烟草茄尼醇合成关键酶基因表达模式分析及NtSPS基因的功能研究

发布时间：2024-05-13 00:12

　　烟草是一种重要的经济作物,因其烟叶中富含多酚、茄尼醇、烟碱等多种有益成分而具有重要的医药价值。其中茄尼醇是一些重要药物的中间体,可用于合成辅酶Q10和维生素K2等泛醌类药物和抗癌增效剂SDB。目前,医药上利用的茄尼醇主要来源于废弃烟叶,因此对烟草茄尼醇的生物合成进行研究,对茄尼醇含量的调控具有重要的意义。本研究利用超高效液相色谱和实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)方法,测定了茄尼醇含量差异显著的烟草品种红花大金元(含量高)和中烟90(含量低)6个发育时期根、茎、叶中茄尼醇含量以及萜类代谢关键酶基因的表达,分析了茄尼醇积累与各关键酶基因表达的相关性。另外,通过克隆得到了烟草茄尼基焦磷酸合酶的基因,并对基因序列进行了生物信息学分析,最后通过构建过表达载体,对该基因的功能进行了研究。主要的研究结果如下:(1)茄尼醇在红花大金元和中烟90的6个取样时期茄尼醇含量:叶>茎>根。两品种中7种萜类关键酶基因表达模式不尽相同,FPS、DXR、IPI、SPS、GGPPS基因的表达从苗期至开花期表达量逐渐上升,在根中至现蕾期表达量最高,在茎、叶中开花期最高,随后迅速下降。相关性分析表明,DX...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1萜类合成途径（申培林，2011）

图1萜类合成途径（申培林，2011）Fig.1ThepathwayofTerpenesynthesis1.2.3萜类合成途径中的关键酶现在对于萜类化合物合成途径现在已经基本清楚（张伟，2014），现在研究比较多的是萜生物合成过程中的关键酶类，萜类化合物的生物合成大....

图7NtSPS基因的菌液PCR扩增Fig.7PCRanalysisofNtSPS

1000bp图6NtSPS基因的PCR扩增Fig.6PCRanalysisofNtSPS.2目的片段的验证（1）菌液PCR验证将此PCR产物进行切胶回收，然后将得到的目的片段连接到pEASYTM-BluntZero克把重组载体转化TransT1....

图8SPS基因的质粒PCR扩增Fig.8PlasmidPCRanalysisofNtSPS

证证切胶回收，然后将得到的目的片段连接到pEASransT1感受态细胞，挑取阳性菌落，进行菌液PCR成功连接到克隆载体上，大部分的菌落均为阳性菌图7NtSPS基因的菌液PCR扩增Fig.7PCRanalysisofNtSPS证的条带的阳性菌落，将阳性菌落进....

图11烟草NtSPS1基因的亲水性/疏水性预测

中国农业科学院硕士学位论文第三章烟草茄尼基焦磷酸合酶（NtSPS）基因的克隆

本文编号：3972095