七株蜜环菌鉴定、生长条件筛选及其与天麻拌栽的适应性研究

发布时间：2022-10-17 17:34

　　蜜环菌（Armillaria mellea）具有很高的生态经济利用价值,是名贵药用中药材天麻的一种共生真菌,天麻的生长发育必须充分依靠蜜环菌为其生长提供所需的营养。蜜环菌因使用时间的增加,加上天麻种植户和菌种生产商的培养管理不当,使得菌种循环使用发生了严重功能退化等不良的现象,寻找和获得具有优势性的蜜环菌已经成为我国天麻产业努力的目标之一。本试验主要通过以下几个方面的科学研究,筛选研制出优良蜜环菌菌株用于天麻生产。第一,通过对七株蜜环菌的分子鉴定,确定七株蜜环菌之间的科学分类关系地位及其亲缘关系;第二,为解决上述问题,本研究通过对七株蜜环菌的生长条件进行筛选,探索七株蜜环菌的生长特点,筛选出适宜蜜环菌生长的优良条件。第三,将七株蜜环菌与三种类型天麻进行拌栽试验,即与天麻的适应性研究,筛选出与不同类型天麻适应性高的菌株。综合以上试验结果,为筛选栽培天麻的优质蜜环菌菌种提供一定理论依据和技术支持。本试验的主要研究成果如下:1.对七株蜜环菌的生物种分子鉴定。通过试验提取了七株蜜环菌的DNA,进行r DNA-ITS和r DNA-TEF序列扩增,构建系统进化树,对七株蜜环菌进行物种鉴定及亲缘关系... 

【文章页数】：84 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 蜜环菌研究进展
        1.1.1 蜜环菌简介
        1.1.2 蜜环菌形态特征
        1.1.3 蜜环菌生长条件研究进展
        1.1.4 蜜环菌的分类研究进展
    1.2 天麻研究进展
        1.2.1 天麻的介绍
        1.2.2 天麻栽培技术研究进展
        1.2.3 天麻化学成分及药理作用研究进展
    1.3 蜜环菌与天麻共生关系的研究进展
        1.3.1 天麻生长与蜜环菌的各个阶段
        1.3.2 蜜环菌对天麻的浸染
        1.3.3 蜜环菌优良品种筛选的研究进展
    1.4 研究目的及意义
第二章 七株蜜环菌鉴定
    2.1 试验材料
        2.1.1 菌种来源
        2.1.2 主要仪器
        2.1.3 主要试剂
    2.2 试验方法
        2.2.1 菌种活化
        2.2.2 七株蜜环菌DNA的提取
        2.2.3 r DNA-ITS的扩增
        2.2.4 r DNA-TEF的扩增
        2.2.5 PCR产物检测和测序
        2.2.6 序列分析
        2.2.7 系统发育树的构建
    2.3 数据分析
    2.4 结果与分析
        2.4.1 蜜环菌分子鉴定结果
    2.5 小结
第三章 七株蜜环菌生长条件研究
    3.1 试验材料
        3.1.1 供试菌株
        3.1.2 主要仪器
        3.1.3 主要试剂及培养基
    3.2 试验方法
        3.2.1 营养条件筛选
        3.2.2 环境条件筛选
    3.3 数据处理
    3.4 结果与分析
        3.4.1 不同碳源对蜜环菌菌索生长的影响
        3.4.2 不同氮源对蜜环菌菌索生长的影响
        3.4.3 不同培养基对蜜环菌菌索生长的影响
        3.4.4 不同温度对蜜环菌菌索生长的影响
        3.4.5 不同光照对蜜环菌菌索生长的影响
        3.4.6 不同pH对蜜环菌菌索生长的影响
    3.5 小结
第四章 七株蜜环菌与三种类型天麻拌栽的适应性研究
    4.1 试验材料
        4.1.1 供试菌株
        4.1.2 其他材料
        4.1.3 主要仪器
        4.1.4 主要试剂
    4.2 试验地点
    4.3 试验方法
        4.3.1 蜜环菌二级半固体母种培养
        4.3.2 蜜环菌三级栽培种制备
        4.3.3 不同蜜环菌与天麻蒴果的有性栽培
        4.3.4 不同蜜环菌与天麻的无性栽培
            4.3.4.1 固定菌床
            4.3.4.2 下种
    4.4 测定项目及方法
        4.4.1 天麻产量的测定
        4.4.2 水分测定
        4.4.3 灰分测定
        4.4.4 浸出物测定
        4.4.5 多糖测定
        4.4.6 天麻素和对羟基苯甲醇测定
            4.4.6.1 色谱条件
            4.4.6.2 对照品溶液的制备
            4.4.6.3 供试品溶液的制备
            4.4.6.4 测定法
    4.5 数据处理
    4.6 结果与分析
        4.6.1 蜜环菌与天麻的有性栽培
            4.6.1.1 不同蜜环菌对红天麻产量和数量的影响
            4.6.1.2 不同蜜环菌对乌天麻产量和数量的影响
            4.6.1.3 不同蜜环菌对绿天麻产量和数量的影响
        4.6.2 蜜环菌与天麻的无性栽培
            4.6.2.1 不同蜜环菌对红天麻产量和数量的影响
            4.6.2.2 不同蜜环菌对乌天麻产量和数量的影响
            4.6.2.3 不同蜜环菌对绿天麻产量和数量的影响
        4.6.3 七株蜜环菌与天麻拌栽后药材的成分含量变化
            4.6.3.1 有性栽培方式
            4.6.3.2 无性栽培方式
        4.6.4 七株蜜环菌对三种天麻主要药用成分含量的影响
            4.6.4.1 有性栽培方式
            4.6.4.2 无性栽培方式
    4.7 小结
        4.7.1 不同蜜环菌菌株对天麻产量和数量的影响
        4.7.2 不同蜜环菌菌株对天麻有效成分的影响
        4.7.3 不同蜜环菌菌株对天麻药用成分含量的影响
参考文献
致谢
附录
图版


