苦豆子遗传转化体系的建立和盐胁迫下SaLDC表达分析

发布时间：2024-01-24 19:28

　　赖氨酸脱羧酶基因(SaLDC)是苦豆子中氧化苦参碱和苦参碱生物合成的第一个关键酶基因,在其生物代谢过程中具有重要意义。本研究以宁夏中药材苦豆子为材料,对实验室已有子叶节再生体系进一步优化,并以此优化的再生体系为基础,将构建的SaLDC超表达载体以传统方法和原位转化方法分别遗传转化苦豆子子叶节,获得T0代转基因植株,为SaLDC基因功能研究奠定基础。用NaCl溶液模拟盐环境胁迫苦豆子种子,分析种子萌发时的耐盐阈值和耐盐相关的生理特性、SaLDC的基因表达及与该基因直接产物尸胺(Cad)含量的关系;同时花序侵染法将SaLDC超表达载体遗传转化拟南芥,用NaCl溶液胁迫转基因拟南芥T2代株系,探讨SaLDC对盐胁迫的响应。得到以下研究结果:(1)苦豆子愈伤组织诱导的最佳外植体是子叶节,优化后的苦豆子子叶节再生体系,最佳丛生芽诱导培养基为:MS+1.25 mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 NAA;最佳丛生芽增殖培养基为:MS+1.5 mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 NAA+0.3 mg·L-1 IBA。(2)构建超表达载体pCAMBIA3301-SaLDC,将预培养2...

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【学位级别】：硕士

图２－１苦豆子子叶节最佳诱导分化（Ａ）和增殖（Ｂ）培养??

图２４重组质粒ｐＣＡＭＢＩＡ３３０１＋ＳａＩ￡？Ｃ农杆菌菌液ＰＣＲ检测??注：ｈ?ＤＬ２０００?ＤＮＡＭａｒｋｅｒ：?２－９?重组质粒ＣＡＭＢＩＡ３３０１＋ＳａｉＯＣ??

图２－６农杆菌介导传统遗传转化法的苦豆子子叶节丛生芽的诱导??

图２－５传统遗传转化法苦豆子转基因植株的ＰＣＲ鉴定??－

本文编号：3884333