  中国农业科学. 2005(09)
[6]烤烟烟叶成熟度与香气质量的关系[J]. 赵铭钦,于建春,程玉渊,王玉胜.  中国农业大学学报. 2005(03)
[7]产烟国部分烟区烤烟质体色素及主要挥发性香气物质含量的比较[J]. 周冀衡,王勇,邵岩,杨虹琦,李永平,朱列书.  湖南农业大学学报(自然科学版). 2005(02)
[8]不同产区烤烟中主要潜香型物质对评吸质量的影响研究[J]. 杨虹琦,周冀衡,杨述元,王勇,周清明,罗泽民.  湖南农业大学学报(自然科学版). 2005(01)
[9]不同烤烟产区烟叶中主要挥发性香气物质的研究[J]. 周冀衡,杨虹琦,林桂华,杨述元.  湖南农业大学学报(自然科学版). 2004(01)
[10]小麦杂交种及其亲本拔节期根系基因差异表达与杂种优势关系的初步研究[J]. 王章奎,倪中福,孟凡荣,吴利民,谢晓东,孙其信.  中国农业科学. 2003(05)



本文编号:3616967

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