【参考文献】：
期刊论文
[1]天麻和天麻素改善糖脂代谢紊乱的药理学研究进展[J]. 王灿,于滨,孔维佳.  中国医药导报. 2016(27)
[2]天麻化学成分研究进展[J]. 李云,王志伟,刘大会,王晓,周洪雷.  山东科学. 2016(04)
[3]Parishin C’s prevention of Aβ1–42-induced inhibition of long-term potentiation is related to NMDA receptors[J]. Zhihui Liu,Weiping Wang,Nan Feng,Ling Wang,Jiangong Shi,Xiaoliang Wang.  Acta Pharmaceutica Sinica B. 2016(03)
[4]天麻素及派立辛改善东莨菪碱致学习记忆障碍的构效关系[J]. 刘智慧,马浩,王伟平,徐少锋,王玲,石建功,王晓良.  药学学报. 2016(05)
[5]天麻多糖对环磷酰胺所致免疫功能低下小鼠体液免疫功能的影响[J]. 李晓冰,展俊平,张月腾,谢忠礼,朱艳琴,陈玉龙,程凯,王君明,李瑞琴.  中国老年学杂志. 2016(05)
[6]天麻素调控癫痫大鼠大脑皮质凋亡因子的作用研究[J]. 边立功,毕秀梅,艾青龙,郭家智,董书勤,许金美,钟莲梅,陆地.  神经解剖学杂志. 2016(01)
[7]蜜环菌培养中最佳碳氮比的研究[J]. 施汉钰,崔巍,郑焕春.  林业科技. 2015(06)
[8]不同树种菌材对贵州仿野生栽培天麻的影响[J]. 刘威,赵致,王华磊,罗夫来,李金玲,罗春丽.  北方园艺. 2015(10)
[9]基于主成分分析的天麻矿质元素含量研究[J]. 李金玲,赵致,刘红昌,罗春丽,黄明进,罗夫来,王华磊.  中国中药杂志. 2015(06)
[10]天麻多糖对小鼠免疫性肝损伤的保护作用[J]. 李峰,朱洁平,王艳梅,周恩红,沈业寿.  中药药理与临床. 2015(01)

博士论文
[1]云南特有食药用菌活性多糖研究[D]. 明建.西南大学 2008
[2]中国蜜环菌的遗传学与系统学研究[D]. 秦国夫.中国林业科学研究院 2002

硕士论文
[1]昭通天麻共生优良蜜环菌的筛选及特性研究[D]. 彭述敏.西南林业大学 2011



本文编号：3692491