黄草乌再生体系构建

发布时间：2024-02-06 21:00

　　黄草乌(Aconitum vilmorimianum Kom.)为云南白药主要成分之一,是乌头属(Aconitum L.)毛茛科(Ranunculaceae)一种应用广泛的中药材,具有镇痛除湿的功效,同时也是当代医学中治疗糖尿病、高血压等病症的理想材料。然而,其入药部分根状茎含有剧毒,严重约束了该药物在临床上的应用。根据本研究组前期发现,BAHD基因家族是造成黄草乌毒性的主要原因,为后期验证基因功能提供植株再生遗传转化体系,本实验以黄草乌种子、腋芽、茎段、叶片为外植体,通过消毒条件的优选、芽诱导、愈伤组织诱导和分化等步骤,构建黄草乌再生体系,研究如下:种子萌发体系:以黄草乌种子为外植体,经过消毒条件优选、萌发诱导摸索黄草乌种子萌发体系的最适培养条件。在选择合适的外植体消毒条件的实验中,0.1%HgCl₂为消毒剂,种子不萌发;75%酒精消毒30 s,10%NaClO消毒30 min条件下种子污染率为1.33±1.33%,是种子最佳消毒条件。该消毒条件下,种子在MS+2.0 mg/l 6-BA+0.1 mg/l NAA芽诱导培养基中萌发率达到66.00±4.89%,是...

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【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 黄草乌的生物学习性及国内外研究进展
    1.2 植物组织培养技术及其应用
    1.3 再生体系建立技术目前存在的问题
    1.4 再生体系建立技术在药用植物方面的应用
    1.5 研究目的和意义
    1.6 研究技术路线
第二章 材料与方法
    2.1 实验材料
    2.2 实验试剂与仪器
        2.2.1 实验试剂
        2.2.2 实验仪器
    2.3 实验方法
        2.3.1 培养基质与培养条件
        2.3.2 种子萌发体系的建立
        2.3.3 茎段快繁体系的建立
        2.3.4 愈伤组织诱导及分化
        2.3.5 黄草乌基因组大小测定
        2.3.6 数据统计和分析
第三章 结果与分析
    3.1 种子萌发体系建立
        3.1.1 种子吸水曲线
        3.1.2 GA₃对种子萌发的影响
        3.1.3 种子表面超微形态的观察
        3.1.4 消毒条件对种子表面消毒的影响
        3.1.5 附生菌鉴定
    3.2 茎段快繁体系的建立
        3.2.1 消毒条件对外植体表面消毒的影响
        3.2.2 外植体对芽诱导影响
        3.2.3 激素对不定芽诱导的影响
        3.2.4 激素对不定芽增殖的影响
    3.3 愈伤组织诱导及分化
        3.3.1 愈伤组织诱导
        3.3.2 愈伤组织分化
    3.4 黄草乌基因组大小测定
第四章 讨论
    4.1 种子快繁体系的研究
        4.1.1 消毒条件对种子表面消毒的影响
        4.1.2 黄草乌种子休眠的解除
    4.2 茎段快繁体系的研究
        4.2.1 消毒条件和外植体对茎段快繁体系的影响
        4.2.2 芽诱导和增殖培养基中激素的选择
    4.3 愈伤组织诱导及分化研究
        4.3.1 愈伤组织诱导
        4.3.2 愈伤组织分化
附录一 缩略语
参考文献
致谢



本文编号：3896178