连作地黄根际群体感应菌群变化及其作用机理

发布时间：2023-05-27 04:35

　　地黄(Rehmannia glutinosa L.)是玄参科多年生草本药用植物,其块根药用价值高,但其栽培过程中也存在十分严重的连作障碍问题。前人研究认为,根际土壤微生物群落结构变化与植物的生长发育关系密切。土壤是个极其复杂的黑箱,土壤中的微生物间存在复杂的互作关系,如群体感应(Quorum sensing,QS)与群体感应淬灭(Quorum quenching,QQ)现象。然而,有关群体感应与群体感应淬灭在地黄连作障碍形成过程中的作用与角色,至今鲜有报道。故本研究以不同连作年限地黄根际土壤为研究对象,借助群体感应检测工程菌、96孔液体培养法等,系统分析地黄连作下群体感应菌、群体感应淬灭菌菌群动态变化,并进一步通过滴定法、OD值测定法等分析关键化感物质对特异群体感应与淬灭细菌生长的影响,分析植物—微生物互作关系,以期阐明群体感应与群体感应淬灭在地黄连作障碍形成中的作用机制。具体研究结果如下:头茬地黄根际土壤随机挑选出的200株单菌落中有65株群体感应(QS)菌,主要以假单胞菌属(58.5%)为主,重茬地黄病土中随机挑选出的200株单菌落中有34株群体感应菌,主要以肠杆菌属(73.5%)...

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
第一章 文献综述
    1.1 地黄及其连作障碍
        1.1.1 地黄概述
        1.1.2 连作障碍及其研究进展
        1.1.3 地黄连作障碍与土壤微生物
    1.2 群体感应与连作障碍问题
        1.2.1 群体感应和群体感应淬灭概念
        1.2.2 群体感应与植物病害
        1.2.3 群体感应淬灭与植物病害生物防治
        1.2.4 根系分泌物与群体感应和群体感应淬灭间的关系
        1.2.5 群体感应和群体感应淬灭与连作障碍
    1.3 群体感应信号分子检测方法
        1.3.1 群体感应检测工程菌指示法
        1.3.2 理化检测法
    1.4 群体感应淬灭检测方法
        1.4.1 群体感应淬灭菌筛选
        1.4.2 群体感应淬灭剂筛选
    1.5 本实验研究目的及其意义
第二章 连作地黄根际群体感应菌筛选鉴定及其功能分析
    2.1 材料与方法
        2.1.1 群体感应菌的筛选
        2.1.2 待测菌株基因组DNA提取及16s rDNA基因PCR扩增
        2.1.3 群体感应菌对地黄主要致病性真菌的拮抗性评价及计数统计
        2.1.4 群体感应菌对地黄组培苗致病性验证
        2.1.5 群体感应菌对根系分泌物中关键化感物质-酚酸类物质趋化性分析
        2.1.6 不同浓度混合酚酸对7株群体感应菌菌体生长的影响
    2.2 结果与分析
        2.2.1 地黄根际群体感应菌的筛选
        2.2.2 群体感应菌对地黄主要致病性真菌的拮抗性评价及计数统计
        2.2.3 群体感应菌对地黄组培苗致病性验证分析
        2.2.4 群体感应菌对根系分泌物中关键化感物质即酚酸类物质的趋化性分析
        2.2.5 酚酸类物质对特异关键群体感应菌生长的影响
    2.3 讨论与小结
第三章 油菜假单胞菌特异性群体感应淬灭菌筛选及其生理特性测定
    3.1 材料与方法
        3.1.1 油菜假单胞菌(PB) AHL信号分子的提取及检测
        3.1.2 淬灭油菜假单胞菌AHL信号分子的群体感应淬灭菌(QQ)筛选及鉴定
        3.1.3 不同浓度混合酚酸对PB群体感应淬灭菌菌体生长的影响
        3.1.4 PB特异群体感应淬灭菌对地黄组培苗的致病性验证
    3.2 结果与分析
        3.2.1 油菜假单胞菌(PB) AHL信号分子检测
        3.2.2 PB特异群体感应淬灭菌种类分析及数量统计
        3.2.3 不同浓度混合酚酸对PB特异群体感应淬灭菌生长的影响
        3.2.4 PB特异群体感应淬灭菌对地黄组培苗生长的影响
    3.3 讨论与小结
第四章 总结与展望
    4.1 总结
    4.2 展望
参考文献
附录
攻读学位期间的学术论文与研究成果
致谢



本文编号：3823901